南雪
- 作品数：143 被引量：222H指数：7
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 慢病毒介导的稳定表达bFGF的胎儿肝脏基质细胞株的建立被引量：2
- 2007年
- 通过重组慢病毒系统感染人胎儿肝脏基质细胞(fetalliverstromalcell,FLSC),建立了能够稳定、高效表达碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)的细胞株bFGF/FLSC.从流产胎儿肝脏组织分离富集基质细胞,对其进行了生长特性和表面标志的鉴定,其在体外维持传代35代,依然保持正常的染色体核型.从胎儿骨髓间充质干细胞中克隆得到bFGF基因,构建重组慢病毒载体,感染FLSC,根据荧光表达强弱进行流式分选,获得能够继续稳定传代的低表达和高表达bFGF的两株细胞,RT-PCR和蛋白质印迹证实,细胞株中bFGF基因的稳定表达.RT-PCR结果显示,弱荧光和强荧光表达细胞的bFGF,在mRNA水平的表达分别是转染空载体细胞的2.33倍和6.19倍;蛋白质印迹结果显示,在蛋白质水平表达分别是1.76倍和5.05倍.用建立的bFGF/FLSC作饲养层细胞体外培养人胚胎干细胞(humanembryonicstemcells,hES),结果证明,其能在无或少量添加外源bFGF的条件下,维持人ES细胞增殖及其干性达20代.bFGF/FLSC细胞株的建立,将为构建低成本、安全高效的人胚胎干细胞的培养体系及研究造血细胞的发育分化提供适宜的微环境.
- 习佳飞王韫芳张鹏袁红丰施双双闫舫陈琳白慈贤南雪裴雪涛
- 关键词：胎儿肝脏基质细胞慢病毒人胚胎干细胞
- 诱导人胚胎干细胞定向分化为肝细胞的方法及专用培养基
- 本发明公开了一种体外诱导人胚胎干细胞定向分化为肝细胞的方法及其专用培养基。该体外诱导方法包括以下步骤：1)将人胚胎干细胞用分化培养基I悬浮，再将细胞悬液移入低吸附性细菌培养皿中，在37℃、5％CO<Sub>2</Sub>...
- 裴雪涛裴海云王韫芳白宗良杨印祥习佳飞岳文南雪白慈贤
- 文献传递
- 诱导脐带血来源的CD34+细胞重编程获得诱导性多能干细胞(iPS cells)
- 目的:目前已经利用转录因子的表达使得人类各种成体细胞(表皮成纤维细胞、间充质干细胞、神经干细胞、肝细胞、外周血细胞等)重编程形成诱导性多能干细胞(iPS cells),然而对脐带血来源的细胞的诱导仍在研究
- 姚海雷张文成王思涵李保伟张锐习佳飞周军年吕洋曾泉施双双何丽娟南雪李艳华岳文裴雪涛
- 关键词：多能干细胞多潜能性细胞重编程
- 文献传递
- Wnt3a转基因基质细胞的建立及其对脐血CD34^+造血干/祖细胞扩增作用的研究被引量：5
- 2005年
- Wnt信号通路在造血干/祖细胞自我更新的过程中发挥至关重要的作用.纯化的Wnt3a蛋白可以实现造血干/祖细胞的扩增.通过病毒转染原代小鼠骨髓基质细胞,建立转基因滋养层细胞.通过共培养对转基因滋养层细胞扩增CD34+造血干/祖细胞的作用进行了研究.实验结果显示,与普通滋养层加细胞因子组相比,经转基因滋养层加细胞因子组培养的CD34+造血干/祖细胞集落形成能力(CFC)是其(1.55±0.06)倍;混合集落形成能力是其(1.95±0.26)倍;高增殖潜能集落形成能力(HPP-CFC)是其(1.45±0.40)倍;LTC-IC活性是其(3.83±0.86)倍.结果表明,转基因滋养层细胞通过分泌具有天然活性的Wnt3a蛋白能在体外有效地扩增造血干/祖细胞的数量.
- 师伟韩姝李艳华谢小燕施双双陈琳白慈贤闫舫南雪王韫芳裴雪涛
- 关键词：WNT3A滋养层细胞
- 用慢病毒转染RNAi技术沉默胆固醇7α羟化酶的基因表达,降低肝细胞中胆汁酸的分泌
- 2008年
- 为了降低生物人工肝(bioartificial liver system)中肝细胞胆汁酸的分泌,构建了胆固醇7α羟化酶慢病毒RNA干涉载体,并转染人肝脏细胞(L-02)。根据绿色荧光蛋白的表达评估转染效率后进行流式分选,获得高表达慢病毒干涉载体的细胞,并以野生型L-02细胞和仅转染pSicoR空载体的L-02细胞作对照,观察肝细胞胆固醇7α羟化酶的表达以及培养上清中总胆汁酸含量。利用半定量PCR、实时荧光定量PCR及Western-blot等实验方法检测了转染细胞中基因的干涉效果,结果显示:与对照组相比,在mRNA水平,转染慢病毒siRNA载体的L-02细胞,其胆固醇7α羟化酶基因的表达量仅为野生型L-02细胞表达量的31.2%,为转染pSicoR空载体的L-02细胞的34.1%,干涉效率分别为68.8%和65.9%,均具有显著差异(P<0.05);Western-blot结果显示胆固醇7α羟化酶在蛋白质水平表达也明显受到抑制,表明转染慢病毒siRNA下调了肝细胞中胆固醇7α羟化酶基因的表达,减少了胆汁酸的分泌。以上研究结果表明,利用RNAi技术可以获得低表达胆固醇7α羟化酶基因的肝细胞,并有效降低肝细胞中胆汁酸的分泌,为临床上生物人工肝的构建及应用奠定基础。
- 郑吉春裴海云杨印祥姚海雷罗海英王婧陈琳南雪白慈贤王韫芳岳文裴雪涛
- 关键词：RNAI慢病毒肝细胞胆汁酸
- 具有改善贫血功能的竹笋提取物及其制备方法以及竹笋提取物复合制剂
- 本发明公开了一种具有改善贫血功能竹笋提取物及其复合制剂以及其制备方法，复合制剂由竹笋提取物、补铁剂及其它助剂配制而成，其中：所述竹笋提取物是固形物、提取液或干粉，由新鲜竹笋或笋干水提醇提得到；所述补铁剂为铁卟啉或血红素铁...
- 裴雪涛师伟陈琳吕洋岳文白慈贤南雪施双双张赛男何丽娟任祥亮管利东
- 文献传递
- 脑源性神经营养因子基因转导对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响被引量：2
- 2004年
- 赵连旭张杰孟玲曹丰王冬梅南雪李艳华王韫芳徐小虎裴雪涛
- 关键词：神经细胞分化脑源性神经营养因子骨髓间充质干细胞基因转导MSC胶质细胞
- miR-155对肝癌细胞增殖的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:在肝癌细胞系中过表达miR-155,研究其对肝癌细胞增殖的影响。方法:将pc DNA3.0-miR-155表达载体瞬时转染Huh7.5.1及Hcclm3肝癌细胞系,通过实时定量PCR技术对miR-155在转录水平的表达进行检测,采用CCK8法及克隆形成实验检测miR-155过表达后对Huh7.5.1及Hcclm3肝癌细胞系增殖的影响。结果:转染细胞后72 h,经实时定量PCR检测,Huh7.5.1及Hcclm3肝癌细胞中成熟miR-155的表达分别上调约431及16倍(P<0.01),说明其能有效高表达;CCK8法及克隆形成实验结果显示,miR-155能够明显促进肝癌细胞增殖(P<0.01)。结论:pc DNA3.0-miR-155转染Huh7.5.1及Hcclm3肝癌细胞系后能高效表达成熟miR-155,同时证明过表达miR-155能使肝癌细胞的增殖受到非常明显的促进。
- 南雪曾泉吕洋姚海雷陈琳岳文裴雪涛
- 关键词：MIR-155肝癌细胞增殖MIR-155
- 一种干细胞靶向定位富集的方法
- 本发明公开了一种干细胞靶向定位富集的方法，包括如下步骤：1)将兔抗大鼠c-Met抗体和β<Sub>2</Sub>M抗体与大鼠骨髓的c-Met<Sup>+</Sup>β<Sub>2</Sub>M<Sup>-</Sup>细胞...
- 裴雪涛王韫芳南雪李艳华岳文闫舫
- 文献传递
- 体外诱导人骨髓间充质干细胞定向肝细胞分化被引量：5
- 2006年
- 目的:研究人骨髓间充质干细胞向肝细胞的诱导分化,为肝组织工程提供理想的细胞来源。方法:以肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4对种植于基底膜基质中的人骨髓间充质干细胞进行三维立体诱导培养,在培养后不同时间,分别进行形态观察、AFP、Alb的免疫组化荧光染色及靛青绿的摄取与排泌试验。结果:该条件下诱导后的人骨髓间充质干细胞生成肝细胞样细胞,阳性表达肝细胞特有表面标志AFP、Alb,并具备肝细胞特有的摄取与排泌靛青绿的活性功能。结论:肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4及基底膜基质可能在体外人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的过程中提供适宜的微环境并起重要作用,这为间充质干细胞在肝组织工程中的应用提供了理论与技术上的支持。
- 梁峰王韫芳岳慧敏南雪施双双闫舫李荣裴雪涛
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞肝细胞生长因子
