马秋平
- 作品数：19 被引量：29H指数：3
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 一种磁珠提取结合实时荧光定量核酸扩增定量检测重组人血白蛋白中毕赤酵母DNA残留方法的建立被引量：2
- 2018年
- 目的探索利用磁珠提取法结合实时荧光定量核酸扩增技术,建立定量测定毕赤酵母来源重组人血白蛋白中残留DNA的方法。方法将蛋白裂解后采用磁珠提取法提取样品中的残留DNA,利用Taqman探针法对样品和DNA标准品进行定量PCR测定,根据标准曲线对样品中的DNA残留量进行分析。采用重组人血白蛋白和血浆来源人血白蛋白2种基质对建立的方法进行回收率和重复性测定,评价方法准确性及精密度,并测定毕赤酵母来源重组人血白蛋白产品中残留DNA含量。结果该方法测定毕赤酵母DNA残留最低准确定量浓度为3 fg·μL^(-1),DNA含量在3 fg·μL^(-1)～300 pg·μL^(-1)内曲线线性良好,标准曲线相关系数r^2为0.998 3;以重组人血白蛋白作为基质时,100和10fg·μL^(-1)DNA加标回收率均值分别为93.58%(n=4)和215.56%(n=4);相对标准偏差RSD分别为19.6%及42.9%;以人血白蛋白作为基质时,100和10 fg·μL^(-1)DNA加标回收率均值分别为67.09%(n=3)和113.40%(n=3);相对标准偏差RSD分别为6.9%和11.1%。按该方法检测毕赤酵母来源的3批重组人血白蛋白DNA残留量均值(n=7)分别为5.98、4.16和4.49 fg·μL^(-1)(n=7);3批样品DNA残留量均小于1 ng·10 g(Pro)^(-1)。结论磁珠分离法结合荧光定量PCR方法可解决超高蛋白浓度背景下重组人血白蛋白痕迹量DNA定量测定的技术难题,准确性和重现性良好,可以用于重组人血白蛋白毕赤酵母DNA残留量的定量检测。
- 王敏力马秋平侯继锋
- 关键词：毕赤酵母
- 抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品的制备与协作标定被引量：4
- 2012年
- 目的:制备并标定抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品。方法:按2010版年版中国药典三部和2000年版《中国生物制品规程》的有关要求,制备了抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体),并分装冻干、进行质量检测,复溶后对效价开展协作标定,并进行稳定性检测。结果:抗A、抗B血型定型试剂的装量、外观、复溶时间、特异性、亲和力、效价、冷凝集素和不规则抗体检测、水分测定均符合2000年版《中国生物制品规程》中的规定。不同实验室的标定结果差异较大,计算效价的几何均数,抗A血型定型试剂结果为对A11∶256～1∶512之间,对A21∶128～1∶256之间,对A2B 1∶128～1∶256之间;抗B试剂结果对B 1∶256～1∶512之间。稳定性检测符合要求。结论:该抗A、抗B血型定型试剂各项指标均符合要求,可作为国家参考品使用;经标准物质委员会讨论,将该参考品稀释1倍后可作为抗A、抗B血型定型试剂产品的最低效价标准。
- 马秋平吕秀华侯继锋
- 关键词：ABO血型系统血型定型试剂单克隆抗体参考品
- 原料血浆及血液制品人细小病毒B19 DNA检测与分析
- 目的：用实时荧光定量PCR方法，检测原料血浆及血液制品中的人细小病毒B19 DNA，分析人细小病毒B19在献浆员中的感染率及血液制品的污染情况。 方法：在B19基因组编码区的高度保守区2000～2300bp之间设计PC...
- 侯继锋王敏马秋平
- 关键词：原料血浆血液制品细小病毒B19感染DNA检测实时荧光PCR法
- 检验用ABO型和RhD型红细胞试剂的质量评估被引量：1
- 2016年
- 目的建立ABO和RhD型检验用红细胞试剂的检测方法和评价指标,并对其进行质量评估。方法利用红细胞保存液的pH、直（间）接抗人球蛋白试验、红细胞抗原特异性试验、红细胞抗原强度试验及亲和力试验5项检测方法及评价指标,对44株红细胞试剂进行质量评估。结果 44株红细胞试剂pH均在6.24~6.95之间,直（间）接抗人球蛋白试验结果均为阴性,其抗原特异性、抗原强度及亲和力性能均符合指标要求。结论 5项检测方法和评价指标可用于ABO和RhD型检验用红细胞试剂的质量评估,为建立统一的检测方法和评价指标提供依据。
- 沈舒石大伟刘艳马秋平张春涛
- 微柱凝胶法与试管抗人球蛋白法检测静注人免疫球蛋白中抗A、抗B血凝素滴度效果的比较
- 2014年
- 目的比较微柱凝胶法与试管抗人球蛋白法检测静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)中抗A、抗B血凝素滴度的效果。方法分别采用微柱凝胶法与试管抗人球蛋白法检测34批IVIG样品以及1批IVIG抗A、抗B血凝素最大效价国际标准品(07/310)中的抗A、抗B血凝素滴度,并分析两种方法检测结果的相关性、灵敏度和重复性。结果两种方法检测抗A、抗B血凝素滴度的结果均呈高度正相关性(r值分别为0.809 4和0.834 9,P均<0.05);微柱凝胶法的灵敏度比试管抗人球蛋白法高约2个滴度;微柱凝胶法较试管抗人球蛋白法具有更好的重复性。结论微柱凝胶法与传统的试管抗人球蛋白法相比,具有高度相关性、更高的灵敏度和更好的重复性,可用于IVIG中抗A、抗B血凝素滴度的测定。
- 马秋平侯继锋
- 关键词：微柱凝胶法抗人球蛋白法血凝素
- 免疫微柱凝胶法在静注人免疫球蛋白抗A、抗B血凝素测定中的应用
- 为了验证免疫微柱凝胶法代替传统试管抗人球蛋白法检测静注人免疫球蛋白中抗A、抗B血凝素的可行性，分别使用免疫微柱凝胶法与试管抗人球蛋白法对静注人免疫球蛋白中抗A、抗B血凝素国际标准品(07/310)进行了20次测定，对重复...
- 马秋平侯继锋
- 关键词：静注人免疫球蛋白
- 人免疫球蛋白甲型肝炎抗体国家标准品的研制被引量：3
- 2018年
- 目的:研制人免疫球蛋白甲型肝炎抗体国家标准品,用于人免疫球蛋白产品中甲型肝炎抗体效价测定。方法:制备人免疫球蛋白半成品作为标准品原料,分装冻干后按2015版中国药典规定对标准品的水分含量、分装精度、无菌检查和稳定性进行考察。以国际标准品97/646为标准,在3家实验室用ELISA法对国家标准品的甲肝抗体效价进行协作标定。结果:该标准品的水分含量为1.4%,分装精度为0.36%,无菌检查合格。3家实验室对标准品甲肝抗体效价进行了22次标定,实验室间测定的RSD为8.2%,效价的加权平均值为每支34.5 IU。37℃158 d加速稳定性试验和-20℃12个月长期稳定性试验显示该标准品效价稳定无下降趋势。结论:该批人免疫球蛋白甲型肝炎抗体国家标准品各项检测指标符合要求,可以作为国家标准品发放用于人免疫球蛋白甲型肝炎抗体的效价测定。
- 马秋平王箐舟侯继锋
- 关键词：国家标准品甲型肝炎人免疫球蛋白血液制品酶联免疫
- 气相色谱法检测重组人血白蛋白中异丙醇残留量被引量：3
- 2017年
- 目的建立重组人血白蛋白产品中异丙醇残留量检测的气相色谱法。方法色谱条件:DB-624毛细管色谱柱(30 m×0.53 mm,3μm);进样口温度150℃;检测器为FID,温度200℃;空气流量400 ml/min;氢气流量40 ml/min;载气为高纯氮气,流量6.0 ml/min;程序升温:起始温度60℃保留5 min,以40℃/min升至120℃,保持3 min;分流进样,分流比为5∶1;进样量为1μl。以正丁醇为内标,对建立的方法进行专属性、精密度、准确度、耐用性验证,确定该方法的线性范围和检测限。用建立的方法检测3批重组人血白蛋白样品中异丙醇残留量。结果异丙醇浓度在10~300μg/ml范围内,与异丙醇与正丁醇峰面积比的线性关系良好(r=0.999 9),最低检出限为0.09μg/ml;该检测条件下与异丙醇性质相似的甲醇和乙醇对异丙醇的测定基本无影响;异丙醇与正丁醇峰面积比3次检测结果的RSD为0.4%,精密度良好;不同浓度异丙醇分别与重组人血白蛋白等体积混合,3次检测结果的回收率在94.2%~105.0%之间,准确度良好;不同检测器温度和不同进样口温度条件下测定的色谱峰面积的平均RSD分别为1.6%和2.2%,对测定结果基本无影响。3批重组人血白蛋白样品均未检测出异丙醇残留,符合《中国药典》三部(2015版)推荐标准。结论建立的气相色谱法快速、准确,可用于检测重组人血白蛋白中异丙醇的残留量。
- 马秋平王敏力侯继锋王箐舟
- 关键词：气相色谱白蛋白异丙醇
- 原料血浆及血液制品中人细小病毒B19 DNA的检测被引量：14
- 2012年
- 目的检测我国原料血浆及血液制品中人细小病毒B19(Human parvovirus B19)的污染情况。方法在B19基因组编码区的高度保守区2 000～2 300 bp之间设计PCR引物探针,采用荧光定量PCR法检测单人份血浆、生产用混合血浆、静注人免疫球蛋白、人纤维蛋白原、人凝血因子Ⅷ及人凝血酶原复合物中的B19病毒DNA。结果单人份血浆、生产用混合血浆、静注人免疫球蛋白、人纤维蛋白原、人凝血因子Ⅷ和人凝血酶原复合物的B19病毒DNA阳性率分别为0.092%、82.41%、0、45.83%、67.86%和78.79%。结论我国原料血浆及血液制品中B19病毒的污染情况略低于国外文献报道,可能与试剂盒的灵敏度及样本量有关,有必要对国内的相关制品作进一步的跟踪。
- 侯继锋王敏马秋平
- 关键词：荧光定量PCR血液制品
- ABO正定型和RhD定型检测卡(柱凝集法)的质量分析
- 2016年
- 目的对在我国上市的9个品种的ABO正定型和RhD定型检测卡(柱凝集法)进行实验室质量分析。方法使用性能良好的红细胞试剂对上述试剂盒的外观、特异性、灵敏度、重复性、批间重复性和稳定性进行检测。结果参与验证的ABO正定型和RhD定型检测卡(柱凝集法),外观、特异性、灵敏度、重复性、批间重复性和稳定性均能达到要求。结论通过对ABO正定型和RhD定型检测卡(柱凝集法)的实验室验证,形成了相关的性能条款,制定了相关的行业标准。
- 沈舒周海卫刘东来马秋平张春涛
