李川源
- 作品数：20 被引量：51H指数：5
- 供职机构：杜克大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市卫生局“百人计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 早期移植性肿瘤生长与新生血管形成过程观察及机理研究
- 黄倩王丰李川源徐萍田毓华李凌吴继红武文森胡宏惠陈霞芳谢匡成易苗英刘文文王晓莉
- 该课题采用GFP表达质粒或GFP逆转录病毒介导GFP基因转移，建立了多种能持续、稳定表达GFP的肿瘤细胞株。建立了新的，以GFP基因标记的膀胱和视网膜原位肿瘤动物模型，观察到了接近自然状态下的肿瘤生长方式、转移途径和部位...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤新生血管VEGF
- 利用绿色荧光蛋白动态观察活体内肿瘤细胞生长及瘤体形成过程被引量：5
- 2000年
- 黄倩李川源
- 关键词：肿瘤细胞绿色荧光蛋白肿瘤浸润
- 人肝癌细胞中缺氧反应元件对微环境的反应被引量：1
- 2008年
- 目的:通过观察缺氧反应元件(hypoxia-response element,HRE)调控下,绿色荧光蛋白质(green fluorescent protein,GFP)构建的肝癌细胞Bel-7402/5HRE-EGFP在缺氧条件下,缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等表达水平的变化,研究HRE对微环境的反应特性。方法:以5个串连的HRE和巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)的微小启动子为转录调控元件、GFP为报告基因构建表达载体,应用FCM和细胞免疫染色法观察缺氧、一氧化氮、过氧化物和酸性pH等微环境的变化对人肝癌细胞Bel-7402中HRE活性的影响,以及缺氧条件下HIF-1α、VEGF表达水平的变化。观察缺氧探针哌莫硝唑的染色强度和分布与HIF-1α、VEGF和GFP表达强度和分布之间的关系,探求裸鼠体内肿瘤组织缺氧对HRE活性及其相关基因表达的影响。结果:肝癌细胞中HRE对缺氧非常敏感,肿瘤细胞和组织缺氧时可上调HIF-1α和VEGF的表达,两者的分布也基本一致。结论:缺氧在调控肝癌血管生成因子表达方面可能起着重要的作用。
- 王丰陈霞芳韦芳吴继红谢匡成田毓华易苗英李川源黄倩
- 关键词：缺氧缺氧诱导因子1缺氧反应元件绿色荧光蛋白质类
- 阿糖胞苷与腺相关病毒的复合制剂及其用途
- 本发明属于生物医药领域，涉及新的基因治疗复合制剂及其用途和使用方法。公开了在使用腺相关病毒作为基因传递载体时，联合使用一定剂量的阿糖胞苷，可以明显增加腺相关病毒对正常和肿瘤细胞的转导效率，使腺相关病毒介导的外源基因的表达...
- 黄倩张圣海吴继红吴小兵董小岩李川源
- 文献传递
- 二氯化钴对腺病毒基因表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究二氯化钴(CoCl2)对缺氧反应元件调控E1AE1B表达的条件复制型腺病毒载体(Ad-5HRE-E1AE1B-RFP)和缺乏缺氧反应元件的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-EGFP)在肿瘤细胞内表达和复制的影响。方法:肿瘤细胞经不同浓度的CoCl2处理后,Western印迹法检测缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达;倒置荧光显微镜、FCM法及空斑形成实验等观察经CoCl2处理后,感染条件复制型腺病毒和(或)复制缺陷型腺病毒的肿瘤细胞中外源基因的表达水平和病毒复制情况;小动物成像仪观察缺氧调控的条件复制型腺病毒在肿瘤内提高复制缺陷型腺病毒表达的效率。结果:适当浓度的CoCl2(0.4和0.08μg/mL)能使胃癌细胞株(SGC7901)中HIF-1α蛋白稳定表达并积聚,可较好地模拟缺氧状态;在0.4μg/mLCoCl2作用下,Ad-5HRE-E1AE1B-RFP对肿瘤细胞的感染效率明显提高,表现为外源基因RFP阳性表达的百分率和荧光强度均明显提高,但空斑形成实验显示Ad-5HRE-E1AE1B-RFP并没有复制。0.4μg/mLCoCl2也能提高其他非缺氧调控的复制缺陷型腺病毒如Ad-EGFP、Ad-Luc的感染效率和表达水平;Ad-5HRE-E1AE1B-RFP与复制缺陷型腺病毒Ad-Luc联合注射裸鼠肿瘤能显著提高Ad-Luc的表达。结论:CoCl2能明显提高腺病毒的基因表达水平,其作用机制不仅与CoCl2诱导缺氧有关,也可能与影响基因转录有关。
- 刘新建季迅达田毓华陈霞芳谢匡成吴继红张圣海徐萍李川源黄倩
- 关键词：胃肿瘤腺病毒感染基因表达调控肿瘤缺氧诱导因子1二氯化钴
- 使用热休克蛋白基因启动子调控靶基因在肿瘤局部表达被引量：8
- 2001年
- 目的 利用人热休克蛋白基因启动子结合加热选择性诱导目的基因在肿瘤局部表达 ,建立肿瘤基因治疗新方法。方法 分离不同大小的人热休克蛋白 70基因 5’端调控顺序作为启动子 ,以绿色荧光蛋白 (GFP)作报告基因 ,构建热诱导型GFP表达质粒。转染体外培养的肿瘤细胞 ,或将稳定转导GFP表达质粒的肿瘤细胞移植到大鼠皮窗内 ,或将热诱导型GFP腺病毒注射到肿瘤内 ,加热后直接利用荧光显微镜观察GFP表达水平。结果 40 0bp人热休克蛋白 70基因 5’端调控顺序背景表达水平低 ,加热后可被显著激活 ,能作为启动子有效驱动下游目的基因的表达。GFP作报告基因使体内外肿瘤细胞内目的基因的表达水平仅通过荧光显微镜便能直接观察到。结论 利用热诱导型启动子结合加热能选择性诱导目的基因在肿瘤局部表达 ,为肿瘤基因治疗提供了一种新方法。
- 黄倩李川源
- 关键词：肿瘤基因表达基因治疗热休克蛋白靶基因基因启动子
- 病毒与非病毒介导的绿色荧光蛋白基因转导的比较研究被引量：5
- 2000年
- 黄倩李川源
- 关键词：绿色荧光蛋白基因CDNA基因转导重组质粒
- 新型高转移膀胱癌细胞株及其建立方法
- 本发明属肿瘤生物学领域。本发明以高转移膀胱癌细胞株BTT细胞株为宿主细胞,将绿色荧光蛋白基因转导入BTT细胞株,建立新型高转移膀胱癌细胞株。宿主细胞生物学特征不变,标记物无毒、无害,在肿瘤细胞生长、增长及分裂过程中不丢失...
- 黄倩武文森李川源徐萍李凌王丰刘文文顾青
- 文献传递
- 阿糖胞苷与腺相关病毒的复合制剂及其用途
- 本发明属于生物医药领域，涉及新的基因治疗复合制剂及其用途和使用方法。公开了在使用腺相关病毒作为基因传递载体时，联合使用一定剂量的阿糖胞苷，可以明显增加腺相关病毒对正常和肿瘤细胞的转导效率，使腺相关病毒介导的外源基因的表达...
- 黄倩张圣海吴继红吴小兵董小岩李川源
- 文献传递
- 绿色荧光蛋白逆转录病毒及其介导的视网膜色素上皮细胞基因转移研究被引量：2
- 2001年
- 目的 制备携带绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)基因的逆转录病毒 ,感染原代与建株的人视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelium ,RPE)细胞 ,评价逆转录病毒对人RPE细胞的感染能力 ,为视网膜病变的基因治疗奠定基础。方法 分离编码GFP的cDNA片段并插入逆转录病毒载体pLNCX ,借助脂质体将重组逆转录病毒载体pLNCX GFP转入单嗜性及双嗜性包装细胞 ,G418筛选抗性克隆 ,分离GFP表达水平最高的克隆 ,收集含病毒颗粒的上清液感染NIH3T3及体外培养的人原代与建株的RPE细胞。结果 重组逆转录病毒载体pLNCX GFP转染各种包装细胞后 ,可产生GFP逆转录病毒。由双嗜性包装细胞产生的GFP逆转录病毒能够感染原代与建株的人RPE细胞 ,GFP基因可持续在RPE细胞内表达。结论 逆转录病毒能够简便、快速、稳定将目的基因转入RPE细胞 ,可作为眼底病变基因治疗介导目的基因转移的重要工具。
- 黄倩徐萍刘文文王丰顾青田毓华樊莹谢匡成陈霞芳李川源
- 关键词：逆转录病毒科基因转移绿色荧光蛋白视网膜色素上皮细胞
