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应用荧光实时定量PCR方法检测重组慢病毒滴度及其感染效率被引量：14: 2009年; 慢病毒载体已经广泛应用于动物模型中基因治疗的研究和转基因动物的制备,而准确地测定重组慢病毒的滴度和感染效率是其关键步骤.通过荧光实时定量PCR的方法定量分析重组慢病毒的颗粒数以及病毒的活性滴度,并以GFP报告基因的方法作为对照来验证定量PCR方法的准确性.研究结果显示,应用荧光实时定量PCR法与GFP报告基因法测定得到的病毒活性滴度成正相关,而且前者可以更加准确地测定病毒滴度和病毒感染效率.; 马海燕方彧聃张敬之; 关键词：荧光实时定量PCR 病毒滴度

新型的核移植转基因表达载体的研究: 血小板生成素（TPO）是一种十分重要的造血细胞生长和发育的调控因子，利用转基因技术生产血小板生成素，可以为临床上提供治疗血小板减少症等血液疾病的药用蛋白。对于转基因大动物技术上的研究，首先要解决的是能在体内高...; 马海燕; 关键词：血小板生成素造血细胞慢病毒载体基因表达; 文献传递

HIV－1载体中存在着提高转录和翻译基因的元件: 2010年; 目的研究HIV-1载体中的一些元件如Rev和Tat蛋白对其骨架的转录及外源基因表达水平的影响。方法将HIV-1表达GFP载体（FUGW）单独或分别与Rev蛋白表达质粒（pLP2）、Tat蛋白表达质粒（pcDNA3.1-Tat），及表达Rev和Tat蛋白的质粒（△8．9）等摩尔共转染人293T细胞后，经实时定量RT-PCR、FACS、荧光显微镜镜检等方法检测，比较其表达量。结果Rev与RRE结合后，载体骨架及外源基因的转录是单独转染FUGW时的3倍，Tat与TAR结合后，则提高其骨架及外源基因的转录近4倍，而Rev和Tat蛋白的协同作用，其转录本则可提高至6倍。FACS和荧光显微镜镜检也显示GFP蛋白表达量明显提高。F-TPO载体（HIV-1载体乳腺特异表达促血小板生成素）与△8．9在小鼠乳腺上皮细胞HC-11共转染和表达，则TPO蛋白的表达量接近pcDNA3．1-TPO载体的8倍。结论HIV-1载体中存在着提高转录和翻译基因的元件，可提高其骨架的转录和外源基因的表达，且该现象并不依赖于细胞类型和外源基因的种类。; 孙凤强方彧聃王娟张帆马海燕张敬之; 关键词：TAT蛋白

机器学习应用于噬菌体phiC31整合酶动物基因组整合位点预测: 目的链霉菌噬菌体phi C31整合酶系统具有高效定点整合、高水平表达、整合位点相对安全、操作简单等优点和特点,广泛应用于基因治疗及转基因动植物的制备。phi C31整合酶在哺乳动物基因组中的识别位点被称为假att P位点...; 赵贵军马海燕汪洁马晴雯; 关键词：整合位点整合酶噬菌体基因组; 文献传递

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马海燕