范胜涛
- 作品数：46 被引量：56H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划云南省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 吉林省汉坦病毒宿主动物携带病毒的遗传进化分析被引量：8
- 2014年
- 目的对吉林省汉坦病毒（Hantavirus，Hv）宿主动物携带病毒进行遗传进化分析。方法采集吉林省不同地区鼠肺样品，应用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay，IFA）鉴定出HV感染的阳性样本，利用Trizol试剂提取病毒RNA，RT-PCR法扩增阳性样本中M和S片段基因，并进行测序，应用DNASTAR软件对M和S片段基因的核苷酸同源性进行分析，并与汉城病毒（Seoulvirus，SEOV）参考株进行比较；利用MegAligh软件进行蛋白序列中氨基酸差异性分析；利用MEGA5.0软件进行系统发生分析。结果共捕获719只啮齿动物，其中褐家鼠（R.norvegicus）555只，黑线姬鼠（A.agrarius）74只，小家鼠（胍m12sclzllzs）90只，HV抗原阳性率为1.39％（10／719）；10份阳性样本中，7份来自褐家鼠，2份来自小家鼠，1份来自黑线姬鼠。用全长s引物扩增得到的10株病毒全长s基因片段，经同源性分析比较发现，各序列间的核苷酸同源性在92.8％～95.1％之间，与其他SEOV核苷酸同源性在90.2％～94.7％之间；用M引物扩增得到的部分基因片段，经同源性分析比较发现，各序列间的核苷酸同源性在96.5％～99.5％之间，而与其他SEOV核苷酸同源性在91.5％～97.7％之间；10株病毒全部属于SEOV。黑线姬鼠G蛋白365～769位点问有5个氨基酸差异位点（V494L、C546S、Y626C、M630L和V637I），小家鼠G蛋白365～769位点问主要有5个氨基酸差异位点（C378G／R、F420L、Q436P／R、E535G／A和C589G／W），但同种间在378、436、535和589位点也有差异；黑线姬鼠N蛋白1～430位点间存在P298L变异；小家鼠N蛋白变异位点较多，主要在M24K／N、A37D、1140M、M173K、D192E、L219V、P229A、D237E、H265Y、V284L、T333S、A389G和V425E变异。分离得到的10株病毒根据不同的来源地可分为两个不同的进化分支。结论研究表明吉林省宿主动物携带的HV仍以SEOV为主，其遗传进化呈现多
- 范胜涛高晓龙李元果应瑛国娇张钊伟刘红吴静杨松涛赵永坤秦川高玉伟夏咸柱
- 关键词：汉坦病毒进化
- 一种重组蛋白K-S及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种重组蛋白K‑S及其制备方法和应用，属于生物技术领域，方案包括在所述S1蛋白的核苷酸序列上，对6个关键位点进行突变，突变位点及碱基分别为：G1251T，T1355G，G1450C，A1501T，A1841G...
- 李琦涵范胜涛徐兴丽李丹丹赵恒于丽蒋国润廖芸张莹王丽春张晶晶段素琴高扬曾烽原徐祥雄
- 文献传递
- 核定位人源α-突触核蛋白转基因小鼠的建立
- 2024年
- 目的 建立一种核定位人源α-突触核蛋白(α-synuclein, α-syn)转基因小鼠,并探究人源α-syn核输入对小鼠行为的影响。方法 构建hSNCA-NLS和EGFP的慢病毒载体,利用显微注射法建立转基因小鼠模型,通过PCR和Western Blot方法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型和蛋白表达情况。采用免疫荧光鉴定人源α-syn在小鼠脑组织中的共定位情况,同时采用旷场、转棒、O迷宫实验评价转基因小鼠的行为改变情况。结果 hSNCA-NLS基因成功插入小鼠基因组中,人源α-syn成功表达,并且有明显的核定位现象。进一步研究发现,核定位人源α-syn转基因小鼠在2月龄时开始表现出了运动功能障碍,发生了星形胶质细胞增生和炎症反应,于9月龄时表现出了明显的焦虑样症状,γ-氨基丁酸(GABA)基因表达减少,这些表现一直持续到小鼠12月龄。结论 成功构建了核定位人源α-syn转基因小鼠,小鼠表现出明显的运动功能障碍和焦虑样症状。该模型的成功建立可以为研究α-syn核定位现象在帕金森病中的作用提供一定的研究基础。
- 韦梦晨范胜涛吴海婷张艺薇王子鸥黄璋琼
- 关键词：小鼠核定位转基因运动功能障碍
- 一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用
- 本发明公开一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用，在商品化的基础培养液TL‑FERT中添加组合营养添加剂FBS+猴血清+100×非必须氨基酸+50×必须氨基酸，取出未成熟卵母细胞放置其中培养，培养液上方添加...
- 黄璋琼范胜涛马开利唐东红吴正存江勤芳李云
- 基于CRISPR/Cas9系统构建Uox基因敲除的高尿酸血症小鼠模型
- 2025年
- 目的 通过CRISPR/Cas9技术构建Uox基因敲除且能稳定遗传的小鼠品系,并评价其是否能够模拟高尿酸血症患者的疾病特点。方法 在Uox基因Exon 2~4的前后两侧设计双sgRNA,将基因敲除所需的sgRNA与Cas9 mRNA按照一定比例显微注射进小鼠的受精卵中,培养2~4 h后,将胚胎移植至代孕母鼠体内并最终获得F0代小鼠。对F0代小鼠进行PCR鉴定与测序分析,筛选适合的Uox基因阳性敲除小鼠与野生型(wide type, WT)小鼠合笼获得F1代,再挑选F1代中杂合子(基因型为Uox^(+/-))雌鼠与雄鼠合笼得到纯合的F2代小鼠(基因型为Uox^(-/-))。最后检测Uox^(-/-)小鼠与WT小鼠血清尿酸、尿液尿酸,血清中肌酐、尿素、丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶的含量并进行对比,通过苏木素-伊红(HE)染色结合Masson染色观察肾和肝组织的病理变化。结果 与WT小鼠相比,Uox^(-/-)小鼠血清尿酸(雄鼠:(478.4±114.6)μmol/L,P<0.001;雌鼠:(507.7±129.6)μmol/L,P<0.001)、尿液尿酸(雄鼠:(4116.8±1928.1)μmol/L,P<0.001;雌鼠:(2998.0±547.7)μmol/L,P<0.01)、血清中肌酐((91.8±55.6)μmol/L,P<0.001)、尿素((28.6±13.9) mmol/L,P<0.05)、丙氨酸氨基转移酶((53.3±23.3) U/L,P<0.01)及门冬氨酸氨基转移酶((203.3±70.3) U/L,P<0.001)水平均显著升高。组织病理学的结果显示,Uox^(-/-)小鼠的肝中可见中量肝细胞变性,肾中可见中重度的肾小管囊性扩张、变性和纤维化,肾小球肥大增生,小血管扩张充血,间质单核及淋巴细胞浸润。结论 通过CRISPR/Cas9技术成功构建了Uox基因Exon 2敲除的小鼠纯合品系,可以作为高尿酸领域相关研究的动物模型。
- 张艺薇龙维虎唐东红范胜涛王鹏王陈芸李哲丽黄璋琼叶尤松
- 关键词：高尿酸血症动物模型基因敲除尿酸氧化酶
- 一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用
- 本发明公开一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用，在商品化的基础培养液TL‑FERT中添加组合营养添加剂FBS+猴血清+100×非必须氨基酸+50×必须氨基酸，取出未成熟卵母细胞放置其中培养，培养液上方添加...
- 黄璋琼范胜涛马开利唐东红吴正存江勤芳李云
- 一种用于评价食蟹猴脂肪组织中FABP4基因mRNA表达的qPCR检测方法
- 本发明涉及基因检测技术领域，特别是涉及一种用于评价食蟹猴脂肪组织中FABP4基因mRNA表达的qPCR检测方法。本发明提供的引物组可实现食蟹猴FABP4基因及内参基因GAPDH的特异性扩增，对样本中的非目的基因没有扩增信...
- 王陈芸唐东红叶尤松龙维虎李哲丽李咏洁张桃苹范胜涛黄璋琼江勤芳杨万静杨汝佳
- 一种高尿酸伴随高血糖和肝功能损害的小鼠模型的构建方法
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种高尿酸伴随高血糖和肝功能损害的小鼠模型的构建方法。根据Uox基因Exon 2‑4的前后两侧设计双sgRNA，将基因敲除所需的sgRNA与Cas9mRNA混匀后通过显微注射进小鼠的受精卵...
- 黄璋琼范胜涛叶尤松龙维虎刘妙唐东红张艺薇李哲丽王陈芸王子鸥
- 一种用于食蟹猴精液质量评价的Sirt1 mRNA表达的qPCR检测方法
- 本发明提供了一种用于食蟹猴精液质量评价的Sirt1mRNA表达的qPCR检测方法，属于检测方法，具体方法为以食蟹猴新鲜精液提取的总RNA逆转录合成得到的cDNA为模板，利用PCR引物组合进行实时荧光定量PCR扩增，获得S...
- 王陈芸唐东红叶尤松 龙维虎李哲丽 李咏洁 张桃苹范胜涛黄璋琼江勤芳 杨万静 杨汝佳 高羽
- 病毒性疾病基因修饰小鼠模型的研究进展
- 2024年
- 随着腺相关病毒、慢病毒载体转染及靶向核酸酶等基因修饰技术迅速发展,其被广泛应用于构建病毒性疾病基因修饰小鼠模型,这对于研究病毒的结构、功能及致病机制具有重要的价值。本文就近年来构建的基因修饰小鼠病毒感染模型进行梳理,讨论基因修饰技术在多种病毒性疾病小鼠模型中的研究进展,分析这些模型对在病毒性疾病的预防和治疗中的应用前景,以期为病毒性疾病相关的治疗药物和疫苗研究提供参考。
- 吴海婷范胜涛张才星李牧遥张艺薇黄璋琼
- 关键词：基因修饰病毒性疾病小鼠模型
