刘春宇
- 作品数：14 被引量：52H指数：4
- 供职机构：湖南医科大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 随机引物在分子生物学研究中的应用被引量：12
- 1996年
- 随机引物指非特异序列的寡聚核苷酸作为ＤＮＡ合成过程中的引物，是相对于特异引物的概念９０年代它与ＰＣＲ技术结合衍生了几项新技术：采用不同长度随机引物进行ＤＮＡ指纹分析而衍生出的ＲＡＰＤ、ＡＰ－ＰＣＲ及ＤＡＦ方法；进行ｍＲＮＡ多态分析的“差异显示”；以及ｒＰＣＲ，Ｔ－ＰＣＲ等技术．以ＲＡＰＤ为例介绍了随机引物ＰＣＲ的技术特点及其在分子生物学研究中的应用．
- 刘春宇张春玲夏家辉
- 关键词：分子生物学随机引物
- 一个新的蛋白激酶基因DYRK3的克隆及其特征分析被引量：2
- 1998年
- 目的分离一个与人的蛋白激酶ＤＹＲＫ２高度同源新的蛋白激酶的全长ｃＤＮＡ，并推测其分类和功能。方法应用与人的蛋白激酶ＤＹＲＫ２高度同源的３′端部分ｃＤＮＡ序列为探针，筛选ｃＤＮＡ文库和ｇＤＮＡ文库，并进行氨基酸序列同源性分析和ＦＩＳＨ定位。结果从人的骨骼肌ｃＤＮＡ文库和睾丸ｃＤ－ＮＡ文库各分离到一个新的蛋白激酶的全长ｃＤＮＡ。骨骼肌来源的ｃＤＮＡ编码５８８个氨基酸的蛋白质，睾丸来源的ｃＤＮＡ编码５６８个氨基酸的蛋白质，前者第２７个氨基酸以后的序列与后者第７个氨基酸以后的序列完全一致。结论推测这两个ｃＤＮＡ是同一基因在骨骼肌组织和睾丸组织中的不同剪接本。由于该基因与人的ＤＹＲＫ２高度同源，故称之为ＤＹＲＫ３基因。ＤＹＲＫ３与丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶酵母Ｙａｋ１，人和果蝇的Ｍｎｂ，人的Ｃｌｋ１等有较高的同源性，也与人的Ｃｄｋ２等其它丝氨酸／苏氨酸激酶有同源性。作者认为ＤＹＲＫ３是属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶ＣＭＧＣ组Ｃｌｋ家族新的一员。该基因定位在１ｑ３２。
- 夏家辉杨新平阮庆国潘乾刘春宇谢微邓汉湘
- 关键词：蛋白激酶CDNA基因克隆
- 人类M6b基因一种剪接型cDNA的分子克隆被引量：2
- 1999年
- 蛋白脂蛋白（PLP）基因突变导致Pelizaeus－Merzbacher病（PMD）和部分X-连锁的痉挛性截瘫。Olinsky等克隆了M6b的部分序列（U45955），该基因认为是PLP基因家族成员之一。我们以巢式PCR得到一约300hp的片段，测序为与U45955的5′端局部重叠的新序列，拼接后得到1．642kb的序列，其中含有可编码265个氨基酸的开放阅读框。此阅读框经对脑cDNA文库PCR产物的测序确证（命名为M6ba）。M6ba的CDNA序列及其编码氨基酸序列与小鼠中M6b基因和蛋白质序列显著相似（分别为91．2％和93.4％一致）。Northern杂交的结果及cDNA文库PCR扩增、EST数据库分析的结果提示M6b基因至少存在3种剪接形式。M6ba基因与PLP基因显著相似，并且两蛋白质在所有疏水区高度保守。M6ba基因结构的分析，显示此基因编码区由7个外显子构成。
- 夏家辉刘春宇阮庆国潘乾廖晓东傅俊江崔峰邓汉湘
- 关键词：PLP分子克隆蛋白脂蛋白
- 从HGM’96看生物信息学与人类基因组计划
- 1996年
- 从ＨＧＭ’９６看生物信息学与人类基因组计划湖南医科大学医学遗传学国家重点实验室（长沙４１００７８）刘春宇夏家辉审校１９９６年３月２２日至２４日，在德国海德堡召开了人类基因组９６年会（ＨＧＭ’９６），与会者来自３１个国家，近１４００人．大会安排了３场大...
- 刘春宇
- 关键词：生物信息学人类基因组人类基因组计划
- 人类遗传性高频性耳聋疾病基因克隆
- 夏家辉刘春宇唐北沙潘乾黄蕾戴和平等
- 该成果在计算机上进行同源分析筛选新基因的方法“基因家族--候选疾病基因克隆”，并用该方法克隆了M6ba、Atrophin-1样基因、Ataxin-2样基因、DMGDHL1、GJB3、GJB5、MPZL1、CACNG3、O...
- 关键词：
- 关键词：基因工程克隆
- 与Atrophin-1同源的人类新基因的克隆和定位
- 1999年
- 将齿状核红核苍白球路易氏体退行性病变(DRPLA)致病基因(Atrophin-1)cDNA序列对EST数据库进行同源性比较,得到与(Atrophin-1显著相似的EST 25个,依EST间的相互关系构建5个EST重叠群。根据其中的3个EST重叠群设计引物,对cDNA文库扩增,PCR法制备探针,筛选人cDNA和gDNA文库。cDNA克隆经测序,拼接,获得含完整编码区的cDNA序列4.6kb(命名为Atrophin样基因,Atrophinlike gene),其中有一个3036bp的阅读框架。基因编码区由9个外显子构成。基因组DNA克隆,经荧光原位杂交定位于1p36。人、鼠Atrophin-1基因家族各成员的比较分析显示,均为亲水性较强的蛋白质,其C端保守性较强,有2个酸性与碱性氨基酸交替区。DRPLA,Haw River综合征与Atrophin-1中CAG的过度重复相关,而人类Atrophin样蛋白中不含长的多聚谷氨酰胺残基(其基因中只有3次CAG的重复)。
- 夏家辉刘春宇王德安阮庆国崔峰谢微潘乾廖晓东戴和平邓汉湘
- 关键词：致病基因基因克隆基因家族
- 人多肽链延伸因子1α四个反转录假基因的鉴别与定位
- 1998年
- 人多肽链延伸因子１α基因ＥＥＦ１Ａ是一个在蛋白质合成过程中起重要作用的看家基因。通过对已有ＧｅｎＢａｎｋ、ＧＤＢ等数据库的综合分析，鉴定了４个人类多肽链延伸因子１α基因的反转录假基因，并分别将其精细定位于４ｑ２５、７ｐ１５－２１、９ｑ３４和１９ｑ１３上。
- 崔峰刘春宇夏家辉
- 人类基因组大规模测序进展
- 1997年
- 作为人类基因组计划的核心内容之一，基因组测序经过6年的努力，在技术、组织上都有很大的进展。本文综述了世界上14个主要测序中心在人类基因组大规模测序中的工作、获得其序列数据的途径，为相关研究者充分利用这些重要的信息资源提供指南。
- 董莉刘春宇
- 关键词：人类基因组测序DNA
- 中国人Peutz-Jeghers综合征STK11基因突变的研究被引量：9
- 1999年
- 目的对中国人ＰｅｕｔｚＪｅｇｈｅｒｓ（ＰＪ）综合征患者ＳＴＫ１１基因进行突变分析，确定其特征，为基因诊断奠定基础。方法应用聚合酶链反应单链构象多肽分析（ＰＣＲＳＳＣＰ）和ＤＮＡ测序的方法，对８个中国人ＰＪＳ家系ＳＴＫ１１基因进行研究。结果在两个家系中分别新发现一个终止突变和剪接位点突变，推测最终导致产生截短型蛋白。结论ＳＴＫ１１基因在中国人ＰＪＳ患者中可能以点突变为主，突变发生率较国外报道低。提示，ＰＪＳ可能有遗传异质性。
- 李宜雄吕新生夏家辉汤熙翔刘春宇施小六
- 关键词：P-J综合征STK11基因基因突变聚合酶链反应
- 遗传性共济失调致病基因研究进展被引量：2
- 1996年
- 本文从临床表现、家系来源、遗传特点、基因定位等角度综述了遗传性共济失调包括ＳＣＡ１，ＳＣＡ２，ＳＣＡ３／ＭＪＤ，ＳＣＡ４，ＳＣＡ５，ＳＣＡ７，ＦＰＣＡ，ＤＲＰＬＡ，Ｆｒｉｅｄｒｅｉｃｈ氏共济失调，ＡＴ，ＡＶＥＤ，ＩＯＳＣＡ的基因研究进展，显示了共济失调极大的遗传异质性。致病基因的研究将为该病的准确分型提供依据。
- 刘春宇夏家辉唐北沙
- 关键词：遗传性共济失调致病基因
