季辉
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- URI基因稳定表达对肝癌SMMC-7721细胞增殖能力的影响
- 2013年
- 目的:瞬转以及筛选出能够稳定表达URI(RPB5-mediating protein)基因的SMMC-7721细胞株,以其为模型研究URI基因对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响。方法:首先,抽提URI的重组质粒并转染到SMMC-7721细胞中,在G418药物的筛选下选出能够稳定表达URI基因的细胞株,RT-PCR法和酶切检测该稳定细胞中URI基因的表达效率以确认URI是否稳定表达,MTT法和克隆形成实验检测URI基因对SMMC-7721细胞增殖的影响。结果:成功建立URI基因过表达的稳定细胞株。与SMMC-7721细胞对照组比较,其URI mRNA表达水平显著上调,能稳定表达URI细胞株的增殖,克隆形成率明显升高。结论:pFLAG-CMV-4-URI重组质粒能使URI在肝癌SMMC-7721细胞内稳定表达,过表达URI基因有可能帮助细胞通过G2/M期检验点来提高肝癌细胞SMMC-7721的增殖能力。
- 季辉王琦仲蕾魏文祥
- 关键词：肝癌细胞细胞增殖
- RMP在~/(60/)Coγ-射线诱导的肝癌细胞DNA修复中的作用
- 目的：
研究肝癌细胞抵抗~/(60/)Coγ-射线引起的凋亡的机制，探索RMP在肝癌细胞抵抗~/(60/)Coγ-射线引起的DNA损伤程度中的影响，分析RMP在肝癌细胞抵抗辐射引起的DNA损伤和凋亡的作用机制
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- 季辉
- 关键词：DNA损伤修复过表达
- 文献传递
- RMP基因的表达及其对肝癌细胞凋亡的影响
- 2011年
- 目的制备RPB5调节蛋白(RMP)抗体并研究RMP在60Coγ射线诱导的SMMC-7721肝癌细胞凋亡过程中的表达及功能。方法 RT-PCR检测HT-29、A549、Hep-2、SGC-7901、293T、HeLa、WI-38和SMMC-7721细胞株中RMP的表达;从质粒中PCR扩增得到人RMP基因并克隆至原核表达载体中,诱导表达后经亲和层析纯化获得融合蛋白GST-RMP/D1,以该蛋白作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体;肝癌细胞SMMC-TT21、PFlaG-CMV4-SMMC-7721、PFlaG-CMV4-RMP-SMMC-7721经6 Gy 60 Coγ射线照射后,流式细胞术检测肝癌细胞凋亡的变化。结果RMP在以上细胞系中均有表达,但程度不同;SDS-PAGE鉴定示纯化蛋白为目的蛋白人RMP片段。Western blot结果显示,制备的多抗可与RMP蛋白特异性结合;肝癌细胞株经6 Gy 60Coγ射线照射后,流式细胞术结果表明RMP使肝癌细胞SMMC-7721的凋亡减少。结论 RMP在不同细胞株中均有表达且能减少肝癌细胞SMMC-7727的凋亡,为RMP用于肝癌的基因治疗奠定了基础。
- 仲蕾王晓婷郭云兰王琦季辉魏文祥
- 关键词：多克隆抗体凋亡肝癌
