刘东 作品数:44 被引量:18 H指数:2 供职机构: 南通大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 南通大学自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 电子电信 文化科学 更多>>
在职医学研究生分子生物学创新教学改革初探 2016年 为提高医学在职研究生分子生物学教学质量,掌握基本的分子生物学理论同时培养创新科研思维,对分子生物学教学进行了一些改革和探索。文章围绕创新教学法在教学中的实施,在职研究生分子生物学教学效果的信息反馈分析,和对新型教学策略的实践效果等方面进行阐述。目的是解决如何培训学生思考问题、分析问题、解决问题的能力;促进医学在职研究生创新的思维能力。 刘东 张洁关键词:分子生物学 在职研究生 一种特异性用于治疗眼睛血管新生药物的制备方法 本发明提供了一种特异性用于治疗眼睛血管新生药物的制备方法,包括以下步骤:(1)将1eq的舒尼替尼和1eq的大黄酸加入到反应瓶中,加入100ml二氯甲烷溶解;(2)待上述反应体系降温至常温,依次加入1.1eq的1‑(3‑二... 盛佳婧 刘东 巩杰文献传递 一种用于检测静脉血栓的生物标志物及其应用 本发明公开了一种用于检测静脉血栓的生物标志物及其应用,属于分子标志物技术领域,所述生物标志物为ESM1,通过对标志物的监测可以实现静脉血栓栓塞的早期诊断和积极预防,与现有技术的诊断方法相比,本发明提供的标志物为血浆来源生... 陈昌盛 刘东 葛晓娟 梅海军生长激素促进斑马鱼尾鳍的再生 被引量:1 2019年 目的建立生长激素过表达的转基因斑马鱼,研究生长激素在斑马鱼尾鳍再生过程中的作用。方法利用Gateway技术构建表达质粒"pDestTol2CG2; ubi:GH-polyA",在一细胞期显微注射表达质粒和转座酶mRNA后,通过荧光显微镜和qPCR技术筛选鉴定GH过表达的转基因斑马鱼。将斑马鱼分为对照组(野生型)和生长激素过表达组,尾鳍横切后,记录分析斑马鱼尾鳍再生过程。结果转基因斑马鱼中心脏被绿色荧光蛋白标记。荧光定量PCR检测结果显示GH表达水平显著高于对照组(P<0.05)。斑马鱼尾鳍横断后,生长激素过表达组的再生速度显著提高(P<0.05)。结论建立稳定生长激素过表达的转基因斑马鱼品系,过表达生长激素能够提高斑马鱼尾鳍再生速度。 刘雪静 王雪雯 石运伟 王新 高煜 刘东关键词:生长激素 一种荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元的方法 本发明提供一种荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元的方法,涉及转基因技术领域,其中荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元系统的建立方法,包含以下步骤:利用供体质粒p5E‑mnx1、pME‑EGFP‑α‑Tubuli... 巩杰 刘东 钱佩佩 黄自刚 王新Clec14a基因调控斑马鱼胚胎血管发育 被引量:1 2018年 目的:探索Clec14a在斑马鱼胚胎期的表达及其在血管发育过程中的功能,探讨该基因调控血管发育机制。方法:通过胚胎整体原位杂交技术,观察Clec14a基因在斑马鱼胚胎期的表达情况;在转基因斑马鱼系Tg(kdrl:mCherry)和Tg(fli1a:nGFP)中,显微注射吗啉修饰的反义寡核苷酸(morpholinoantisense oligos)下调Clec14a基因表达,同时在转基因斑马鱼系Tg(kdrl:mCherry)中注射Clec14a-mRNA调控Clec14a基因表达,利用激光共聚焦显微镜观察分析斑马鱼节间血管(intersegment vessel,ISV)表型,统计分析内皮细胞迁移速度和数目的变化,并应用qRT-PCR技术检测下调后该基因mRNA表达情况。结果:在受精后24 h、48 h和72 h,Clec14a基因在斑马鱼脑、心脏、血管系统中有表达;Clec14a基因表达下调导致ISV发育缺陷,内皮细胞数目减少,抑制其迁移速度。结论:下调Clec14a基因表达能够通过抑制内皮细胞增殖和内皮细胞迁移调控斑马鱼胚胎血管发育。 杨晋娴 王新 刘东 张海骏 邵义祥关键词:血管发育 原位杂交 斑马鱼 microRNA-10a/b通过抑制Mib1调节斑马鱼神经元的发育 被引量:1 2017年 该文研究了microRNA-10(miR-10)家族miR-10a/b在斑马鱼胚胎发育时期神经管的表达及其对神经元发育的影响。通过斑马鱼胚胎整体原位杂交及Taq Man PCR技术分析研究miR-10a/b在斑马鱼胚胎期神经管的表达情况。利用吗啡啉(morpholino,Mo)修饰的反义寡核苷酸敲低技术建立miR-10a/b下调的斑马鱼模型,研究miR-10a/b下调后神经元发育异常的表型,并分析鉴定miR-10调控神经元发育的下游靶点。结果发现,受精后24 h(24 hours post fertilization,24 hpf)和48 hpf,miR-10a和miR-10b在斑马鱼神经管中高表达;miR-10a/b-Mo下调miR-10a/b的表达后,背神经管中神经元数量明显变少;下调Mib1(mindbomb E3 ubiquitin protein ligase 1)能挽救miR-10下调引起的神经元表型异常;miR-10a/b下调后胚胎神经管中Mib1表达显著上调。上述结果表明,miR-10a/b通过抑制Mib1的表达来影响斑马鱼神经元的发育。 吕峰 石运伟 王新 刘东 严兴洪关键词:MIR-10B 神经元 发育 斑马鱼 一种斑马鱼难治性癫痫模型的构建方法及应用 本发明公开了一种斑马鱼难治性癫痫模型的构建方法,将第282位脯氨酸密码子突变为丝氨酸的突变人GABRG2基因转入斑马鱼使其成为具有难治性癫痫表型的斑马鱼系。本发明为斑马鱼难治性癫痫模型的建立提供了有效的方法依据,同时也为... 张琦 刘东 沈丁玎 仇嘉颖 王新文献传递 自噬对斑马鱼尾鳍再生的影响 2019年 目的:利用模式动物斑马鱼研究自噬对其尾鳍再生的影响。方法:选取成年斑马鱼剪去尾鳍,随后腹腔注射自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)或诱导剂STF-62247,连续注射2天,剪取再生尾鳍,通过qPCR分析自噬相关基因ATG和Beclin-1的表达。斑马鱼剪去尾鳍,连续7天腹腔注射3-MA或STF-62247,每天记录斑马鱼尾鳍再生长度。结果:尾鳍再生过程中,3-MA下调ATG和Beclin-1表达,STF-62247提高ATG表达,抑制自噬或诱导自噬对斑马鱼尾鳍再生速度无显著影响。结论:腹腔注射自噬抑制剂3-MA或自噬诱导剂STF-62247对斑马鱼尾鳍再生速度无显著影响。 陈家宁 王晓宁 郏科人 申屠瑜婷 段旭初 石运伟 刘东 胡松群关键词:自噬 斑马鱼 斑马鱼遗传操作进展 被引量:2 2017年 斑马鱼已经成为在发育生物学与疾病模型研究中应用最广泛的实验动物之一,其中多种遗传操作方法和高分辨率活体成像技术对斑马鱼的应用起了重要推动作用。斑马鱼在功能基因组学研究上有许多优势,如可以快速便捷地鉴定脊椎动物新基因的功能。本文尝试以示意图来简要总结应用于斑马鱼的遗传操作方法和基本原理,包括ENU化学诱变筛选的基本原理和隐性突变3代筛选的流程,逆转录病毒介导的插入突变的原理及其隐性突变3代筛选的流程,转座子Sleeping Beauty(SB)和Tol2介导的基因捕获载体系统(Gene-breaking transposon,GBT)为基础的基因捕获突变的基本原理,Morpholino介导的基因下调和micro RNA下调技术,TILLING(Targeting induced local lesions in genomes)技术和CEL1分析的基本原理和实验流程,锌指核酸酶ZFN(Zinc finger nuclease)与TALEN(Transcription activator-like effector nuclease)、CRISPR/Cas9定向基因失活的基本原理,斑马鱼上广泛采用的转基因技术的几种类型等。 高煜 刘家辉 王新 刘东关键词:斑马鱼 突变 转基因 转座子