目的探究枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)调控核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)通路对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌细胞铁死亡的影响。方法设置对照组、模型组及LBP低、中、高剂量(25、50、100 mg/L)组和LBP(100mg/L)+Nrf2抑制剂ML385(5μmol/L)组。构建H9c2细胞H/R模型,并给予相应药物处理。采用CCK-8检测细胞活力;采用TUNEL染色检测细胞凋亡;采用试剂盒检测细胞Fe^(2+)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性;采用二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)荧光探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用透射电镜观察细胞线粒体形态;采用Western blotting检测转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,Tf R1)、二价金属离子转运蛋白1(divalent metal transporter 1,DMT1)、铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)、Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch like ECH associated protein1,Keap1)、Nrf2、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、GPX4蛋白表达。结果与对照组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.001),Fe^(2+)、MDA、ROS水平和LDH活性显著升高(P<0.001),GSH水平和SOD、CAT活性显著降低(P<0.001),线粒体缩短、膜密度增高且嵴数量减少,TfR1、Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平显著降低(P<0.001),DMT1、FTH1、ACSL4、Keap1蛋白表达水平显著升高(P<0.001)。与模型组比较,LBP组细胞活力显著升高(P<0.01),Fe^(2+)、MDA、ROS水平和LDH活性显著降低(P<0.05、0.01、0.001),GSH水平和SOD、CAT活性显著升高(P<0.05、0.01、0.001),线粒体形态较为规则,TfR1、Nrf2、
