王佳
- 作品数：53 被引量：107H指数：6
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 一种猪支原体肺炎活疫苗黏膜免疫佐剂、制备方法及其应用
- 本发明提供一种猪支原体肺炎活疫苗黏膜免疫佐剂、制备方法及其应用，涉及兽用疫苗领域。该黏膜佐剂是含有霍乱毒素B亚单位和猪肺炎支原体P97R1抗原融合表达的重组蛋白CTB‑P97R1的溶液。本发明还提供所述黏膜佐剂的制备方法...
- 熊祺琰张珍珍邵国青冯志新韦艳娜王佳白昀甘源张磊
- 文献传递
- 构建猪肺炎支原体小鼠发病模型的方法及鉴别猪肺炎支原体强弱毒株的方法
- 本发明提供构建猪肺炎支原体小鼠发病模型的方法及鉴别强弱毒株的方法，属于动物模型领域。构建方法是对小鼠进行两次攻毒，第一次攻毒后13‑15天，获得小鼠发病模型；第二次攻毒是在第一次攻毒后42‑54小时进行的；每次攻毒时，向...
- 谢星邵国青冯志新甘源韦艳娜张磊庞茂达杨浩张珍珍王佳武昱孜刘蓓蓓熊祺琰刘茂军
- 文献传递
- 基于Mhp336蛋白的猪肺炎支原体ELISA抗体检测方法的建立被引量：2
- 2024年
- 本研究拟建立一种高特异性的猪肺炎支原体酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)抗体检测方法。首先,构建重组菌大肠杆菌BL21(DE3)-p ET-32a(+)-mhp336,诱导重组蛋白Mhp336表达并纯化,获得的纯化蛋白作为包被抗原;然后,确定ELISA方法的抗原包被浓度、封闭液和封闭时间、血清和二抗稀释比例和孵育时间、显色时间和判定标准;之后进行重复性试验、与猪的其他主要病原抗血清的交叉反应性和确定血清最大稀释倍数;最后,用建立的方法检测226份猪血清样品,并与商品化猪肺炎支原体ELISA抗体检测试剂盒和猪肺炎支原体ELISA恢复期血清抗体检测方法进行比较,确定检测方法的灵敏性和特异性。最终确定Mhp336纯化蛋白的最佳包被浓度为0.05μg/m L,封闭液为含2.5%脱脂奶粉的PBS,封闭时间为1 h,血清稀释比例为1:500,孵育时间为0.5 h,二抗稀释比例为1:10000,孵育时间为1 h,显色时间为5 min。检测方法的cut off值为0.332。试剂盒的批内和批间变异系数均低于7%。猪血清样品的检测结果表明,本研究建立的检测方法的灵敏性和特异性均优于商品化猪肺炎支原体ELISA抗体检测试剂盒和猪肺炎支原体ELISA恢复期血清抗体检测方法。本研究成功建立了基于Mhp336蛋白的猪肺炎支原体ELISA抗体检测方法,灵敏性和特异性均较好,为猪场猪支原体肺炎的净化提供了检测方法。
- 淦雨洁董青霜张阳何佳蔚王冬经冯志新王佳周可心丁红雷
- 关键词：猪肺炎支原体原核表达灵敏性特异性
- 猪肺炎支原体亚单位疫苗、制备方法及其应用
- 本发明提供猪肺炎支原体亚单位疫苗、制备方法及其应用，属于动物疫苗领域。本发明猪肺炎支原体亚单位疫苗，抗原是猪肺炎支原体融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述的制备方法，包括如下步骤：（1）制备含有所述融...
- 于岩飞冯志新熊祺琰王佳刘茂军邵国青韦艳娜袁厅李嘉豪
- 猪肺炎支原体PCR检测方法的标准物质和标准化程序
- 目的 猪支原体肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS)由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)引起的,是猪呼吸道疾病综合征(PRDC)的原发病原之一,...
- 张磊冯志新熊祺琰刘茂军刘蓓蓓韦艳娜武昱孜王海燕王佳邵国青
- 关键词：猪肺炎支原体标准物质
- 猪鼻支原体临床分离株体外抗生素敏感性研究
- 2024年
- 为探究猪鼻支原体(Mhr)临床分离株对常见抗生素的敏感性,利用微量肉汤稀释法检测12种临床常见支原体病治疗用抗生素对本实验室2010-2021年间分离得到的31株Mhr临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)。结果显示:Mhr临床分离菌株对泰妙菌素最为敏感,其MIC_(50)为0.030μg/mL,MIC_(90)为0.125μg/mL;对多西环素与环丙沙星也较为敏感,MIC_(50)和MIC_(90)值均为0.50和1.00μg/mL;对泰乐菌素和泰万菌素的MIC呈现双峰分布;对替米考星和林可霉素的MIC_(90)值均达到≥128μg/mL,分别有29%和32%的菌株MIC≥128μg/mL,出现了明显的耐药趋势。本研究结果丰富了我国Mhr临床菌株的药物敏感性数据,为临床用药提供了数据支撑及合理指导。
- 邵佳韦艳娜王佳王佳黄媛媛华利忠甘源华利忠甘源邵国青刘蓓蓓熊祺琰
- 关键词：临床分离株药物敏感性
- GEL 01佐剂联合猪支原体肺炎活疫苗黏膜接种的效果评估被引量：4
- 2018年
- 为评估水性佐剂GEL 01对猪支原体肺炎活疫苗的黏膜接种效果的影响,本研究以小鼠为动物模型,将猪肺炎支原体(168株)活疫苗与水性佐剂GEL 01滴鼻免疫小鼠,于免疫后不同时间点收集血清和支气管肺泡灌洗液,检测其中抗原特异性抗体水平和相关细胞因子的分泌情况,并检测了GEL 01对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果显示Gel 01联合活疫苗黏膜接种后,支气管肺泡灌洗液中抗原特性抗体(IgG、IgG1、IgG2a和sIgA)的水平显著高于单独疫苗组,同时支气管肺泡灌洗液中Th1(IFN-γ)型、Th2(IL-4)型和Th17(IL-17)型细胞因子分泌显著增加;另外,GEL 01联合猪肺炎支原体活疫苗黏膜接种后,促进小鼠淋巴细胞的显著增殖,并同时上调血清中IgG、IgG1、IgG2a抗体水平。以上结果说明GEL 01作为黏膜佐剂配合猪支原体肺炎活疫苗使用时,可全面激活宿主免疫系统,尤其是与猪肺炎支原体感染免疫保护相关的呼吸道局部黏膜免疫和全身循环系统的细胞免疫。
- 张珍珍韦艳娜王佳王海燕熊祺琰邵国青冯志新
- 关键词：佐剂黏膜猪支原体肺炎活疫苗
- 猪鼻支原体3-磷酸甘油醛脱氢酶黏附宿主细胞及劫持纤溶系统降解细胞外基质的功能研究
- 猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)在断奶仔猪群中感染率极高,可引发猪的多发性浆膜炎、关节炎、中耳炎等症状。猪鼻支原体黏附进而突破呼吸道屏障一般认为是其形成全身性感染诱发疾病的关键,但具体机制尚不明确。...
- 王佳李瑶潘隆基郝飞邵国青冯志新熊祺琰
- 关键词：GAPDH胞外基质
- GEL01佐剂作用于猪支原体肺炎活疫苗黏膜接种的效果评估
- 为评估水性佐剂GEL 01对猪支原体肺炎活疫苗的黏膜接种效果的影响,本研究以小鼠为动物模型,将猪肺炎支原体(168株)活疫苗与水性佐剂GEL 01滴鼻免疫小鼠,于免疫后不同时间点收集血清和支气管肺泡灌洗液,检测其中抗原特...
- 张珍珍韦艳娜王佳王海燕熊祺琰邵国青冯志新
- 关键词：佐剂黏膜猪支原体肺炎活疫苗
- 1株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的制备与鉴定猪鼻支原体单克隆抗体,用于猪鼻支原体诊断及致病机理的研究。方法将猪鼻支原体全菌蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。鉴定其抗体亚型并对纯化单抗的效价、特异性进行鉴定。将该单抗用于菌落免疫杂交试验、间接免疫荧光试验。结果获得了1株猪鼻支原体单抗,命名为Mhr-08。该单抗的亚型属于IgG1,轻链为κ型。ELISA测定该纯化单抗效价为1∶102 400,Western-blot检测结果表明,该单抗与猪鼻支原体全菌蛋白在43kDa处出现特异性反应条带,与猪其他支原体、大肠杆菌及KM2培养基无交叉反应;该单抗为猪鼻支原体表面膜蛋白抗体,可成功应用于菌落免疫杂交试验;将其用于间接免疫荧光试验可成功检测出黏附于猪气管上皮细胞上的猪鼻支原体。结论成功制备和鉴定出1株猪鼻支原体单克隆抗体,该特异性单抗的获得为猪鼻支原体的诊断及致病机理的研究提供了工具。
- 田瑞雨熊祺琰倪博王佳韦艳娜韦艳娜冯志新
- 关键词：单克隆抗体特异性
