刘思然
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质的研究被引量：11
- 2009年
- 目的探讨灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质(ACM)支架的可行性。方法取12周龄的Wistar大鼠的肾脏,保留输尿管、肾静脉及肾动脉,沿肾动脉插入留置针建立灌注通道。灌注压强为100cmH2O,依次灌注肝素化PBS溶液,1%十二烷基磺酸钠(SDS)溶液,去离子水,1%TritonX-100溶液以及含青链霉素的PBS溶液。经脱细胞处理后,采用HE染色法光镜观察及扫描电镜观察支架微观结构,DAPI染色法荧光显微镜观察残留细胞核成分。结果所有经SDS及TritonX-100联合处理后的脱细胞基质支架在HE染色光镜观察下未发现细胞残留,扫描电镜观察仅见基膜及胶原蛋白等细胞外基质形成网状结构而无细胞,DAPI染色荧光显微镜观察未见DAPI与细胞核结合后所发出的强荧光。结论灌注法用于制备大鼠全肾脏脱细胞基质支架,简便可靠,该支架无细胞成分残留,是一种理想的细胞支架。
- 刘春晓刘思然徐啊白康玉占郑少波李虎林
- 关键词：灌注法肾脏脱细胞基质
- 灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质支架的细胞相容性被引量：6
- 2009年
- 背景:作者所查目前尚未见应用灌注法制备大鼠全肾脱细胞基质的相关报道,制备的脱细胞基质是否具有良好的细胞相容性尚不确切。目的:应用灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质支架,检测鼠肾脱细胞基质与L929细胞的细胞相容性,探讨灌注法制备的肾脱细胞基质作为细胞支架构建泌尿系实质性组织工程器官的可行性。设计、时间及地点:体外细胞水平观察实验,于2009-02/05在南方医科大学珠江医院中心实验室完成。材料:取12周龄Wistar大鼠的肾脏,保留输尿管、肾静脉及肾动脉,沿肾动脉插入留置针建立灌注通道。灌注压强为9.81kPa,依次灌注肝素化PBS溶液,1%十二烷基磺酸钠溶液,去离子水,1%TritonX-100溶液以及含青链霉素的PBS溶液,制备全肾脱细胞基质支架。方法:①设立空白组(无细胞)、阴性对照组(培养基)和实验组(鼠肾脱细胞基质浸提液)及阳性对照组(含0.64%苯酚溶液的培养基)。取对数生长期的L929细胞,4×103/孔接种于96孔板中,每组各5孔,于接种24,72,120h,通过MTT法显色,于酶标仪490nm波长下检测吸光度值,计算相对增殖率。②设立对照组(培养基)、实验组(鼠肾脱细胞基质浸提液)及阳性对照组(含0.64%苯酚溶液的培养基),培养48h后应用流式细胞技术检测细胞凋亡情况。主要观察指标:①支架微观结构。②细胞毒性。③细胞凋亡率。结果:脱细胞基质支架扫描电镜观察仅见基膜及胶原蛋白等细胞外基质形成网状结构而无细胞残留,24,72,120h实验组吸光度值与阴性对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。脱细胞基质细胞毒性为0级和1级。实验组与阴性对照组之间细胞凋亡率差异无显著性意义(P>0.05)。结论:大鼠全肾脏脱细胞基质支架具有良好的细胞相容性。
- 刘春晓陈捷郑少波李虎林刘思然
- 关键词：肾脏脱细胞基质细胞毒性凋亡
- 灌注法制备大鼠肾脱细胞基质支架的研究
- 目的:探讨灌注法制备大鼠肾脱细胞基质(ACM)支架的方法。方法:取12周大的Whistar大鼠,保留肾动脉及与之连接的腹主动脉、肾静脉和输尿管,沿腹主动脉插入动脉导管建立灌注通道。灌注压力为100cmH2O,依次灌注含1...
- 徐啊白刘思然刘春晓康玉占李虎林郑少波
- 关键词：灌注法基质支架
- 文献传递
- 灌注法制备大鼠及家兔全肾脏脱细胞基质的研究
- 组织工程学是一门近年来新兴的综合性学科，是一门运用细胞、工程材料学方法和创造适当生化、理化因素，以改善或替代组织的生物学功能的学科，是人类治疗组织、器官的功能衰竭和缺失的研究方向。其基本原理和方法是令少量组织细胞通过体外...
- 刘思然
- 关键词：细胞支架灌注法
- 文献传递
