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链霉菌和大肠杆菌穿梭质粒载体的构建被引量：2: 1990年; 本文报道了链霉菌和大肠杆菌穿梭质粒载体pSE-3的构建;把具有双启动子的大肠杆菌的质粒pGEM-3与新霉素抗性基因启动子缺失的链霉菌的探针质粒pIJ486分别用BamHI和BglⅡ酶切,T4 DNA连接酶连接后转化到E.coli HB101(Amp(?),Neo(?)),所得重组质粒能强启动pIJ486质粒上的氨基糖苷磷酸转移酶基因(aph),并使新霉素抗性基因在大肠杆菌中得到强表达。此重组质粒被命名为pSE-3,当其转化到变青链霉菌TK54(Tsr(?),Neo(?))的原生质体前,新霉素抗性基因亦能得到强表达。酶切结果表明,构建的具有两个启动子的穿梭质粒载体pSE-3上有HindⅢ和EcoRI的单酶位点,拷贝数约为39。经再转化和传代50代等研究表明,穿梭质粒载体pSE-3在链霉菌和大肠杆菌中均是稳定的。为某些有应用价值的目的基因在大肠杆菌和链霉菌中的克隆与表达提供了一个有价值的穿梭质粒载体。; 谭华荣何松庄增辉薛禹谷; 关键词：链霉菌大肠杆菌

利用PCR技术克隆乳链菌肽前体基因被引量：8: 1995年; 乳链菌肽(Nisin)是由核糖体合成,经翻译后修饰、加工而含有稀有氨基酸的一种小肽分子。它对许多革兰氏阳性菌,包括利斯特氏菌属、梭菌属和芽孢杆菌属这些腐败菌和病原菌有强烈抑制作用。已被50多个国家和地区广泛应用于乳制品、罐头食品、高蛋白食品及乙醇饮料的防腐保鲜,是越来越受到人们重视的一种无毒的天然食品防腐剂。对乳链菌肽分子结构与功能及生物合成遗传控制的研究不仅有应用价值,而且有其理论意义。本实验室以产乳链菌肽的乳酸乳酸球菌ATCC 11454总DNA为模板,利用PCR技术成功地扩增了乳链菌肽前体基因,并对其核苷酸序列进行了测定。; 还连栋陶勇田宇清何松薛禹谷; 关键词：乳链菌肽前体基因克隆聚合酶链反应基因工程

大肠杆菌葡萄糖异构酶基因在变铅青链霉菌中的克隆与表达被引量：5: 1990年; 本文用穿梭质粒载体pSE-3,进行了大肠杆菌葡萄糖异构酶基因在变铅青链霉菌中的克隆与表达。把含有1.6kb葡萄糖异构酶基因的pX1200(4.3kb)质粒与pGEM-3(2.9kb)质粒分别用EcoRI酶解,T4DNA连接酶连接,转化E.Coli HB101(Xy1^-,Neo(?)),得到的重组质粒被命名为pX1203(7.2kb);将pX1203与穿梭质粒载体pSE-3分别用HindⅢ酶解,T_4DNA连接酶连接,转化E.Coli HB101,在含有新霉素的木糖培养基上筛选到转化重组体,其重组质粒被命名为pSE×100(10.6kb);把pSE×100转化变铅青链霉菌TK54的原生质体,在硫链丝菌肽(50μg/ml)和新霉素(50μg/ml)的平皿上得到了重组体。经质粒提取,酶切分析,再转化和葡萄糖异构酶活性测定,结果表明,大肠杆菌的葡萄糖异构酶基因确实已在链霉菌中克隆和表达。; 谭华荣何松庄增辉薛禹谷张其玖; 关键词：基因克隆葡萄糖异构酶

乳链菌肽高产菌株的选育及其基因定位被引量：31: 1995年; 以乳酸乳酸球菌7962为原始菌株,用紫外线、LiCl、(60)~Co及8-MOP+NUV等多种理化诱变剂对其进行诱变处理,获得一株乳链菌肽高产突变株AL2。其效价稳定在2300～2500Iu/ml。经DNA杂交证实,编码乳链菌肽的前体基因位于染色体上,其遗传性状是稳定的。毒理试验表明AL2及其产物属于实际无毒类物质。; 还连栋陶勇何松田宇清薛禹谷; 关键词：乳链菌肽诱变育种基因定位

乳酸乳酸球菌AL2产生的乳链菌肽的提纯和性质被引量：31: 1996年; 用NaCl饱和的乳酸乳酸球菌(Lactococcus lactis subsp. lactis)AL2发酵液经正丙醇提取和CM-Sephadex C-25柱层析,得到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的乳链菌肽组分,比活力从24427IU/mg提高到39865IU/mg,活力回收为41.7％。α—胰凝乳蛋白酶可使乳链菌肽丧失活性;在低pH条件下,乳链菌肽对热较稳定;对许多革兰氏阳性菌有强烈抑制作用,而对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌没有作用。; 陈秀珠何松龙力红还连栋薛禹谷; 关键词：乳链菌肽食品微生物提纯

乳链菌肽高产菌株AL2的发酵条件研究被引量：68: 1995年; 对乳链菌肽高产菌株ＡＬ２的发酵条件进行了研究，发现３０℃是产乳链菌肽的最适温度；蔗糖和酵母膏是最佳的碳、氮源，浓度分别为０．５％和１％。发酵培养基起始ｐＨ为６．５；锰离子对乳链菌肽的产生有促进作用，而铜离子却有严重的抑制作用。; 陈秀珠何松龙力红还连栋薛禹谷; 关键词：乳链菌肽发酵条件食品微生物

一种天然的食品防腐剂—Nisin被引量：8: 1992年; 乳酸链球菌素是某些乳酸链球菌(Strep tococeg Lactis合成的一多肽抗菌素,商品名为Nisin。 1969年FAO/WHO食品添加剂联合专家委员会给予了Nisin作为食品防腐剂的国际性承认后,目前世界英、苏、波、日、美国、印度等约50个国家确认了其使用的合法性,我国台湾省也允许使用。; 潘天太还连栋何松; 关键词：食品防腐剂

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何松