吴晨炜
- 作品数:5 被引量:55H指数:2
- 供职机构:上海交通大学农业与生物学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 利用正交设计优化小苍兰ISSR-PCR反应体系被引量:42
- 2008年
- 通过L16(45)正交试验,研究了镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度这5个因素在4个水平上对ISSR-PCR的影响,建立了适合于小苍兰ISSR-PCR的反应体系。优化体系为:25μLPCR反应体系中含有1×Taq酶缓冲液(10 mmol.L-1KCl,8 mmol.L-1(NH4)2SO4,10 mmol.L-1Tris.HCl,pH9.0,0.05%NP-40),2 mmol.L-1MgCl2,0.06 U.μL-1Taq酶,0.4μmol.L-1引物,4.0 ng.μL-1模板DNA,dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.6 mmol.L-1。利用温度梯度PCR,确定了最适宜的退火温度为51.5℃。该优化体系的建立为下一步对小苍兰进行ISSR分子标记奠定了基础。
- 周凌瑜吴晨炜唐东芹宋会书刘群录
- 关键词:ISSR-PCR小苍兰正交设计
- 小苍兰DNA的提取及其ISSR分子标记
- 小苍兰(Freesia refracta Klatt),又名香雪兰、小菖兰、剪刀兰、素香兰、香鸯尾、洋晚香玉,是鸢尾科(Iridaceae)香雪兰属的多年生球根类草本植物,原产非洲南部好望角。小苍兰花色典雅丰富,花香清幽...
- 刘群录周凌瑜吴晨炜王秀丽
- 关键词:小苍兰分子标记ISSR
- 文献传递
- 转录因子CBF基因转化百子莲的研究初报
- 以野生型拟南芥基因组DNA为模板,通过PCR反应分别克隆了CBF1和CBF3的全长基因,然后将目的基因插入克隆载体pMD18-T中,并转入大肠杆菌DH5α菌株中保存。经测序检测后,两个目的基因分别被克隆到pcAMBIA ...
- 吴晨炜王秀丽刘群录
- 关键词:CBF1百子莲
- 文献传递
- 小苍兰种质遗传多样性的ISSR分析被引量:15
- 2009年
- 利用ISSR(Inter Simple Sequence Repeat)分子标记对12份小苍兰(Freesia refracta)种质进行了遗传多样性分析研究。从34条ISSR引物中筛选出了12条适宜的引物。这12条引物中每条引物可扩增出5~11条DNA片段,共扩增了96个条带,其中多态性片段62条,平均每条引物可产生5.2条多态性片段,多态性条带比率(PPB)为64.6%。经NTSYS-pc分析,12份小苍兰种质间的遗传距离(GD)的变化范围为0.123~0.907,平均为0.442。根据Nei’s相似系数建立了UPGMA聚类图,在相似系数为0.56时,可将紫色花系的小苍兰种质与其它种质分开,形成两个组。结果表明,ISSR分子标记可有效地分析小苍兰种质资源的遗传多样性和亲缘关系,为小苍兰的杂交育种和新品种保护提供理论基础。
- 吴晨炜周凌瑜王秀丽宋会书唐东芹刘群录
- 关键词:小苍兰ISSR
- 抗寒基因AtCBF的克隆及在百子莲与狗牙根中的遗传转化研究
- 本试验以野生型拟南芥基因组DNA为模板,通过PCR反应分别克隆了AtCBF1和AtCBF3的全长基因,然后分别将其插入克隆载体pMD18-T中,并分别转入大肠杆菌DH5α菌株中保存。经测序检测后,两个目的基因分别被插入到...
- 吴晨炜
- 关键词:百子莲狗牙根抗寒基因基因克隆
- 文献传递