仇永乐
- 作品数：25 被引量：40H指数：4
- 供职机构：河北医科大学第四医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省卫生厅医学科学研究重点课题河北省医学科学研究重点课题更多>>
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- 细胞外囊泡协同递送维替泊芬/TRAIL诱导口腔鳞癌细胞凋亡及增殖抑制实验研究被引量：1
- 2022年
- 目的制备细胞外囊泡(EVs)共载体系,以协同递送肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)/维替泊芬(VPF)组合用于诱导口腔鳞癌细胞凋亡及增殖抑制。方法通过超速离心、过滤法分离纯化TRAIL/VPF共载EVs(MSCT-EVs/VPF)。通过BCA法检测CD63、CD9和TRAIL表达,确认EVs来源。用高效液相法检测VPF载药量,绘制体外释放曲线。使用MTT法检测细胞毒性和半数抑制浓度(IC50)。通过流式细胞仪检测细胞凋亡,最后Western blot被用于检测MSCT-EVs/VPF对SCC25细胞中凋亡相关蛋白和YAP表达的影响。结果MSCT-EVs/VPF颗粒圆整,分散性良好,直径约为100 nm;纳米体系载药量为(15.43±0.44)%,在10 h内释放57.8%的VPF,45 h释放约82.5%;MSCT-EVs和VPF均可抑制SCC25肿瘤细胞生长,呈剂量依赖性,MSCT-EVs和VPF的质量比(wt%)在10∶1~5∶1的比例范围内显示出最佳抑制效果;在100∶5~100∶15(wt%)比例下,MSCT-EVs/VPF的半抑制浓度(IC50)低于游离MSCT-EVs+游离VPF组(P<0.05),显示出更高效的抑制作用。MSCT-EVs/VPF对鳞癌细胞的高效抑制作用部分源自对Caspase-3、Bax、Bcl-2、mTOR、p-mTOR和YAP的调控。结论通过EVs递送固定比例的TRAIL/VPF,对口腔鳞癌细胞展现出高效抑制作用,为多药耐药肿瘤的治疗提供了新思路。
- 王文晶李昆珊刘铁军刘昕仇永乐
- 关键词：维替泊芬肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
- 微小RNA200a/141-信号转导和转录激活因子4轴在口腔鳞状细胞癌进展中的作用研究
- 2025年
- 目的 基于公共数据库探索微小RNA (miRNA) 200a/141、信号转导和转录激活因子4 (STAT4)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及临床意义并构建预后模型,探讨其作为潜在治疗靶点的可行性。通过体外实验验证仿生明胶外泌体颗粒递送miRNA200a/141进而调节STAT4,评估在OSCC的细胞和分子水平上的核酸保护能力及抗癌作用。方法 通过癌症基因组图谱数据库下载OSCC相关miRNA及信使RNA表达测序数据,使用R语言进行数据分析,评估miRNA200a/141与STAT4的表达水平和临床相关性。制备负载miRNA200a/141的仿生明胶外泌体纳米颗粒(GNP-EXO-miRNA200a/141),进行Transwell迁移、细胞划痕和四甲基偶氮唑蓝实验,评估纳米颗粒对SCC25细胞的作用,并通过定量聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹法检测其对SCC25细胞中STAT4表达的影响。结果 miRNA200a/141在OSCC组织中的表达水平显著降低,而其靶标STAT4的表达水平升高,两者呈负相关。制备的GNP-EXO-miRNA200a/141纳米颗粒具有良好的粒径分布和稳定性。在细胞实验中,GNPEXO-miRNA200a/141显著抑制了SCC25细胞的增殖和迁移,并显著下调了STAT4的表达。结论 miRNA200a/141通过调节STAT4在OSCC中发挥重要作用,其有望成为OSCC的诊断、治疗和预后的潜在的分子标志物和治疗靶点。
- 姚曼曼仇永乐刘铁军路月亭路华林尚宏悦董博
- 关键词：口腔鳞状细胞癌外泌体明胶
- 幽门螺杆菌及其相关毒素与口腔扁平苔藓关系的研究被引量：15
- 2015年
- 目的探讨口腔扁平苔藓与幽门螺杆菌及其相关毒素CagA和VacA之间的关系。方法快速尿素酶检测法检测口腔扁平苔藓患者与正常对照组龈下菌斑中幽门螺杆菌的表达。酶联免疫吸附试验法检测口腔扁平苔藓患者与正常对照组血清中幽门螺杆菌及相关毒素CagA和VacA的表达。结果60例扁平苔藓患者龈下菌斑中Hp的阳性表达数明显高于正常对照组(P<0.05),差异有统计学意义;60例扁平苔藓患者血清中Hp-IgG抗体、CagA-HpIgG抗体、VacA-HpIgG抗体阳性表达数明显高于正常对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论口腔扁平苔藓的发生与可能与Hp感染及CagA、VacA基因相关。
- 仇永乐贾楠史婷婷刘铁军许彦枝
- 关键词：口腔扁平苔藓幽门螺旋杆菌CAGAVACA
- 金黄地鼠颊黏膜癌前病变发病机制的研究
- 2019年
- 目的探讨金黄地鼠颊黏膜癌前病变的发病机制。方法选取叙利亚金黄地鼠25只,随机分为对照组5只,模型组20只。利用0.5%二甲基苯并蒽丙酮溶液,建立口腔黏膜癌前病变动物模型,借助免疫组织化学法、光镜和电镜进行观察研究。结果模型组上皮黏膜在光镜下均表现为不同程度的异常增生;模型组果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)、增殖细胞核抗原(PCNA)高表达率高于对照组(P<0.05)。对照组在电镜下表现为细胞外形规则,紧密相邻,表面呈蜂窝状;模型组在电镜下表现为细胞外形不规则,间隙增宽,重叠松解。癌前病变区附近肉眼观察正常的黏膜组织,光镜下表现为上皮层单纯增生或角化层增厚,扫描电镜下表现为蜂窝状结构大量丧失,细胞外形趋于不规则。结论口腔黏膜癌前病变的基础为超微结构的改变,在早期诊疗过程中电镜发挥着重要的作用。
- 仇永乐耿熙雪林丽霞许彦枝赵培
- 关键词：癌前状态颊黏膜金黄地鼠
- miRNA对口腔鳞状细胞癌化疗耐药性的调控机制研究
- 2023年
- 目的探讨特征性微核糖核酸(microRNA,miRNA)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)化疗耐药性和肿瘤生物学中的作用。方法在耐药OSCC中SCC084/R、SCC131/R和SCC9/R中选择3个表达异常的miRNA(miR-27b-5p、miR-130a-3p和miR-125a-5p)。评估所选miRNA对OSCC耐药细胞系的细胞毒性、细胞凋亡和细胞周期的影响。随后,通过miRNA靶基因预测数据库TargetScan选择miRNA的潜在靶点,通过Western blotting对相应靶点蛋白表达进行分析。结果miR-27b-5p和miR-130a-3p可提高SCC084/R、SCC131/R和SCC9/R细胞对顺铂的敏感性,而miR-125a-5p仅能提高SCC9/R对顺铂的敏感性(P<0.05)。miR-27b-5p上调可提高SCC9/R细胞对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的敏感性,miR-130a-3p下调可提高SCC084/R细胞对5-FU的敏感性(P<0.05)。相对于单个miRNA转染,共转染miRNA在SCC084/R和SCC131/R耐药细胞系中显示出更强的化疗增敏作用(P<0.05)。所选miRNA均能引起细胞凋亡,除miR-130a-3p外,miR-125a-5p和miR-27b-5p均能引起SCC084/R和SCC131/R细胞的G1期阻滞。耐药调控涉及ErbB2/Her2通路、p38通路、p53通路及通路的多个下游靶点。结论miRNA可能是调控OSCC耐药性的关键因素,且这种调控具有多靶点性。
- 翟文静仇永乐刘珊珊刘铁军吕飞飞
- 关键词：口腔肿瘤微RNAS耐药
- let-7靶向调控Wnt/β-catenin通路抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、迁移和侵袭
- 2025年
- 目的阐明let-7在口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病中的作用及其潜在的分子机制。方法采用实时定量PCR检测人口腔角质细胞系(HOK)、OSCC组织以及OSCC细胞系(CAL-27、SCC-25、SCC-9)中let-7的表达。分别采用克隆形成实验、划痕实验、Trans-well实验和流式细胞术检测let-7对SCC-25细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,采用Western blotting检测Wnt、β-catenin蛋白的表达。分析let-7的表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果let-7在OSCC组织和OSCC细胞中低表达。过表达let-7可通过抑制Wnt/β-catenin通路的激活,有效抑制SCC-25细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。let-7表达水平与患者肿瘤分期、淋巴转移和生存状态密切相关,let-7低表达的患者总生存率较低。结论let-7靶向调控Wnt/β-catenin通路,实现抑制OSCC细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。
- 刘小莹王妍心苏春波刘昕段艳浩赵佳红仇永乐
- 关键词：口腔鳞状细胞癌LET-7WNT/Β-CATENIN增殖
- NKILA-miR-889-3p轴在调控口腔鳞状细胞癌细胞增殖迁移与侵袭中的作用
- 2024年
- 目的:通过分析长非编码RNA NKILA在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其临床意义,探讨NKILA与其潜在靶向miRNA之间的交互调控机制,以阐明其在OSCC发展中的作用。方法:收集了80例经病理学证实的OSCC患者及相应邻近正常口腔黏膜组织样本,使用qRT-PCR检测NKILA的表达水平及其与预后。利用克隆形成实验和Transwell迁移侵袭实验评估NKILA对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。通过亚细胞分离实验确定NKILA的亚细胞定位,并使用LncBase预测NKILA的潜在靶miRNA。AGO_(2)免疫沉淀实验用于验证miR-889-3p与NKILA的交互作用。结果:与相应的正常组织相比,NKILA在OSCC组织中的表达显著降低(P<0.0001),且其低表达与OSCC患者的晚期TNM分期、淋巴结转移和远处转移显著相关(P=0.001,P=0.046,P=0.011)。细胞实验结果表明,NKILA的敲低显著促进了OSCC细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),而NKILA的过表达则显著抑制了这些细胞功能(P<0.05)。亚细胞定位实验显示NKILA主要位于细胞质。miR-889-3p被识别为NKILA的潜在靶点,过表达NKILA可显著上调miR-889-3p的表达(P<0.05),反之亦然。AGO_(2)免疫沉淀实验进一步证实了miR-889-3p能特异性结合并调节NKILA(P<0.05)。结论:本研究明确了NKILA在OSCC发展中的下调现象及其潜在的功能机制,揭示了NKILA与miR-889-3p之间的重要交互调控关系,为OSCC的研究和治疗提供了新的见解。
- 杨硕王妍心仇永乐李昆珊吴倩
- 关键词：口腔鳞状细胞癌MIRNA增殖迁移
- EZH2和PCNA在金黄地鼠颊囊黏膜癌前病变中的表达被引量：1
- 2019年
- 目的探讨EZH2、PCNA在金黄地鼠颊囊黏膜癌前病变中的表达及意义。方法用20只金黄地鼠建立颊囊黏膜癌前病变的动物模型,免疫组化SABC法研究EZH2、PCNA的表达,并探讨EZH2与PCNA的关系。结果 EZH2、PCNA在癌前病变组织中高表达,在正常组织中低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,EZH2和PCNA表达具有相关性。结论 EZH2、PCNA参与口腔黏膜癌前病变的发生与发展,PCNA的表达与EZH2显著相关,它们的异常表达有助于口腔黏膜癌前病变的早期诊断。
- 仇永乐王文晶刘远航班建东刘昕许彦枝
- 关键词：EZH2PCNA金黄地鼠癌前病变
- LncRNA-NKILA靶向miR-3195对口腔癌细胞活性及血管生成的作用机制被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨LncRNA-NKILA靶向miR-3195对口腔癌细胞活性及血管生成的作用机制。方法:通过qRT-PCR方法检测LncRNA-NKILA在人正常口腔上皮细胞及人口腔鳞癌细胞中表达水平。按照随机数字表法分为空质粒组(SCC25细胞株+pcDNA)、NEAT1组(SCC25细胞株+pcDNA-NKILA)、NC-组(SCC25细胞株+miR-3195-NC-mimics);miR-3195组(SCC25细胞株+miR-3195-mimics)、联合1组(SCC25细胞株+pcDNA-NKILA+miR-3195-NC-mimics)及联合2组(SCC25细胞株+pcDNA-NKILA+miR-3195-mimics)。采用CCK-8方法检测细胞增殖;流式细胞仪检测凋亡率,免疫印迹检测细胞VEGF及VEGF-C蛋白;荧光素酶方法检测LncRNA-NKILA对miR-3195调控作用。结果:SCC25细胞株转染pcDNA-NKILA使细胞增殖降低,凋亡增加,VEGF及VEGF-C蛋白降低,与空质粒组比较存在差异(P<0.05);与NC组相比,miR-3195组SCC25细胞株增殖降低,凋亡率升高,VEGF及VEGF-C蛋白降低(P<0.05),与联合1组相比,联合2组SCC25细胞株增殖降低,凋亡率升高,VEGF及VEGF-C蛋白降低(P<0.05);荧光素酶实验显示miR-3195是LncRNA-NKILA靶基因。结论:LncRNA-NKILA可通过调控miR-3195表达抑制口腔癌细胞增殖,促进其凋亡,研究机制可能抑制VEGF表达相关。
- 张影姚曼曼刘珊珊刘铁军刘昕仇永乐
- 关键词：口腔鳞状细胞癌长链非编码RNA血管内皮生长因子
- 金黄地鼠颊黏膜癌前病变的组织学及超微结构观察被引量：2
- 2014年
- 目的:利用光镜及扫描电镜对金黄地鼠颊黏膜癌前病变进行组织学及超微结构观察。方法:借助DMBA建立金黄地鼠颊黏膜癌前病变动物模型,分别进行光镜、扫描电镜观察。结果:实验组在光镜下均表现为不同程度的异常增生;空白对照组在电镜下表现为细胞外形规则,表面呈蜂窝状。实验组在电镜下表现为细胞外形不规则、重叠松解;癌前病变区附近肉眼观正常黏膜组织,光镜下表现为上皮层单纯增生或角化层增厚,电镜下90%表现为蜂窝状结构大量丧失,细胞外形趋于不规则。结论:扫描电镜在口腔黏膜癌前病变的诊疗中具有广阔的应用前景。
- 仇永乐刘铁军吴景景许彦枝
- 关键词：金黄地鼠癌前病变光镜扫描电镜
