王贤松
- 作品数：4 被引量：13H指数：1
- 供职机构：北京工业大学生命科学与生物工程学院更多>>
- 发文基金：北京市属高等学校人才强教计划资助项目北京市科技新星计划北京市科委重大项目更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信生物学农业科学更多>>
- 新型HIV免疫检测平台的建立
- 艾滋病是由人类免疫缺陷病病毒(HIV)感染引起的一种严重威胁人类健康的疾病。HIV快速检测对病情控制、药物疗效以及血液筛查等也十分重要。传统的检测方法存在试剂消耗量大、分析时间长、操作过程繁琐、灵敏度不高等缺点。采用芯片...
- 王贤松
- 关键词：艾滋病DNA检测
- 文献传递
- PMMA基连续流式PCR微流控芯片的C0_2激光直写加工与应用被引量：13
- 2009年
- 采用CO2激光直写烧蚀加工技术在聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)基片表面加工微通道,分析了CO2激光输出功率和激光束移动速度对加工质量的影响。选用4.5W输山功率和76.2mm移动速度,在30s内加工了水力直径为100μm的微通道。在进行微通道的大批量、快速加工时,CO2激光直写烧蚀加工技术具有较高的工艺稳定性,工艺流程简单,可随时根据实验需要对微通道结构进行调整和再加工。微通道的激光拉曼光谱与PMMA基片相同,保证了微通道和盖片对聚合酶链式反应(PCR)物化学影响的一致性。虽然徽通道边缘存在少量重铸物。但不会影响热压键合效果,芯片能够满足PCR扩增中的压力与密封要求。使用这种芯片实现了180bp拟南芥脱氧核糖核酸(DNA)片段的PCR扩增,扩增效果与使用常规PCR仪相当,验证了采用CO2激光直写烧蚀方法加工PMMA基连续流式PCR微流控芯片的可行性。
- 祁恒王贤松陈涛马雪梅姚李英左铁钏
- 关键词：激光技术CO2激光聚合酶链式反应
- 莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶的原核表达纯化及其生物学活性
- 2008年
- 利用基因重组技术及简易的纯化方法快速制备莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶(MMLV-RT)。设计带有酶切位点的引物,PCR获得MMLV-rt基因片段;再通过定点突变将目的基因的五个可溶性位点进行突变,测序正确后,插入到表达载体pET15b中构建成重组表达质粒pET15b-MMLV-rt;表达产物的纯品通过金属离子(Ni3+)配体亲和纯化系统得到。用SDS-PAGE分析所纯化产物的大小和纯度,再用RT-PCR对其活性进行鉴定。构建的重组表达质粒pET15b-MMLV-rt经IPTG诱导得到N端带有6His的RT融合蛋白,通过Ni3+的亲和层析得到纯品蛋白,SDS-PAGE分析表明其纯度可达96%,RT-PCR实验表明具有较高的生物学活性。由此得出利用原核表达及简易的纯化系统可获得纯度为96%的逆转录酶纯品,为大规模生产该酶提供了可靠的保证。
- 王贤松马雪梅孙一
- 关键词：逆转录酶定点突变酶活力
- 用于微流控芯片的集成多通道荧光检测系统
- 以多芯片LED阵列作为激发光源，侧向紧贴微流控芯片进行荧光检测。通过对多个波长的LED芯片的合理布置，构成可寻址阵列，可实现多通道激发。配合多个检测器，可实现多通道检测。
- 孙一王贤松王康马雪梅曾毅
- 关键词：微流控芯片荧光检测
- 文献传递
