李晓明
- 作品数：5 被引量：15H指数：1
- 供职机构：河北农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水稻白叶枯病抗性基因Xa21和稻瘟病抗性基因Pi-d2激酶蛋白质在毕赤酵母中的表达及条件优化
- 2010年
- 【目的】白叶枯病和稻瘟病是最主要的水稻病害,Xa21是水稻白叶枯病抗性基因,Pi-d2是稻瘟病抗性基因,二者都编码类受体激酶蛋白质。本研究旨在毕赤酵母系统中表达XA21和PI-D2激酶蛋白质。【方法】用Xa21和Pi-d2的激酶区PCR产物,构建了pPICZαA-Xa21K、pPICZαA-Pi-d2K重组质粒,酶切及测序验证后,将重组质粒线性化,转化到毕赤酵母菌株中,系统地比较了不同酵母菌株(KM71、GS115、X33),不同甲醇浓度(1%、2%、3%),不同pH(pH5、pH6、pH7、pH8)值,不同诱导时间(24h、48h、72h)条件下激酶蛋白质的表达情况。【结果】XA21和PI-D2激酶蛋白质可以在毕赤酵母中表达,但表达的蛋白质不能分泌到培养基上清中,而只能在菌体中检测到,对表达条件的系统比较发现,毕赤酵母菌株KM71和X33、2%的甲醇诱导浓度、pH5和48h以上的诱导时间有利于激酶蛋白质的表达,最后我们在酵母裂解物上清中获得了纯化的考染可见的激酶蛋白质。【结论】在毕赤酵母中表达了XA21和PI-D2激酶蛋白质,为下一步生化特性研究奠定了基础。
- 李晓明王书利李莉云李晓兵王静刘国振
- 关键词：水稻白叶枯病稻瘟病抗病基因毕赤酵母蛋白质表达
- H1N1流感病毒聚合酶片段的CpG抑制及其对密码子偏爱性的影响被引量：1
- 2011年
- H1N1流感病毒的聚合酶具有RNA复制、转录等功能,并且对流感病毒片段包装、子代繁殖及宿主适应性等有着重要作用。通过分析人、猪及禽类H1N1流感病毒聚合酶片段的二核苷酸频率及同义密码子的偏爱性,发现不同宿主中,流感病毒聚合酶片段的CpG频率最低,且均被强烈抑制;通过三类宿主间的比较发现,人流感病毒抑制最为强烈,且其CpG频率随年份呈下降趋势,但2009年毒株的CpG频率突然上升。比较同义密码子使用频率发现,含有CpG的同义密码子相对使用频率均小于1,证明CpG抑制作用是影响同义密码子偏爱性的一个重要因素。以上结果暗示,CpG抑制对H1N1流感病毒的进化及跨宿主传播可能有重要影响。
- 巩校东樊少华张萃李晓明
- 关键词：H1N1聚合酶
- 基于抗体的水稻蛋白质组学理论与实践
- 2022年
- 水稻是最重要的粮食作物之一,不仅是世界上一半以上的人口以水稻作为主粮,也是基础研究的模式植物。项目团队在前人研究的基础上,结合蛋白质研究的需求和发展趋势,凝练提出了“基于抗体的水稻蛋白质组学”概念,十多年来,不断优化技术路线,积极拓展和丰富相关理论并开展实践。1主要创新点1.1首次提出了“基于抗体的水稻蛋白质组学”概念。
- 刘国振李莉云窦世娟杨明李晓明张剑硕侯明明曹英豪刘丽娟魏健郭亚璐史佳楠陈悦王田幸子范伟张柳马金姣张彤刘玉晴燕高伟徐珊杨烁周艳杜铁民牛东东荣瑞娟黄腾柴帅杰郭美岑缪刘杨李雪姣徐文静关明俐贾霖贾盟曾祥然高庆华刘钊王宪云刘雨萌兰金苹白辉刘斯奇尹长城吴琳韦汉福韩宇宁赵丽英杨春霞武鹏程马晓飞赵志静潘秦郝育杰陈浩赵磊康昊翔耿广荟孔令男史晓儒奚文辉
- 关键词：蛋白质组学结合蛋白质项目团队抗体
- 水稻叶绿体蛋白质在生长发育过程中的表达研究被引量：13
- 2010年
- 在植物中,叶绿体是负责光合作用的细胞器,对叶绿体内的各种生物过程人们已经积累了很多知识,但对叶绿体蛋白质的表达还所知甚少.为了解水稻叶绿体蛋白质在正常生长发育过程中的表达情况,尝试基于抗体的水稻蛋白质组学策略.选取了10个水稻叶绿体基因,利用表达的蛋白质或合成的抗原决定簇片段制备了抗体,用Westernblotting检测了相应蛋白质在5个发育时期的根、茎、叶及穗组织中的表达.发现10个蛋白质均在叶片中表达,在根中不表达.与原初反应相关的叶绿素A/B结合蛋白1和2(CAB1和CAB2)、与电子传递相关的放氧增强蛋白1(OEE1)及与活性氧清除相关的过氧还蛋白过氧化物酶(2-CysP)和硫氧还蛋白(Trx)在茎中表达.而在卡尔文循环中发挥作用的Rubisco活化酶(RCA)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、果糖二磷酸醛缩酶(FBPA)和景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)蛋白质在茎中不表达.在穗中,这些蛋白质的表达时序不同,CAB2和2-CysP在穗发育的全程表达,CAB1和OEE1在中后期表达,而卡尔文循环中的蛋白质只在中期表达.有意思的是,卡尔文循环中的蛋白质表达模式相似,这一结果从蛋白质表达水平支持它们之间的相互衔接关系.此外,实验还揭示了可能的蛋白质修饰、二聚体及不同的转录本现象.将目标基因的表达谱与转录谱进行比较,发现二者间有一定的平行性,但也有明显的区别.以水稻叶绿体蛋白质为对象,直观并相对定量地揭示了它们的表达模式,为阐释其功能提供了信息,也为基于抗体的水稻蛋白质组学策略提供了一个初步数据.
- 白辉王宪云曹英豪李晓明李莉云陈浩刘丽娟朱健辉刘国振
- 关键词：水稻叶绿体光合作用蛋白质表达谱
- 水稻内参蛋白质的选择及鉴定
- 背景:随着水稻测序工作的完成,了解水稻蛋白质的功能将成为生物学研究的重要内容。在各种生物学实验中,为了比较基因的转录和表达变化,都需要一个内参基因来标定上样量和实验条件的稳定性,所以,筛选并使用正确的内参基因对生物学实验...
- 李晓明
- 关键词：水稻内参基因蛋白质表达
- 文献传递
