姚静
- 作品数:3 被引量:10H指数:2
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 一种新的双向电泳蛋白样品制备方法被引量:2
- 2006年
- 目的探讨双向凝胶电泳(2-DE)样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果的影响。方法以MOLT-4细胞为例,采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组,并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果通过对2-D PAGE图谱的比较分析,发现采用8 mol/L Urea,2 mol/L Thiourea,4%CHAPS,1%NP-40,4%TritonX-100,65 mmol/L DTT,0.5 mmol/L PMSF,0.5%pharmalyte 3-10,能获得质量较高的2-DE图谱。结论采用高浓度脲、三去污裂解液有利于获得优质的蛋白质样品,从而提高蛋白质提取率和双向电泳分辨率等。
- 李小兰谢大兴肖徽吴剑宏姚静冯永东陶德定刘双又胡俊波龚建平
- 关键词:蛋白质组双向电泳固相PH梯度MOLT-4细胞
- 紫杉醇诱导人类原代胃癌细胞凋亡及其与细胞周期关系的研究被引量:4
- 2008年
- 目的探讨紫杉醇作用于人的胃癌实体瘤的机制,为紫杉醇应用于胃癌化疗提供相应的实验室依据。方法应用流式细胞术的AnnexinⅤ/PI技术检测紫杉醇诱导的37例人胃癌原代细胞凋亡;Sub-G1方法分析细胞周期及检测晚期凋亡;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;Confocal检测凋亡发生的形态。结果AnnexinⅤ/PI法和Sub-G1法均能检测到不同浓度紫杉醇在不同时间诱导的胃癌细胞凋亡,同一浓度在不同时间诱导的胃癌细胞凋亡与对照相比差异均有显著性意义(均P<0.01);周期分布图可发现紫杉醇作用12h出现明显的G1期细胞减少,而S和G2/M期细胞增多;25.50μg/ml药物作用12和24h琼脂糖凝胶电泳均可见典型的梯形改变;共聚焦显微成像可见紫杉醇诱导的人胃癌细胞的典型早期和晚期凋亡图像。结论紫杉醇能诱导人胃癌细胞凋亡可能是其对胃癌化疗有效的机制之一。
- 姚静吴剑宏张鹏陶德定肖徽胡俊波龚建平
- 关键词:紫杉醇胃癌流式细胞术
- 流式细胞术的凋亡检测技术在人胃肠实体瘤药敏试验中的应用被引量:4
- 2007年
- 目的化疗药能诱导肿瘤细胞凋亡,据此将流式细胞术的经典凋亡检测技术应用到临床特异性抗肿瘤药物的筛查,实现快速,准确的药物敏感性报告。方法应用流式细胞术的An- nexin V/PI技术,检测67例临床手术切除的胃肠肿瘤在不同化疗药物诱导下发生的凋亡。结果7种化疗药物诱导的胃肠肿瘤凋亡率有显著差异,胃癌的凋亡率以紫杉醇,丝裂霉素,氟尿嘧啶最高;而大肠癌以氟尿嘧啶,丝裂霉素,奥沙利铂诱导的凋亡率最高。联合化疗方案,胃癌以氟尿嘧啶联合紫杉醇的敏感率及凋亡率最高;大肠癌以氟尿嘧啶联合奥沙利铂的敏感率及凋亡率最高。结论不同肿瘤或同一肿瘤的不同个体,对化疗药物的敏感性均不同。临床可应用凋亡检测技术作为快速的药物敏感性检测方法,为肿瘤化疗筛选合适的个体化有效方案,避免无效化疗。
- 姚静谢大兴吴剑宏李小兰肖徽陶德定龚建平
- 关键词:流式细胞术脱噬作用药物敏感性