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靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的人工miRNA的构建与鉴定被引量：1: 2010年; 趋化因子CCR5是HIV-1入侵机体细胞的主要辅助受体之一,通过抑制CCR5的表达可以在一定程度上阻断HIV-1的复制进程.miRNA介导的RNA干扰相比经典的siRNA在应用中具有更多的特点.本研究的目的是构建可特异有效靶向CCR5的人工miRNA元件.本研究以CCR5基因序列为模板设计了14个miRNA靶序列,以天然miR-30a为基础骨架通过靶序列区替换构建人工miRNA元件.通过将miRNA表达质粒与携带靶序列区的报告质粒的共转染抑制实验检测不同miRNA的抑制效率,结果显示miCCR-13A具有较好的抑制效率和特异性.进一步将miCCR-13A表达载体转染CCR5阳性的HIV-1受体细胞株TZM-b1,RT-PCR检测显示miCCR-13A可在细胞中获得有效表达,同时应用免疫流式细胞术检测显示在miCCR-13A转染细胞相比对照细胞的CCR5蛋白的检测活性明显降低.进一步的研究显示miCCR-13A在细胞中不会影响细胞活性和干扰素效应相关基因osa1和stat1 mRNA水平,具有良好的特异性.本研究获得的可特异靶向CCR5的人工miRNA元件可为进一步的抗HIV-1研究提供重要基础.; 王颖彬程通魏丽华张涛梁露萍夏宁邵; 关键词：CCR5 RNA干扰

增强型绿色荧光蛋白嵌合肠道病毒71型感染性克隆的构建及初步应用: 近年来，包括我国在内的东亚地区多次爆发由肠道病毒感染导致的手足口病(hand-foot and mout disease，HFMD)疫情。肠道病毒71型(EV71)是HFMD主要病原体之一，其重症患者比例以及病死率均明显...; 梁露萍; 关键词：手足口病肠道病毒71型感染性克隆增强型绿色荧光蛋白重组病毒中和抗体

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梁露萍