倪庆胜
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
- 供职机构:安徽农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程更多>>
- 疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体制备及鉴定被引量:2
- 2014年
- 目的制备抗疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体,鉴定其与组织抗原MDIi的反应性。方法以PCR扩增获得MDIi序列构建原核表达载体pET-32a/MDIi,转化大肠杆菌进行表达;对表达产物鉴定后,免疫小鼠制备抗MDIi多克隆抗体;间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,间接ELISA检测抗体与疣鼻栖鸭组织MDIi的反应强度。结果成功构建了pET-32a/MDIi原核表达载体,诱导表达了相对分子质量(Mr)约40 000的包涵体形式的MDIi重组蛋白,免疫小鼠获得效价为1∶128 000的特异性多克隆抗体,抗体与疣鼻栖鸭组织中的MDIi反应滴度为1∶32 000。结论成功制备了高效价的特异性抗MDIi多克隆抗体,抗体与组织抗原有较强的免疫反应性。
- 刘生杰朱茂英陈德宇吴超倪庆胜余为一
- 关键词:多克隆抗体组织抗原
- 鸡恒定链活性片段和NDVF蛋白表位嵌合体的制备及鉴定
- 恒定链Ii(Invariantchain)是一种非多态性的Ⅱ型跨膜糖蛋白,由胞浆区、跨膜区和内质网腔区三部分组成。恒定链在脊椎动物中作为MHCⅡ类分子成熟的分子伴侣,在协助MHCⅡ分子递呈抗原过程中起重要作用。恒定链基因...
- 倪庆胜
- 关键词:活性片段
- 鸡恒定链活性片段和NDVF蛋白表位嵌合体的构建与鉴定
- 2012年
- [目的]为研究基于恒定链(Ii)分子片段的免疫载体提供试验材料。[方法]利用鸡恒定链的部分有免疫活性的片段作为免疫载体结构,构建含新城疫病毒F蛋白抗原片段的嵌合体。[结果]成功构建了Ii-key/F306、Ii-key/F306/AP、Cyt/Ii-key/F306和Cyt/Ii-key/F306/AP 4个嵌合体。重组质粒能被诱导表达相应蛋白分子,而且通过纯化获得95%高纯度。[结论]该试验中嵌合体的成功制备为动物免疫试验奠定了基础。
- 倪庆胜陈芳芳余为一
- 关键词:新城疫病毒融合蛋白嵌合体原核表达纯化
- 鸳鸯鸭恒定链两异构体组织转录模式研究被引量:1
- 2014年
- 为探索鸳鸯鸭恒定链(MDIi)两种异构体MDIi-1和MDIi-2在不同组织或器官中的转录模式,建立了检测MDIi-1和MDIi-2组织转录的实时相对定量PCR方法,检测并分析了MDIi-1和MDIi-2在不同组织或器官中的转录特点。结果显示MDIi-1在法氏囊底部的转录水平为各组织或器官中最低(设为校正器);和校正器比较,MDIi-1在脾和小肠黏膜呈最高水平转录,而法氏囊颈部、肝、肾、胸腺和血液也呈较高水平转录,其他器官均低水平转录;MDIi-2在脾、法氏囊颈部和小肠黏膜也呈超过校正器的高水平转录,胸腺、肺和肾的转录水平仅略低于校正器,其他组织或器官转录水平都远低于校正器,呈极低水平转录。同一组织或器官中MDIi-1转录水平远高于MDIi-2,但MDIi-1和MDIi-2在所有被检组织或器官中转录具有很高的相关性,相关性系数达0.850 7。MDIi-1和MDIi-2共转录于所有被检组织或器官中,每一组织或器官中MDIi-1是主要转录形式,在所有被检组织或器官中两异构体均高转录于具有免疫防御功能的器官或组织,MDIi-1和MDIi-2差异性转录的试验结果为后续两异构体功能机制和基于MDIi的基因疫苗研究提供了基础资料。
- 刘生杰吴超倪庆胜余为一
- 关键词:鸳鸯鸭异构体