郑诚
- 作品数：8 被引量：3H指数：1
- 供职机构：上海海洋大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 一种水产品中主要过敏原的快速免疫磁珠层析方法
- 一种水产品中主要过敏原的快速免疫磁珠层析方法，采用杂交瘤技术制备筛选的、既能与食用甲壳类水生生物和食用软体水生生物Tm过敏原有特异性反应的鼠系单克隆抗体，和能对鱼类的小清蛋白和青蛙、大鼠、海龟脊椎动物的Pa具有特异性反应...
- 卢瑛王锡昌郑诚石良
- 文献传递
- 日本沼虾Bax基因克隆及其在低氧胁迫过程中的作用被引量：1
- 2024年
- 为探究细胞凋亡相关基因Bax(B-cell lymphoma-2 associated X protein)在日本沼虾低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验采用cDNA末端快速扩增(RACE)PCR技术获得日本沼虾细胞凋亡相关基因Bax的cDNA全长序列,采用半定量RT-PCR与实时荧光定量PCR(qPCR)分析其在日本沼虾不同组织、不同低氧阶段的表达情况,同时采用Western blot与免疫组化分析了低氧下日本沼虾Bax蛋白的表达与定位。日本沼虾Bax基因cDNA全长2287 bp(NCBI登录号:MZ823353),包括5'非编码区(UTR)为42 bp,3'UTR为814 bp,开放阅读框(ORF)1431 bp,编码476个氨基酸。通过软件和生物信息网站对其序列进行分析,氨基酸相似度比对显示,日本沼虾细胞凋亡基因Bax富含高度保守的BH1、BH2及BH3结构域。系统进化树分析显示,日本沼虾Bax基因与斑节对虾等甲壳动物Bax聚为一支,具有最近的亲缘关系。RT-PCR结果表明,日本沼虾Bax基因在肝胰腺中表达量最高,在脑中表达量最低。在低氧胁迫1~96 h时,日本沼虾鳃和肝胰腺组织Bax基因表达量均显著高于对照组,这与日本沼虾Bax蛋白表达丰度基本相似。通过构建原核表达载体获得体外重组蛋白Bax,并将纯化重组蛋白免疫兔子获得抗血清。免疫组化结果显示,鳃和肝胰腺Bax蛋白阳性信号主要定位在鳃上皮细胞和肝细胞中。最后,采用流式细胞仪分析表明,日本沼虾血细胞凋亡率在低氧胁迫96 h时显著高于对照组,这与日本沼虾Bax基因转录水平和蛋白表达丰度相吻合。研究表明,日本沼虾Bax基因在日本沼虾不同组织应答低氧胁迫分子过程中均具有促凋亡作用。本研究可为探明日本沼虾不耐低氧的分子机制提供理论参考。
- 赵倩倩孙西超郑诚薛程孙盛明
- 关键词：日本沼虾BAX细胞凋亡低氧原核表达
- 快速检测TTX的磁性免疫层析方法及检测试纸条的制备
- 本发明涉及一种快速检测TTX的磁性免疫层析方法及检测试纸条的制备，属于河豚毒素检测技术领域。将样品垫、经抗TTX特异性鼠系单克隆抗体修饰的磁珠标记的结合垫、预包被有TTX-BSA检测抗原的检测线T和山羊抗小鼠IgG的控制...
- 卢瑛郑诚刘源王锡昌
- 文献传递
- 快速检测TTX的磁性免疫层析方法及检测试纸条的制备
- 本发明涉及一种快速检测TTX的磁性免疫层析方法及检测试纸条的制备，属于河豚毒素检测技术领域。将样品垫、经抗TTX特异性鼠系单克隆抗体修饰的磁珠标记的结合垫、预包被有TTX-BSA检测抗原的检测线T和山羊抗小鼠IgG的控制...
- 卢瑛郑诚刘源王锡昌
- 文献传递
- 一种水产品中主要过敏原的快速免疫磁珠层析方法
- 一种水产品中主要过敏原的快速免疫磁珠层析方法，采用杂交瘤技术制备筛选的、既能与食用甲壳类水生生物和食用软体水生生物Tm过敏原有特异性反应的鼠系单克隆抗体，和能对鱼类的小清蛋白和青蛙、大鼠、海龟脊椎动物的Pa具有特异性反应...
- 卢瑛王锡昌郑诚石良
- 日本沼虾类固醇激素合成相关基因克隆及其低氧胁迫下表达分析
- 类固醇激素(又称甾体激素)是一类四环脂肪烃化合物。类固醇激素合成是将胆固醇作为前体,通过一系列类固醇合成酶的催化下完成的,在动物性别分化和性腺发育等多个方面起着举足轻重的作用。胆固醇需从细胞质基质转至线粒体内膜参与反应,...
- 郑诚
- 关键词：日本沼虾类固醇激素低氧胁迫细胞定位克隆
- 日本沼虾StAR基因克隆及其低氧胁迫下表达分析被引量：1
- 2024年
- 为了研究类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)在日本沼虾应答低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验应用c DNA末端快速扩增(RACE)PCR技术克隆了日本沼虾StAR全长cDNA序列,并利用在线软件对其序列特征进行生物信息学分析,采用半定量RT-PCR方法分析StAR在日本沼虾不同组织的分布情况,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与免疫印迹(Western blot)技术对其在不同低氧胁迫阶段中的表达规律进行检测,观察低氧胁迫下精巢组织中StAR蛋白免疫组化定位。结果显示,日本沼虾StAR其cDNA全长3 361 bp (NCBI登录号:MW263908),包括5′-UTR 323 bp,3′-UTR 2 129 bp,开放阅读框909 bp,编码302个氨基酸。氨基酸序列比对及系统进化分析结果显示,日本沼虾StAR基因与三疣梭子蟹等甲壳动物StAR聚类一支,具有最近的亲缘关系。半定量RT-PCR检测结果显示,StAR在日本沼虾不同组织中均有表达,其表达量在肝胰腺和心脏组织中最低,在精巢组织中表达处于较高水平。使用qRT-PCR技术检测日本沼虾精巢中StAR在低氧胁迫下时空表达情况,结果表明,与对照组相比,低氧处理组精巢中StAR基因表达量在1~48 h均显著上调,而在低氧处理组96 h显著降低。此外,本实验对StAR进行了原核表达及抗血清制备,采用Western blot检测StAR蛋白表达丰度基本与基因表达模式相似,免疫组化结果显示,StAR蛋白在精细胞与间质细胞中均有表达。综上所述,长期低氧胁迫显著降低了StAR基因的转录表达水平,并且该基因可能在类固醇合成路径及精子发生过程中均发挥重要作用。本研究结果为进一步解析日本沼虾类固醇激素合成分子机制奠定基础。
- 郑诚薛程赵倩倩孙盛明
- 关键词：日本沼虾STAR克隆低氧
