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应用酚－SDS法提纯新城疫病毒基因组RNA被引量：21: 1996年; 应用酚－ＳＤＳ法提纯新城疫病毒基因组ＲＮＡ吴艳涛，刘秀梵，张如宽，刘伟忠（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）新城疫病毒（ＮＤＶ）属副粘病毒科，为有囊膜的单链、负极性ＲＮＡ病毒，基因组ＲＮＡ全长１５ｋｂ。开展ＮＤＶ分子生物学研究，首先需要提取完整...; 吴艳涛刘秀梵张如宽刘伟忠; 关键词：鸡病毒新城疫病毒基因组 RNA

新城疫病毒Ulster株血凝素-神经氨酸酶基因的克隆与鉴定被引量：2: 1997年; 新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株经ＳＰＦ鸡胚增殖和超速离心纯化后，以酚－ＳＤＳ法提取其基因组ＲＮＡ，作为反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的模板。根据其已发表的Ｆ和ＨＮ基因核苷酸序列，合成一个长为３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于Ｆ基因内）和一对分别长为２８、３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于ＨＮ基因两侧）分别作为反转录引物和ＰＣＲ引物。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析，出现一条长为１．９３ｋｂ的特异性条带，与预期相符。并将此特异性条带克隆入质粒载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）中，并经限制性核酸内切酶分析（ＲＥＡ）。ＲＴ－ＰＣＲ和ＲＥＡ结果证实其为新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株的血凝素－神经氨酸酶基因。; 刘伟忠姜焱吴艳涛彭大新张如宽刘秀梵; 关键词：鸡病病毒基因克隆新城疫

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刘伟忠