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人神经生长因子低亲和力受体（p^（75）NGFR）cDNA的克隆及其在神经细胞中表达活性的初步研究被引量：1: 1996年; 利用酸性异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法从人胎儿基底前脑中提取总ＲＮＡ，用逆转录与聚合酶链反应相结合的ＲＴ－ＰＣＲ法，扩增出人神经生长因子低亲和力受体ｐ^（７５）ＮＧＦＲ基因ｃＤＮＡ，在限制性内切酶ＳｍａⅠ存在下的连接体系中，将扩增出的ｃＤＮＡ片段克隆入ｐＵＣ１２的ＳｍａⅠ位或，经限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＰｓｔⅠ酶切鉴定是否插入以及ＨｉｎｄⅢ酶切鉴定方向。将重组质粒中的ｐ^（７５）ＮＧＦＲ的ｃＤＮＡ再次亚克隆至ｐＵＣ１２载体中后，以其双链ＤＮＡ为模板，用末端终止法测出其全部核苷酸顺序，证实其核苷酸编码的ｐ^（７５）ＮＧＦＲ除两个碱基突变外，其余与文献完全一致。完整的ｐ^（７５）ＮＧＦＲ的ｃＤＮＡ分两步克隆到逆转录病毒表达载体ｐＸＴ－１，经ＰＡ３１７包装细胞株体外包装后、收集病毒上清转染条件不死性大鼠小脑神经细胞系Ｒ２．初步结果表明转染了ｐ^（７５）ＮＧＦＲ的Ｒ２细胞株去除ＮＧＦ培养时出现程序化死亡的典型特征梯型ＤＮＡ带。; 易明顾继杰黄秉仁蔡良琬; 关键词：神经生长因子神经细胞

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易明