王国玉
- 作品数:33 被引量:23H指数:3
- 供职机构:上海市第七人民医院更多>>
- 发文基金:上海市卫生局青年科研基金吴阶平医学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 端粒酶逆转录酶小干扰RNA对结肠癌SW480细胞体外抑制作用的观察被引量:2
- 2011年
- 目的:探讨RNA干扰(RNAi)对结肠癌SW480细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的抑制效应。方法:化学合成靶向于hTERT基因的4个小分子干扰RNA(siRNA)序列,用阳离子脂质体为载体转染SW480细胞,分为siRNA1~4、siRNA阴性对照和空白对照6组。通过RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测结肠癌细胞转染后细胞hTERT mRNA和蛋白水平,并用MTS法检测细胞生长增殖。结果:siRNA1~4组hTERT mRNA相对表达量分别为0.54±0.18、0.56±0.19、0.46±0.10和0.84±0.18,端粒酶相对活性分别为0.57±0.18、0.56±0.19、0.09±0.08和0.70±0.19,siRNA1~4组hTERT蛋白相对表达量分别为0.41±0.18、0.45±0.17、0.08±0.07和0.82±0.16,其中siR-NA1~3组的hTERT mRNA表达量、端粒酶活性和蛋白表达量与空白对照组的差异有统计学意义,P<0.05。SW480细胞在转染后48h时的细胞增长平均抑制率分别为42.14%、39.12%、48.05%和35.85%。提示不同siRNA序列对SW480的转染效率不同,其中siRNA3组能显著下调hTERT mRNA和蛋白的表达水平,并能抑制端粒酶活性和促进SW480细胞凋亡,与空白对照组比较均差异有统计学意义,P<0.01。结论:靶向hTERT的RNAi能明显抑制SW480的增殖,hTERT可作为结肠癌基因治疗的靶点。
- 王国玉夏伟张玉娜李艳朱雪萍王瑛倪晶
- 关键词:结肠肿瘤
- saRNA调控NIS基因介导^(131)I对肝癌HepG2细胞体外抑制作用的实验研究被引量:2
- 2015年
- 目的探索通过小激活RNA(saRNA)调控钠碘转运体(NIS)基因特异性表达介导肝癌核素显像和治疗的可行性,为RNA激活(RNAa)技术介导核素基因治疗肿瘤的应用提供实验依据。方法 saRNA的设计合成:通过基因BLAST比对,设计与合成三条针对NIS基因的saRNA序列;细胞转染:以LipofectaminTM2000为saRNA载体,将saRNA转染到肝癌Hep G2细胞后72h,采用Western blotting分析NIS蛋白的表达水平,筛选出RNAa效率最高的saRNA,并进一步分析saRNA转染后不同时相NIS的表达水平,以及saRNA浓度-NIS表达水平的浓度-效应关系;体外核素摄取实验:体外培养条件下,评价转染肝癌Hep G2细胞对125I的摄取;细胞生长增殖抑制实验:体外培养条件下,评价131I对转染肝癌细胞的生长抑制率。结果 saRNA可上调NIS基因表达水平,其中saRNA482序列上调NIS表达水平最高;saRNA上调NIS的峰值出现在转染后72h,NIS维持高表达水平在10d以上;且NIS上调水平随saRNA浓度增高而增高。体外培养条件下,转染细胞与未转染细胞的摄碘水平差别明显,其中最高者摄碘较对照细胞高出64倍。体外培养条件下,相对未转染组肝癌细胞,131I对转染组Hep G2细胞的生长抑制率为60.7%。结论本研究设计合成的靶向NIS基因的saRNA可上调肝癌细胞NIS的表达水平,增强肝癌细胞摄取放射性碘的能力,研究还证实,通过RNAa调控NIS基因表达可介导131I治疗肝癌的潜力。
- 王国玉夏伟倪晶庄菊花
- 关键词:钠碘转运体肝癌131I
- GINS2基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用
- 本发明涉及GINS2基因或蛋白的抑制剂在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明设计了针对人GINS2基因的小分子干扰RNA序列,RNA干扰载体和RNA干扰慢病毒,进一步检测了GINS2基因的沉默效率、GINS2‑siRNA慢病毒...
- 夏伟叶颖倪晶庄菊花王国玉
- 文献传递
- 特异性hTERT-siRNA介导RNAi在Hela细胞中的实验研究被引量:8
- 2011年
- 目的:探讨RNA干扰对宫颈癌Hela细胞人端粒酶逆转录酶基因的抑制效应。方法:化学合成靶向于hTERT基因的4个siRNA片段和1个阴性对照小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)片段,分siRNA 1-4、control siRNA和空白对照组共6个组,分别用阳离子脂质体转染法将其导入Hela细胞内,通过RT-PCR和WesternBlot方法分别检测宫颈癌细胞转染后细胞hTERT mRNA和蛋白水平,MTS法检测细胞生长增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:siRNA-3组端粒酶活性明显下降,hTERT mRNA表达水平明显下降,hTERT蛋白表达明显下降,细胞凋亡率明显升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),阴性对照组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向于hTERT的siRNA能特异性抑制宫颈癌Hela细胞hTERT基因,下调hTERT mRNA及蛋白表达水平,抑制癌细胞生长增殖,促进宫颈癌细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗研究提供实验依据。
- 袁羡王国玉倪晶张玉娜叶蓓鸿
- 关键词:人端粒酶逆转录酶HELA小干扰RNA
- 人PYCR1基因的shRNA干扰序列及其应用
- 本发明公开了人PYCR1基因的用途及其相关相关药物。本发明公开了人PYCR1基因在肿瘤治疗、肿瘤诊断及药物制备中的用途。本发明还进一步构建了人PYCR1基因小分子干扰RNA、人PYCR1基因干扰核酸构建体、人PYCR1基...
- 夏伟叶颖王国玉庄菊花倪晶
- 文献传递
- TPO基因的saRNA分子及其应用
- 本发明涉及分子生物学医药领域,合成了TPO基因的saRNA分子,所述saRNA分子序列与TPO基因转录起始位点上游6000bp和下游1000bp区域的序列SEQ ID NO:1互补,其能有效地激活肿瘤细胞内低表达或不表达...
- 夏伟叶颖庄菊花王国玉
- 文献传递
- MicroRNA-497通过直接靶向AKT3抑制甲状腺乳头状癌的增殖、迁移和侵袭的机制研究
- 目的:探讨MicroRNA-497在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)中的作用及其与丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(RAC-γ serine/threonine-protein kina...
- 马星庄菊花叶颖王国玉倪晶何赛飞夏伟
- 关键词:甲状腺乳头状癌增殖迁移
- 一种P4HB基因表达的抑制剂及其应用
- 本发明提供了一种P4HB基因表达的抑制剂,所述抑制剂为具有SEQ ID No1所示核苷酸序列的siRNA分子。本发明提供的抑制剂,通过siRNA分子的核苷酸序列与P4HB基因表达产生的mRNA发生互补结合,从而阻止靶位点...
- 夏伟叶颖王国玉庄菊花
- 文献传递
- TPO基因的saRNA分子及其应用
- 本发明涉及分子生物学医药领域,合成了TPO基因的saRNA分子,所述saRNA分子序列与TPO基因转录起始位点上游6000bp和下游1000bp区域的序列SEQ ID NO:1互补,其能有效地激活肿瘤细胞内低表达或不表达...
- 夏伟叶颖庄菊花王国玉
- 文献传递
- MicroRNA-601通过直接靶向PIK3R3成为肝癌潜在的抑癌因子
- 目的:探讨MicroRNA-601在肝细胞癌中的作用及其与磷酸肌醇-3-激酶调节亚基3(PIK3R3)的关系.方法:采用逆转录—定量聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative po...
- 马星宋雅楠何赛飞庄菊花王国玉倪晶叶颖夏伟
- 关键词:肝细胞癌增殖