鲁琨
- 作品数：21 被引量：36H指数：3
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“十一五”国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 囊尾蚴病诊断抗原研究进展
- 囊尾蚴病是一种人畜共患寄生虫病,广泛分布于亚洲、非洲和拉丁美洲,全球囊尾蚴病患者约5000 万人,我国是囊尾蚴病高发区之一。囊尾蚴病的有效诊断是控制该病的关键,免疫学诊断方法,尤其是酶联免疫吸附试验(Enzyme-Lin...
- 石团员张龙现菅复春赵光辉鲁琨宁长申
- 关键词：囊尾蚴病诊断抗原
- 文献传递
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的真核表达质粒的构建及表达分析
- 2009年
- 根据GenBank中的参考序列设计并合成引物序列，从pMDM13h中扩增带酶切住点和His—tag的基因序列；用HindⅢ和XhoⅠ双酶切PCR扩增产物和pcDNA3．0载体，连接构建真核表达重组质粒pc3M13h，利用PCR，双酶切和测序鉴定其正确性；重组质粒pc3M13h转染COS-7细胞，瞬时表达的转染细胞（96孔板）在转染36．48h后，应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学，分别检测pc3M13h在COS-7细胞培养上清液和细胞内的表达．结果表明，设计合成的引物成功扩增了带有酶切位点和His—tag的基因序列；成功构建了真核表达重组质粒pc3M13，双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学检测显示，pc3M13h重组质粒不但能够在COS-7细胞中进行表达，而且能够进行微量的分泌表达．
- 赵光辉鲁琨张改平宁长申王选年张龙现菅复春宋海涛
- 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原基因表达
- 隐孢子虫细胞免疫作用研究进展
- 隐孢子虫是一种具有重要公共卫生意义的寄生性原虫，所致隐孢子虫病是一种全球性人畜共患病。多年来药物治疗的效果均不很理想。近年来许多学者在免疫学方面做了大量的研究，本文就免疫细胞、细胞因子等介导的细胞免疫作用进行了阐述，以期...
- 王秋霞鲁琨宁长申李娇刘运超
- 关键词：隐孢子虫病细胞免疫免疫细胞细胞因子
- 囊尾蚴病疫苗的研究进展
- 囊尾蚴病是一种危害较严重的人兽共患病,给畜牧业和人类经济生活带来较大的经济损失,因此囊尾蚴病的防治极为重要,囊尾蚴病的疫苗研究是近些年来国内外的研究热点,本文就此作以综述,为以后的疫苗研制开发提供参考。
- 鲁琨王秋霞李佼李佼
- 关键词：囊尾蚴病疫苗免疫
- 文献传递
- 猪囊尾蚴10kD基因的克隆、表达及重组蛋白ELISA方法的建立
- 猪囊尾蚴病是一种重要的人畜共患寄生虫病,不但引起猪肉品质下降,而且给人类健康造成重大危害。目前,猪囊尾蚴病的免疫诊断和免疫预防是国内外学者的关注的热点。本研究通过基因工程方法克隆猪囊尾蚴囊液10kD基因,构建重组表达载体...
- 鲁琨
- 关键词：猪囊尾蚴病蛋白纯化间接ELISA
- 隐孢子虫细胞免疫作用研究进展被引量：2
- 2008年
- 隐孢子虫病药物防治效果均不理想。因而,许多学者在隐孢子虫免疫方面进行了大量研究。本文综述了免疫细胞、细胞因子等介导的细胞免疫保护作用,以期为该病的细胞免疫和免疫防治提供参考。
- 王秋霞庞玉芳鲁琨宁长申张丽萍李娇刘运超
- 关键词：隐孢子虫病细胞免疫免疫细胞细胞因子
- 隐孢子虫细胞免疫作用研究进展
- 隐孢子虫是一种具有重要公共卫生意义的寄生性原虫,所致隐孢子虫病是一种全球性人畜共患病。多年来药物治疗的效果均不很理想。近年来许多学者在免疫学方面做了大量的研究,本文就免疫细胞、细胞因子等介导的细胞免疫作用进行了综述,以期...
- 王秋霞鲁琨宁长申李娇刘运超
- 关键词：隐孢子虫病细胞免疫免疫细胞细胞因子
- 文献传递
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h蛋白原核表达条件的优化
- 2008年
- 为了提高猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)M13h蛋白基因在大肠杆菌中的表达量,试验研究了培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对pET32a-M13h融合蛋白表达量的影响。结果:使用TB培养基于37℃培养3 h后,采用终浓度为0.4 mmol/L的IPTG在37℃、100 r/min诱导培养4小时时,pET32a-M13h融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-M13h融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为30 ku;Western-blot检测结果表明pET32a-M13h融合蛋白能与猪囊尾蚴多克隆抗体发生特异性反应。
- 王秋霞鲁琨张改平宁长申赵光辉张丽萍冯丽丽
- 关键词：排泄分泌抗原原核表达
- 囊尾蚴病疫苗的研究进展
- 囊尾蚴病是一种危害较严晕的人兽共患病，给畜牧业和人类经济生活带来较人的经济损失，因此囊尾蚴病的防治极为重要，囊尾蚴病的疫苗研究是近些年来国内外的研究热点，本文对进行了阐述，为以后的疫苗研制开发提供参考。
- 鲁琨王秋霞李佼刘运超
- 关键词：囊尾蚴病疫苗研制免疫功能人兽共患病
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的克隆及原核表达被引量：4
- 2008年
- 目的研究猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的克隆及原核表达。方法利用RT-PCR技术从猪囊尾蚴中扩增排泄分泌抗原M13h蛋白去除信号肽序列的基因,对其进行序列分析,并亚克隆至原核表达载体pET43a上,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组菌株表达融合蛋白,并用Western blot对纯化后的融合蛋白进行鉴定。结果从猪囊尾蚴中克隆到去除信号肽序列的M13h的基因,其序列长度为204 bp,包含198 bp的编码区,与GenBank中西班牙分离株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均为100%,与韩国的M13h蛋白的核苷酸与氨基酸序列同源性分别为95.7%和95.3%;经SDS-PAGE电泳鉴定,重组质粒表达产物分子质量单位约74 ku,其中M13h基因表达蛋白的分子质量单位为7.87 ku,与预期结果一致;经Western blot检测,纯化后的复性蛋白质可与兔抗全囊囊尾蚴血清发生特异性反应。结论pET43M13h重组质粒表达产物具有较高的保守性和特异性,可用于猪囊尾蚴病的免疫诊断。
- 赵光辉王秋霞鲁琨张改平宁长申王选年张龙现菅复春宋海涛
- 关键词：猪囊尾蚴克隆原核表达
