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张黎: 作品数：30 被引量：27H指数：3; 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

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一种含佐剂的新冠DNA疫苗: 本发明涉及一种DNA疫苗组合物及其用途。具体而言，本发明涉及针对冠状病毒的DNA疫苗组合物，以及包含所述DNA疫苗组合物的药物组合物。此外，本发明还涉及所述DNA疫苗组合物的用途。本发明的DNA疫苗组合物可用于预防和/或...; 黄维金赵爱华徐苗王佑春周泽华付丽丽聂建辉张黎赵晨燕; 文献传递

献浆员中新型冠状病毒SARS-CoV-2中和抗体检测分析被引量：6: 2020年; 目的:静注人免疫球蛋白(IVIG)和新冠肺炎恢复者的血浆已被推荐用于重症新冠肺炎患者的治疗。因此,血浆中新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体水平需要得以及时评价。本研究利用不需要在生物安全三级实验室操作的SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法,建立了快速检测中和抗体的策略。方法:采用新型冠状病毒SARS-CoV-2假病毒,对1080份健康献血员血浆及26批次IVIG的SARSCoV-2中和抗体进行检测。初筛采用1∶30倍稀释检测;对初筛阳性(抑制率≥50%为阳性)的样本进行复试,复试采用1∶30、1∶90和1∶270三个梯度;对于复试阳性的样本进行中和特异性分析,进一步检测针对水疱性口炎病毒(VSV)、严重急性呼吸道综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的中和活性。结果与结论:在1∶30倍稀释时,26批次IVIG的SARS-CoV-2中和抗体均为阴性,1080份献血员血浆中SARS-CoV-2中和抗体阳性率为0.6%(6/1180);对6份阳性血浆的特异性分析显示均为对VSV、SRAS-CoV或MESR-CoV假病毒的非特异中和作用。本研究表明该假病毒中和抗体检测方法和快速检测策略可以用于IVIG、健康献血员和感染者恢复期血浆中的中和抗体检测,发现IVIG针对SARS-CoV-2无特异的中和抗体活性,IVIG在临床重症治疗中发挥的是非病毒特异的辅助治疗作用。; 张黎聂建辉李倩倩吴佳静王威刘欢秦海洋王佑春黄维金侯继锋; 关键词：中和抗体静注人免疫球蛋白血浆

18~59岁人群加强免疫新型冠状病毒灭活疫苗的免疫原性及安全性观察被引量：3: 2022年; 目的观察新型冠状病毒疫苗加强免疫的免疫原性及安全性。方法2020年10月,江苏省疾病预防控制中心(CDC)开展了新型冠状病毒灭活疫苗的Ⅱ期临床试验,入组对象为18~59岁、未妊娠、未哺乳的健康人群,基础免疫程序为0-14 d 5μg、0-14 d 10μg、0-28 d 5μg、0-28 d 10μg,从其中按研究编号从小到大顺序各选择50名(共200名)完成2剂基础免疫的受试者,在完成基础免疫后第6个月(窗口期30 d)加强接种第3剂与基础免疫同样剂量的疫苗。加强免疫前后分别采集静脉血约5 ml,分析活病毒中和抗体、假病毒中和抗体、受体结合域IgG抗体(RBD-IgG)的阳转率和几何平均滴度(GMT)。收集并分析加强免疫后28 d内不良事件发生情况。结果0-14 d 5μg、0-14 d 10μg、0-28 d 5μg、0-28 d 10μg组对象的基线年龄分别为(43.98±9.58)、(43.46±9.34)、(42.56±9.08)和(43.94±11.05)岁(P=0.877),各组间性别比例均衡(P=0.331);4组活病毒中和抗体GMT(95%CI)由加强免疫前的4.07(3.30~5.04)、3.75(3.08~4.55)、8.33(7.01~11.11)和7.69(6.19~9.57)升至加强免疫后28 d的284.84(215.28~376.86)、233.05(178.61~304.08)、274.81(223.64~337.68)和280.77(234.59~336.04),抗体阳转率均为100%。4组的加强免疫后28 d内不良事件发生率分别为18.0%(9例)、4.0%(2例)、12.0%(6例)和12.0%(6例)(P=0.182),无3级及以上不良事件、无严重不良事件。结论新型冠状病毒灭活疫苗基础免疫6个月后进行1剂加强免疫具有良好的免疫原性和安全性。; 潘红星黄保英邓瑶储凯胡家垒朱丹丹武景亮张黎王萌黄维金谭文杰; 关键词：加强免疫免疫原性安全性

气相色谱法测定人类乳头瘤病毒疫苗中MPL含量: 2022年; 目的:建立用气相色谱法测定人类乳头瘤病毒(HPV)疫苗中3-O-脱酰基-4′-单磷酰脂质A(MPL)的含量。方法:HPV疫苗中的MPL经过与氢氧化钠-甲醇的皂化反应,以己烷进行萃取,以三氟醋酐进行衍生化,再经HP-5色谱柱(30 m×0.32 mm, 0.25μm)分离,火焰离子检测器(FID)检测,用MPL对照品和内标十五烷酸(pentadecanoic acid)进行内标法定量测定HPV疫苗中MPL含量。结果:MPL质量浓度在15~150μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999),精密度RSD为0.24%,重复性RSD为1.0%,稳定性RSD为0.37%,平均回收率为100.1%~100.5%(RSD小于2.0%)。12个批次的HPV疫苗中MPL含量范围为93.4~103.2μg·mL^(-1),符合质控要求。结论:本法准确可靠,特异性强,可对HPV疫苗中MPL进行检测。; 路琼聂玲玲聂建辉赵晨燕张黎王萌黄维金王佑春; 关键词：佐剂

基于SARS-CoV-2假病毒的中和抗体检测方法: 本发明涉及一种基于SARS‑CoV‑2假病毒的中和抗体检测方法。本发明还涉及一种重组载体，一种类病毒颗粒，以及一种细胞株。本发明还涉及检测SARS‑CoV‑2类病毒感染力的方法以及检测SARS‑CoV‑2抗体中和活性的方...; 王佑春黄维金张黎聂建辉张悦吴佳静李倩倩; 文献传递

S/D残留量对SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法的影响被引量：1: 2020年; 目的:评价有机溶剂/表面活性剂(solvent and detergent,S/D)法灭活后S/D残留量对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的假病毒中和抗体检测方法(pseudotyped virus based neutralization assay,PBNA)的影响。方法:在严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)和2019冠状病毒病(coronavirus disease,COVID-19)患者恢复期血浆中加入0.1~10倍《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)规定残留标准[100μg·mL^-1聚山梨酯80(吐温80)+10μg·mL^-1磷酸三丁酯(TNBP)]浓度的S/D,模拟灭活后S/D残留量。用PBNA检测加入S/D前后的中和抗体水平,比较S/D对中和方法的影响。将不同浓度的S/D加入到SARS-CoV和SARS-CoV-2假病毒中进行灭活处理1、2和6 h,检测假病毒的滴度,评价S/D对冠状病毒假病毒的灭活效果。结果:当S/D残留低于《中国药典》残留上限(100μg·mL^-1吐温80+10μg·mL^-1 TNBP)时,SARS-CoV-2中和抗体EC50平均值与无S/D组的PBNA检测结果无统计学差异;当S/D残留大于2.5倍《中国药典》残留标准时,S/D对PBNA有显著影响。含有10 mg·mL^-1吐温80+1 mg·mL^-1 TNBP的S/D试剂,室温静置1 h即可以灭活SARSCoV和SARS-CoV-2假病毒,假病毒滴度下降分别达到5.11和4.80 log滴度,其灭活效果随着S/D的浓度下降而下降,S/D浓度为1%时无灭活效果。结论:S/D残留量对SARS-CoV-2的PBNA有显著影响,为保障PBNA的检测准确性,血浆中S/D残留量应不超过《中国药典》规定的标准,S/D试剂具有灭活2种冠状病毒假病毒的作用。; 王萌张黎李倩倩吴佳静郝焕孙其玉聂建辉黄维金; 关键词：假病毒病毒灭活中和抗体

流感病毒基因组不同位点插入外源基因对病毒特性影响的研究: 2025年; 目的评估流感病毒基因组不同位点插入外源基因NanoLuc(Nluc)对病毒生长特性的影响,并分析外源基因插入后在体内外的表达稳定性。方法采用分子克隆技术与反向遗传学技术在血凝素(hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(neuraminidase,NA)、非结构蛋白(non-structural protein,NS)和聚合酶碱性蛋白1基因片段上分别构建8种携带外源基因Nluc的重组流感病毒。血凝试验和空斑试验分析不同插入方案对病毒复制能力的影响,荧光检测评估病毒感染细胞后外源基因的表达效率。在小鼠感染模型中分析外源基因插入对病毒感染性的潜在影响。采用独立样本t检验进行统计分析。结果在8种构建方案中,基于HA、NA和NS基因的重组病毒在拯救的P1代中产生荧光信号,并在空斑试验和血凝试验中表现出复制能力。随着病毒的连续传代,基于NA和NS基因的方案能够在不同代次间稳定表达荧光信号,并在小鼠感染试验中呈现正确的荧光分布。同时基于NS基因重组毒株构建的动物模型具有更好的稳定性。结论本研究验证了NS片段可作为有效的外源基因插入位点,且这种方案未显著影响流感病毒的复制活性和宿主感染能力,表明其具有较高的整合稳定性和应用潜力。; 吴昊赵晨燕吴曦张黎张家友俞永新黄维金; 关键词：流感病毒基因整合活体成像

一种对新冠变异株广谱中和保护的免疫原及其制备方法和应用: 本申请涉及一种对新冠变异株更广谱中和保护的免疫原及其制备方法和应用，具体涉及新型冠状病毒Spike蛋白的突变体，包含编码所述Spike蛋白的突变体的核苷酸序列的核酸分子，以及包含所述核酸分子的载体和假性化病毒样颗粒。此外...; 王佑春黄维金聂剑辉李涛崔智敏张黎赵晨燕

调节戊型肝炎病毒组装和衣壳蛋白ORF2稳定性的方法: 本发明涉及通过HDAC6抑制剂改善戊型肝炎病毒生产、HEV病毒复制、病毒ORF2蛋白稳定性、和HEV病毒样颗粒形成的方法。本发明还涉及用于戊型肝炎病毒、病毒样颗粒和ORF2蛋白生产的细胞培养系统、和细胞培养物。此外，本发...; 王佑春许楠黄维金赵晨燕张黎

不同人类免疫缺陷病毒感染途径群体中戊型肝炎病毒的流行情况被引量：5: 2016年; 本研究旨在了解不同人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染途径群体中戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）抗体情况，探讨HEV疫苗接种的必要性。采集HIV感染者的血清或血浆，利用酶联免疫吸附试验（enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA）检测HEVIgG抗体、IgM抗体及抗原，荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测HEV核酸，Roche高纯化HIV-1核酸定鼍检测试剂盒（PCR荧光法）检测HIV感染者的HIV载量。比较分析不同HIV感染途径群体中HEV流行率的差别。结果显示，HIV感染者中HEV IgG抗体的阳性率为37．4％，静脉吸毒、成分献血和传播途径不明HIV感染群体的HEVIgG抗体阳性率分别为49．3％、39．5％和30．4％。HEV核酸荧光PCR检测结果均为阴性。3种HIV感染群体之间HEV IgG抗体阳性率差异无统计学意义（x2=2．978，P〉0．05）。HEVIgG阳性与阴性感染者之间HIV载量差异无统计学意义（P〉0．05）。结果提示，为保护HIV感染者免受HEV感染，应考虑接种HFV疫苗。; 黄维金宋爱京许四宏聂建辉刘强赵晨燕张黎王佑春; 关键词：人类免疫缺陷病毒戊型肝炎病毒抗体

张黎

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