杨振龙
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：吉首大学生物资源与环境科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技计划项目湖南省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 红斑丹毒丝菌SpaA蛋白保护区域的免疫学检测被引量：4
- 2013年
- 为了确定菌体表面保护性抗原A(SpaA)的免疫保护区域,通过PCR从红斑丹毒丝菌C43065株基因组DNA中分别扩增出编码成熟SpaA及其N端342个氨基酸序列(SpaA-N)和C端160个氨基酸序列(SpaAC)的基因片段,将它们分别克隆到表达载体pET32a上,转化入大肠埃希菌BL21,IPTG诱导,亲和层析法纯化重组蛋白,并检测它们对小鼠的保护作用。SDS-PAGE结果显示重组SpaA、SpaA-N和SpaA-C以可溶性形式表达在大肠埃希菌BL21细胞质中并具有良好的免疫原性。保护试验结果表明重组SpaA、SpaA-N和NaOH提取抗原完全保护小鼠受强毒株C43065的致死性感染,但重组SpaA-C没有保护作用。结果表明SpaA-N可以作为预防猪丹毒的亚单位疫苗。
- 刘丹丹恩特马克.布拉提白杨振龙吾鲁木汗.那孜尔别克
- 关键词：红斑丹毒丝菌原核表达
- 红斑丹毒丝菌C43065株spaA基因的克隆和表达
- 2013年
- 通过PCR从红斑丹毒丝菌C43065株基因组DNA中扩增出编码信号肽除外的成熟SpaA蛋白基因spaA,将其克隆到表达载体pET32a的BamHⅠ和HindⅢ位点上,构建重组表达质粒pET-spaA,转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下表达N端带有Trx标签的融合蛋白rSpaA,SDS-PAGE检测表达蛋白.DNA测序结果表明,spaA基因大小为1794bp,编码由597个氨基酸残基组成的成熟SpaA蛋白,SDS-PAGE结果显示在大肠杆菌BL21中成功表达了分子量约为86kDa的重组rSpaA,为进一步开展SpaA保护区域的研究奠定基础.
- 刘丹丹杨振龙吾鲁木汗.那孜尔别克
- 关键词：红斑丹毒丝菌克隆原核表达
- 红斑丹毒丝菌免疫原性蛋白的鉴定及其编码基因的克隆和测序被引量：1
- 2016年
- 【目的】为深入研究红斑丹毒丝菌的免疫保护性抗原及其致病机制,采用免疫蛋白组学技术鉴定红斑丹毒丝菌的免疫原性蛋白。【方法】通过SDS-PAGE电泳分离红斑丹毒丝菌C43065株的NaOH提取抗原,用兔抗NaOH提取抗原抗血清经Western blot检测免疫原性蛋白,通过MALDI-TOF质谱技术鉴定蛋白种类,并对部分免疫原性蛋白的编码基因进行克隆和测序。【结果】通过MALDI-TOF质谱技术从C43065株NaOH提取抗原中鉴定出9个免疫原性蛋白,分别为Spa A、伴侣蛋白GroEL、烯醇化酶、ATP结合盒转运蛋白、丙酮酸脱氢酶复合物E1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、果糖二磷酸醛缩酶、50S核糖体蛋白L1、30S核糖体蛋白S4。其中烯醇化酶、ATP结合盒转运蛋白、甘油醛-3-磷酸脱氢酶和果糖二磷酸醛缩酶已被证实与链球菌、牙龈卟啉单胞菌、脑膜炎奈瑟菌和结核分枝杆菌的致病性相关。C43065株伴侣蛋白GroEL、烯醇化酶、ATP结合盒转运蛋白、丙酮酸脱氢酶复合物E1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶和果糖二磷酸醛缩酶编码基因大小分别为1614、1296、1260、1005和867 bp,与已公布的红斑丹毒丝菌Fujisawa株相应基因的相似度高达98%。【结论】本文所鉴定的9个免疫原性蛋白,为进一步开展红斑丹毒丝菌保护性抗原及其致病机制研究奠定基础。
- 吾鲁木汗?那孜尔别克肖迪杨振龙贾娜尔?阿汗恩特马克?布拉提白
- 关键词：红斑丹毒丝菌质谱基因克隆
- 基于groEL基因序列鉴定丹毒丝菌属菌种被引量：1
- 2015年
- 对4株红斑丹毒丝菌的16SrRNA基因和groEL基因进行测序及系统发育分析,探讨groEL基因序列分析法在丹毒丝菌属菌种分类鉴定中的应用.测序结果表明,4株红斑丹毒丝菌groEL基因长度为1 614bp,编码由537个氨基酸残基组成热休克蛋白HPS60,与红斑丹毒丝菌ATCC19414株和扁桃体丹毒丝菌ATCC43339株groEL基因的同源性分别为99%和86%,而16SrRNA基因长度为1 351bp,与红斑丹毒丝菌ATCC19414株和扁桃体丹毒丝菌ATCC43339株的同源性均为99%.系统发育分析结果表明,groEL基因比经典的16SrRNA基因序列分析分辨率高,可适用于红斑丹毒丝菌和扁桃体丹毒丝菌的分类鉴定.
- 杨振龙吾鲁木汗.那孜尔别克恩特马克.布拉提白
- 关键词：红斑丹毒丝菌RRNA基因
