陈宏
- 作品数：15 被引量：31H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人核糖体蛋白L6编码基因的克隆及正反义真核表达载体的构建被引量：2
- 2006年
- 目的:通过克隆人核糖体蛋白L6(RPL6)cDNA序列,构建其正反义真核表达载体,以探讨RPL6与白血病多药耐药的关系。方法:用RT-PCR技术扩增RPL6 cDNA序列,DNA重组技术构建其正反义真核表达载体。结果:成功扩增RPL6 cDNA序列,经DNA测序,证实与GenBank中的人RPL6编码区序列一致,酶切证实目的基因分别按正反两个方向亚克隆至真核表达载体。结论:成功克隆人RPL6 cDNA序列,并构建了正反义真核表达载体。
- 陈宏姜浩张志伟
- 关键词：克隆
- Survivin反义寡核苷酸逆转K562/A02细胞的耐药研究被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨Survivin反义寡核苷酸(an-tisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)对K562/A02细胞耐药的作用和机制。方法:以脂质体转染SurvivinASODN,以MTT法检测多柔比星(adriamycin,ADM)和SurvivinASODN+ADM对K562/A02细胞的IC50,以RT-PCR、蛋白印迹、荧光分光光度计和流式细胞术分别检测SurvivinmRNA、蛋白表达及半胱氨蛋白水解酶-3(Caspase-3)的活性和细胞凋亡的变化。结果:ADM和ASODN+ADM对K562/A02细胞的IC50分别为45·56和19·01mg/L,SurvivinmRNA和蛋白水平表达分别降低36·2%和71·5%,Caspase-3活性增加67·5%,凋亡率较对照组增加[(14·5±5·6)%vs(2·4±1·0%),P<0·05]。结论:SurvivinASODN通过抑制Survivin表达激活Caspase-3,诱导凋亡,逆转耐药。
- 陈宏谢兆霞肖希斌王光平
- 关键词：寡核苷酸类反义K562细胞
- 人核糖体蛋白L6对白血病K562/A02细胞耐药性的影响被引量：2
- 2006年
- 目的观察核糖体蛋白L6(RPL6)表达的改变对白血病耐药性的作用。方法通过RT-PCR方法获得RPL6cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向插入的RPL6cDNA重组质粒。以脂质体将正义RPL6cDNA真核表达质粒转染K562细胞,将反义RPL6cDNA真核表达质粒转染K562/A02细胞,以MTT观察其对化疗药物耐药性的作用。结果转染正义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562细胞对阿霉素的耐药性比未转染的K562细胞增强3.25倍,转染反义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562/A02细胞对阿霉素的耐药性比未转染的K562/A02细胞降低62%。结论RPL6基因过表达在K562/A02细胞耐药性的形成中起重要作用。
- 陈宏姜浩张志伟
- 关键词：抗药性K562/A02细胞细胞株
- Survivin反义寡核苷酸诱导K562/A02细胞凋亡的实验研究被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:Survivin是最近发现的凋亡抑制基因,与白血病的发生和耐药有关,反义寡核苷酸可抑制survivin表达,诱导凋亡,增加药物的敏感性。本研究探讨survivin反义寡核苷酸对白血病耐药细胞K562/A02生长、凋亡和半胱氨蛋白水解酶3的活性的作用。方法:以脂质体转染survivin反义寡核苷酸,以MTT、RT-PCR、流式细胞术、荧光分光光度计分别检测survivin反义寡核苷酸对K562/A02细胞的生长抑制、survivin mRNA表达、凋亡和半胱氨蛋白水解酶3的活性。结果:survivin反义寡核苷酸对K562/A02细胞的生长抑制呈浓度-时间依赖性,与对照组相比,survivin mRNA表达降低36.2%(P<0.05),半胱氨蛋白水解酶3的活性增加67.6%(P<0.05);K562/A02细胞的凋亡率明显增加(14.48±2.65%vs 2.39±0.47%,P<0.005)。结论:survivin反义寡核苷酸通过抑制survivin表达,上调半胱氨蛋白水解酶3活性而诱导凋亡。
- 陈宏谢兆霞肖希斌
- 关键词：SURVIVIN反义寡核苷酸凋亡
- Survivin反义寡核苷酸逆转K562/A02耐药的研究
- 目的应用survivin反义寡核苷酸封闭survivin基因表达,探讨其对白血病细胞株K562/A02 耐药性的逆转。方法针对Survivin mRNA的序列合成的反义寡核苷酸,以脂质体转染survivin 反义寡核苷酸...
- 陈宏谢兆霞肖希斌
- 关键词：反义寡核苷酸SURVIVINK562/A02
- 文献传递
- 血清HA,PCⅢ,Ⅳ-C,LN联合PLD检测对肝硬化诊断价值的探讨被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨透明质酸、型前胶原、型胶原、层黏连蛋白和脯氨酸肽酶对肝硬化的诊断价值。方法:采用放射免疫分析法和微量法对84例肝硬化患者血清中上述五项指标的代谢变化进行观察,并对结果进行分析。结果:与正常人相比,肝硬化和肝硬化腹水患者血清透明质酸、型前胶原、型胶原、层黏连蛋白和脯氨酸肽酶水平明显增高(P<0.01),脯氨酸肽酶与透明质酸、型前胶原、型胶原、层黏连蛋白之间有相关性。结论:血清透明质酸、型前胶原、型胶原、层黏连蛋白和脯氨酸肽酶等指标均能较好地反映肝纤维化的活动水平及程度。
- 陈宏肖新荣王晓光
- 关键词：肝硬化层黏连蛋白脯氨酸肽酶
- 急性白血病患者血浆VEGF、TF和IL-6的测定及其临床意义被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨急性白血病(AL)患者血浆血管内皮细胞生长因子(VEGF)、组织因子(TF)和白细胞介素-6(IL-6)含量变化与临床病情的关系。方法:用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测32例AL患者血浆VEGF、TF和IL-6含量。结果:AL初治患者血浆VEGF、TF和IL-6含量明显高于对照组,也明显高于缓解组(P<0.005或0.001),未缓解组患者血浆VEGF、TF和IL-6含量与初治组比较差异无显著性(P>0.05);且AL患者血浆IL-6与VEGF、TF增加呈正相关(r=0.45、0.41,P<0.05)。结论:AL患者血浆TF、VEGF和IL-6含量与临床病情变化密切相关,可作为了解病情、观察疗效、判断预后的指标之一。
- 陈宏谢兆霞杨柞升
- 关键词：白血病混合细胞血管内皮细胞生长因子白细胞介素-6
- 核糖体蛋白在肿瘤中的改变及作用被引量：4
- 2005年
- 核糖体蛋白除参与蛋白质的合成外,还有核糖体外功能。在肿瘤中核糖体蛋白发生改变,如表达升高、降低或突变,与肿瘤的发生、发展、转移和肿瘤抑制有关。其作用包括调节癌基因和抑癌基因而参与转录、翻译及凋亡等诸多方面。
- 陈宏姜浩谢兆霞
- 关键词：核糖体蛋白肿瘤癌基因凋亡
- K562/A02细胞核糖体蛋白L6的表达与多药耐药性的实验研究
- 2007年
- 目的观察核糖体蛋白L6(RPL6)基因表达的改变对白血病多药耐药性的作用。方法通过RT-PCR方法获得RPL6cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向插入的RPL6cDNA重组质粒,以脂质体将正义RPL6cDNA真核表达质粒转染K562细胞,将反义RPL6cDNA真核表达质粒转染K562/A02细胞,以MTT法检测细胞对阿霉素(ADM)、长春新碱(VCR)、米托蒽醌(MIT)和依托泊苷(VP16)耐药性的作用。结果RPL6在K562/A02细胞中的表达较K562增高(P<0.001),转染正义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562细胞对ADM、VCR、MIT、VP16的耐药性比未转染的K562细胞分别增强3.25、1.95、2.00和3.48倍(P<0.05或0.01),转染反义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562/A02细胞对ADM、VCR、MIT、VP16的耐药性比未转染的K562/A02细胞分别降低62%、50%、56%和47%(P<0.05或0.01)。结论RPL6基因过表达在K562/A02细胞耐药性的形成中起重要作用。
- 陈宏姜浩张志伟
- 关键词：细胞株多药耐药
- 核糖体蛋白L6对K562/A02细胞耐药性及凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- 本研究观察核糖体蛋白L6(RPL6)基因表达的改变对白血病细胞耐药性的作用及其可能的机制。通过RT-PCR方法获得RPL6 cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向插入的RPL6 cDNA重组质粒。以脂质体将正义RPL6 cDNA真核表达质粒转染K562细胞,将反义RPL6 cDNA真核表达质粒转染K562/AO2细胞。以MTT、流式细胞术和荧光分光光度计观察RPL6对化疗药物耐药性、凋亡和caspase-3的作用。结果表明:转染正义RPL6 cDNA真核表达质粒后,K562细胞对阿霉素的耐药性增强到原来的325%,凋亡和caspase-3活性明显降低(P<0.005);转染反义RPL6 cDNA真核表达质粒后,K562/A02细胞对阿霉素的耐药性降低原来的38%;凋亡和caspase-3活性明显增加(P<0.005)。结论:RPL6基因过表达通过改变药物诱导的凋亡在K562/A02细胞耐药性的形成中起重要作用。
- 陈宏谢兆霞姜浩张志伟王光平
- 关键词：抗药性细胞株K562/A02
