陈瑾
- 作品数：93 被引量：52H指数：5
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 经密码子优化的猪Ficolin α在昆虫细胞的表达及其体外抗病毒作用初步分析
- 2017年
- 利用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达具有天然构象的猪Ficolinα。首先构建重组穿梭质粒rBacmid-Ficolinα,转染sf9细胞获得重组杆状病毒rBV-Ficolinα;通过Image J软件对优化表达的Western blot图片进行灰度分析确定较佳表达条件;纯化目的蛋白质后,进一步评价其体外抗病毒活性。Western blot结果显示以7.5MOI接种量感染的sf9细胞在96h时获得了较高的表达,同时获得的重组猪Ficolinα具有抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)活性。猪Ficolinα在sf9昆虫细胞中获得成功表达,且具有良好的抗PRRSV活性。本研究可以为猪Ficolinα的抗病毒活性及作用机制研究提供物质基础。
- 李兰乔绪稳张元鹏陈瑾郑其升侯继波
- 关键词：抗病毒作用
- 一种Toll样受体7激动剂纳米颗粒及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种Toll样受体7激动剂纳米颗粒，它是以硫辛酸与胺杂环化合物为原料先制成硫辛酸纳米颗粒，硫辛酸纳米颗粒再与结构如式Ⅰ所示的TLR7激动剂反应制得TLR7激动剂‑硫辛酸纳米颗粒。本发明TLR7激动剂‑硫辛酸纳...
- 秦竹郑其升史海健陈瑾张元鹏侯立婷于晓明乔续稳杜露平李兰侯继波
- 编码重组猪圆环病毒2型Cap蛋白的基因及其应用
- 本发明提供编码重组猪圆环病毒2型Cap蛋白的基因及其应用<B>，</B>属于分子生物学领域。编码重组猪圆环病毒2型Cap蛋白的基因，含有SEQ ID NO:1所示的序列。本发明还提供含有上述基因的重组表达载体，含有重组猪...
- 李鹏成郑其升乔绪稳陈瑾侯继波
- 一种口蹄疫病毒灭活抗原纯化浓缩方法
- 本发明提供一种口蹄疫病毒灭活抗原纯化浓缩方法，涉及生物技术领域。一种口蹄疫病毒灭活抗原纯化浓缩方法，包括以下步骤：（1）将氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的接头蛋白加入口蹄疫病毒灭活抗原中，混匀，孵育；（2）加入纯...
- 乔绪稳郑其升于晓明陈瑾李鹏成张元鹏侯立婷侯继波
- 文献传递
- 靶向B细胞的口蹄疫GHloop多肽抗原的制备及免疫效力鉴定
- 2023年
- 本研究将葡萄球菌A蛋白人工合成类似物的二聚体(DD)与口蹄疫的GHloop串联,按照大肠杆菌偏好性密码子优化合成GHloop-DD,并评价其免疫原性。将GHloop-DD插入到原核表达载体pET-32a中,鉴定阳性后转入E.coli BL21进行诱导表达。利用SDS-PAGE与Western blot对目的基因表达产物的可溶性进行分析。利用镍亲和层析柱纯化目的蛋白;利用BCA试剂盒测定重组蛋白的浓度,将重组蛋白(2.5μg/只)与206佐剂乳化,制备疫苗,免疫5周龄小鼠,同时设商品化合成肽苗对照与空白对照。免疫后28 d采集试验小鼠血清,利用口蹄疫病毒多肽ELISA抗体检测试剂盒检测免疫小鼠血清的抗体水平;利用流式细胞仪测定淋巴结B细胞的数量及骨髓中长寿浆细胞的数量;利用荧光定量检测相关趋化因子的表达水平;利用细胞因子检测试剂盒检测脾脏淋巴细胞刺激后上清液中的细胞因子的水平。SDS-PAGE结果表明,GHloop-DD基因在大肠杆菌中以可溶形式获得高水平表达;Western blot结果显示,表达的重组蛋白能够与特异性抗体发生反应。免疫试验结果表明,GHloop-DD不但能够刺激免疫小鼠产生高水平的多肽特异性ELISA抗体,而且能够提高淋巴结B细胞的数目及相关趋化因子水平,使骨髓中长寿浆细胞的数量和脾脏淋巴细胞刺激后上清液中细胞因子的水平显著提高。以上结果表明,本研究制备的GHloop-DD具有良好的免疫原性,为口蹄疫多肽疫苗的研制提供了新的方向。
- 侯立婷张媛媛于晓明于晓明张元鹏杜露平乔绪稳张元鹏郑其升程海卫
- 关键词：体液免疫B细胞
- 基于连接肽的双特异纳米抗体及其编码基因和应用
- 本发明公开一种基于连接肽的双特异纳米抗体及其编码基因和其应用，所述基于连接肽的双特异纳米抗体是以新型连接肽将不同的特异性的纳米抗体的基因连接后获得目的基因片段进一步重组表达获得的目的蛋白，所制备的基于连接肽的双特异纳米抗...
- 程海卫杨利郑其升陈瑾杜露平侯立婷于晓明乔绪稳张元鹏秦竹李兰王义伟张浩明
- 含免疫增强剂CVC1302口蹄疫灭活疫苗缩短免疫应答窗口期机制的研究被引量：2
- 2021年
- 为探究免疫增强剂CVC1302缩短口蹄疫灭活疫苗(KV)免疫应答窗口期的机制,本研究将灭活的O型口蹄疫病毒(FMDV)与CVC1302按照1.50配比后,与ISA206佐剂乳化制备疫苗(KV-CVC1302);将灭活的FMDV与ISA206佐剂乳化制备疫苗(KV),将上述疫苗分别免疫6周龄BALB/c雌性小鼠。免疫后7 d、28 d、56 d、90 d、120 d、150 d和180 d采血分离血清,利用O型FMD液相阻断ELISA(LBP ELISA)试剂盒检测各组小鼠血清FMDV特异性抗体水平。免疫后1 d,取注射位点肌肉,分别利用qPCR和ELISA检测其中细胞趋化因子的转录及表达水平。免疫后1 d、3 d、5 d和7 d分别采集注射位点肌肉及腹股沟淋巴结,制备单个淋巴细胞,利用流式细胞仪检测注射位点肌肉和腹股沟淋巴结的抗原递呈细胞(APC)[树突状细胞(DC)、巨噬细胞(Mph)、单核细胞(Mo)]的数量;免疫后1 d,利用流式细胞仪检测注射位点肌肉中DC的活化情况。结果显示,KV-CVC1302组小鼠FMDV特异性抗体水平、注射位点趋化因子转录及表达水平均显著高于KV组(p<0.01、p<0.001);且注射位点APC的数量及DC的活化水平也显著提高(p<0.001),该组小鼠腹股沟淋巴结APC的数量也明显高于KV组(p<0.05、p<0.01或p<0.001)。综上结果表明,CVC1302通过增强KV于注射位点诱导产生趋化因子的能力,募集大量的APC,进而对FMDV进行有效的捕获加工和递呈,转运至腹股沟淋巴结,诱导B细胞的形成,并分泌高水平抗体,从而缩短免疫应答窗口期。本研究首次证实CVC1302是在疫苗诱导免疫应答的启动阶段发挥作用,其通过募集活化的APC捕获更为有效的抗原以激活免疫系统,缩短了免疫应答窗口期,为后续研制新型免疫增强剂提供了新思路。
- 杜露平章晨昕侯立婷侯立婷郑其升于晓明
- 关键词：免疫增强剂O型口蹄疫病毒
- 用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用
- 本发明提供用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用，涉及到疫苗制造领域。该复合免疫增强剂，含有羧甲基茯苓多糖、透明质酸和α‑GC。本发明还提供所述复合免疫增强剂在猪伪狂犬灭活疫苗中的应用。本发明复合免疫增强剂，能够提...
- 于晓明陈瑾侯立婷张元鹏郑其升侯继波
- 一种猪流行性腹泻病毒、灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种猪流行性腹泻病毒、灭活疫苗及其制备方法，属于生物工程领域。猪流行性腹泻病毒NJ株，其保藏登记号为：CGMCC NO.13283。本发明提供该毒株在制备猪流行性腹泻疫苗中的应用、制备该毒株病毒液的方法及获得的...
- 陈瑾郑其升于晓明侯立婷侯继波
- 包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒的制备及佐剂活性
- 2024年
- 重组CTA1-DD蛋白具有与完整CT分子相当的全身性和黏膜佐剂功能,但在复杂的生理环境中易被酶或酸降解。本研究以同样具有佐剂活性的O-羧甲基壳聚糖(OCS)和硫酸葡聚糖(DS)为载体,通过离子交联形成纳米颗粒,将CTA1-DD蛋白嵌入其中,使其得到稳定保护。包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒的粒径为50~150 nm,Zeta电位约-50 mV,质量浓度1.0 mg/ml的CTA1-DD蛋白投入制备的包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒载药率25.33%,包封率86.56%。体外模拟释放试验结果显示CTA1-DD蛋白可在7 d内缓慢释放。将CTA1-DD蛋白与PRV灭活抗原混合后,接种至小鼠鼻腔,结果表明,包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒能够同时诱导更高的血清IgG抗体和黏膜IgA抗体表达,证明了其作为黏膜佐剂的高效性。
- 秦竹陈瑾陈瑾乔绪稳侯立婷杨利乔绪稳于晓明李兰郑其升
- 关键词：硫酸葡聚糖
