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张菲: 作品数：68 被引量：185H指数：7; 供职机构：中国人民解放军更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学建筑科学更多>>

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我国野生动物狂犬病流行与病毒特征: 自2008年至2012年，本实验室采集来自浙江和江西等鼬獾狂犬病报道较多地区的鼬獾脑组织1650份，分离获得狂犬病病毒38株。对全部毒株的糖蛋白和核蛋白基因及部分毒株的全基因组进行了序列测定及系统发生分析，并对主要结构蛋...; 张守峰赵敬慧刘晔陈奇张菲扈荣良; 关键词：狂犬病流行病学病毒感染野生动物; 文献传递

一株鼬獾狂犬病病毒的全基因组及主要结构蛋白序列分析: 对2008年10月分离自江西景德镇地区的鼬獾狂犬病分离株JX08-45进行了全基因组和编码蛋白序列的测定和分析。结果显示,JX08-45分离株基因组全长11922nt,其3'端和5'端分别存在58nt的Leader和70...; 张守峰刘晔赵敬慧张菲王颖张锦霞扈荣良; 关键词：狂犬病病毒全基因组; 文献传递

一种狂犬病病毒中和抗体细胞凝集试验检测方法: 本发明提供一种狂犬病病毒中和抗体细胞凝集试验检测方法，即以表达狂犬病病毒糖蛋白的细胞作为抗原和载体颗粒，通过与人、犬和猫的血清抗体进行凝集反应，可判定血清中所含狂犬病病毒中和抗体是否达到免疫保护水平；解决了传统测定狂犬病...; 扈荣良刘晔张守峰张菲; 文献传递

我国部分地区动物狂犬病免疫覆盖率连续调查及分析: 采用荧光抗体病毒中和试验(FAVN)对我国从南到北一些代表性城市或地区犬狂犬病的免疫覆盖率进行了连续3年以上的调查，结果显示，本研究所调查的发达城市犬狂犬病免疫覆盖率在逐年提高，基本达到了70％的有效覆盖率;较发达城市或...; 张菲张守峰刘晔查云峰孙彦伟文武金邓文煌周艳君扈荣良; 关键词：狂犬病免疫覆盖率

广东省猪圆环病毒2型基因的克隆与序列分析被引量：3: 2016年; 根据Gen Bank已发表的猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）全基因组序列,设计1对特异性引物,对广东省不同地区规模化猪场采集的临床诊断为断奶仔猪多系统消耗综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS）的组织病料进行了PCV2基因克隆和序列分析。结果表明,采集的PMWS病料均可扩增出PCV2完整基因序列,与Gen Bank已发表的PCV2参考毒株序列核苷酸同源性达93.7%-99.8%,亲缘关系密切。其中10个PCV2基因全长1767 bp,属于PCV2b亚型,1个PCV2基因全长1768 bp,属于PCV2a亚型。; 严妍宫婷张守峰赵敬慧刘晔王颖张菲张锦霞扈荣良; 关键词：猪圆环病毒2型基因分析流行毒株

牛乳铁蛋白肽转基因小鼠的构建被引量：1: 2013年; 目的:探讨牛乳铁蛋白肽在转基因鼠乳汁中的表达及其抑菌活性。方法:将实验室构建并保存的包含山羊β-酪蛋白基因启动子和牛乳铁蛋白肽基因的乳腺特异表达载体PI-bcp-LfcinB,用Xho I和Nru I双酶切,得到含有全部表达盒的显微注射DNA片段,采用常规显微注射技术获得转基因小鼠。并通过对泌乳期转基因雌鼠乳腺组织的RT-PCR检测,确定了牛乳铁蛋白肽在mRNA水平的表达,同时利用琼脂板扩散法检测了转基因鼠乳汁中表达产物的抑菌活性。结果:获得了牛乳铁蛋白肽转基因小鼠,且转基因小鼠乳汁中能够表达具有抑菌活性的牛乳铁蛋白肽。结论:通过转基因动物乳腺可以获得具有生物活性的牛乳铁蛋白肽,为进一步研究抗菌肽转基因牛、培育抗乳房炎奶牛新品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。; 张锦霞范志强刘晔张守峰杨洋王颖张菲扈荣良; 关键词：显微注射转基因鼠

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M基因重组腺病毒的构建及表达被引量：2: 2012年; 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组腺病毒活载体疫苗,本研究将PRRSV GP5和M基因串联表达盒定向克隆至穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA多克隆位点处,获得重组穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA-GP5-M,与骨架质粒pacAd5 9.2-100共转染293AD细胞,包装出含有GP5和M基因的重组腺病毒rAd5-GP5-M。应用PCR技术、间接免疫荧光、Western blot分析,结果表明,GP5和M基因已经被成功整合到了腺病毒基因组上,且GP5和M蛋白在293AD细胞上均得到了表达;滴度测定表明,该重组腺病毒rAd5v-GP5-M的TCID50为10-6.5/mL;连续传代试验表明该重组腺病毒可在细胞内稳定繁殖,有效地转录并表达GP5和M蛋白,具有较高的遗传稳定性。该研究为PRRSV重组腺病毒疫苗的研制打下了基础。; 高博马玲张念毛燕陈凤莲张守峰刘烨张菲扈荣良吴健敏; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因 M基因重组腺病毒

一种提高乳胶凝集试验狂犬病中和抗体检测灵敏度的方法: 本发明涉及一种提高乳胶凝集试验检测狂犬病中和抗体灵敏度性的方法。利用等量抗犬和人IgGFc片段单克隆抗体同时致敏聚苯乙烯微球，再与等体积的犬或人血清感作，然后与狂犬病病毒糖蛋白结合，用于检测犬和人血清中狂犬病病毒中和抗体...; 刘晔扈荣良张守峰张菲连海; 文献传递