常胜军
- 作品数：3 被引量：48H指数：3
- 供职机构：清华大学医学院生物医学工程系更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 香石竹斑驳病毒(CarMV)云南分离物CP基因的克隆和序列分析被引量：3
- 2003年
- 香石竹斑驳病毒(CarMV)是侵染香石竹的主要病毒.关于该病毒的株系和不同地区分离物的病毒核酸序列研究报道较少.我们根据Guilley报道的该病毒的核酸序列设计引物,对香石竹斑驳病毒云南分离物的CP基因进行了RT-PCR扩增和序列分析.
- 孔宝华李文君常胜军蔡红刘进元陈海如
- 关键词：香石竹斑驳病毒分离物CP基因
- RT-PCR检测李坏死环斑病毒的研究被引量：39
- 2000年
- 为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒 (PNRSV) ,根据该病毒RNA 3序列设计引物 ,对感病和健康组织总RNA进行RT PCR ,结果从感病组织中扩增出了大约 45 0bp的目的片段 ,而健康组织中无此扩增带。将此PCR产物连接到 pGEM T easy载体 ,转化大肠杆菌DH5 5α菌株 ,得到了含有目的片段的重组子 ,并采用双脱氧终止法进行序列分析 ,结果与美国报道的李坏死环斑病毒RNA3序列对应部分核苷酸基本一致 (其同源性达 93.6 %) ,这表明应用RT PCR来检测李坏死环斑病毒是可行的 ;PCR产物克隆作为RT PCR反应的阳性对照解决了检疫对象不能扩散的问题 ,从而建立了RT
- 孔宝华陈海如常胜军朱水芳黄文胜刘进元
- 关键词：李坏死环斑病毒RT-PCR
- 香石竹斑驳病毒的鉴定和RT-PCR检测被引量：7
- 2002年
- 从表现为叶斑驳、花碎色症状的香石竹病株上获得一病毒分离物 ,电镜负染观察到直径为 2 8～ 33nm的球状粒子。病毒提取液经紫外光测定呈典型核蛋白吸收曲线 ,OD2 60 /OD2 80 =1 70 ;血清学反应与CarMV抗血清出现明显的沉淀线。通过以上实验结果 ,确定该病毒分离物为香石竹斑驳病毒 (carnationmottlevirus ,CarMV)。根据该病毒的RNA序列设计引物 ,对病健材料进行了RT PCR检测 ,结果从感病材料中扩增出大约 6 0 0bp的特异片段 ,而健康植物无此扩增带。将PCR产物连接 pGEM-T-easy载体 ,转化大肠杆菌JM 10 9,得到了含目的片段的重组子 ,经双脱氧序列分析 ,与Guilley报道的序列对应部分的核苷酸序列基本一致 (其同源性达 96 % ) ,最低检出病毒核酸含量为 5ng ,表明应用RT
- 孔宝华蔡红刘进元陈海如常胜军李文君段永嘉
- 关键词：香石竹斑驳病毒RT-PCR检测
