丁红雷 作品数:90 被引量:216 H指数:9 供职机构: 西南大学 更多>> 发文基金: 中央高校基本科研业务费专项资金 国家自然科学基金 军队杰出人才基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
重庆市大型科学仪器资源共享立法与制度建设 被引量:6 2011年 根据重庆市大型科学仪器资源共享工作的前期推进情况,指出大型科学仪器资源共享立法建设的必要性。并建议首先从大型科学仪器资源共享和新购大型科学仪器设备联合评议两个方面着手立法,以此带动整个科技资源共享相关立法工作的展开;同时,通过一系列制度建设来共同保证共享工作的顺利进行。 丁红雷 王润 勾鑫晔关键词:大型科学仪器 资源共享 肠出血性大肠杆菌O157的实验室分离与鉴定方法 被引量:9 2007年 大肠杆菌O157是一种重要的食源性病原菌。对该菌进行分离鉴定,继而进行进一步分子水平的深入研究具有重要意义。本文就该菌的目前常用的实验室分离鉴定方法,如平板分离、免疫磁珠分离、聚合酶链式反应等进行了综述,并对各种分离鉴定的方法进行了比较。 丁红雷 毛旭虎 王豪举 邹全明关键词:大肠杆菌O157 选择性培养基 猪呼吸系统病原菌五重PCR检测方法的建立与应用 2025年 旨在建立一种快速检测巴氏杆菌(Pasteurella multocida)、猪链球菌(Streptococcus suis)、猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)、胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae)、副猪格拉菌(Glaesserella parasuis)的五重PCR检测方法。根据GenBank数据库公布的巴氏杆菌plpE基因、猪链球菌gdh基因、猪肺炎支原体mhp677基因、胸膜肺炎放线杆菌apxⅣ基因及副猪格拉菌vanY基因序列,设计5对特异性引物,通过对扩增条件优化及特异性、灵敏性检验,建立了可同时检测以上5种病原菌的五重PCR检测方法,并对224份有病变的肺组织样品进行了检测。建立的五重PCR检测方法具有良好的特异性和一定的灵敏性,可同时扩增出大小为1 001 bp(plpE)、689 bp(gdh)、526 bp(mhp677)、417 bp(apxⅣ)和302 bp(vanY)的特异性片段。利用建立的五重PCR检测方法对猪的其他病原进行扩增均呈阴性。该方法对巴氏杆菌、猪链球菌、猪肺炎支原体、胸膜肺炎放线杆菌、副猪格拉菌的最低检出限分别为3.72×10^(5)、4.18×10^(5)、1.01×10^(6)、3.92×10^(6)μL、3.98×10^(6) copies/μL。在224份临床肺组织样品中,有65份检测到至少一种病原菌(29.0%),包括单一感染样品50份(22.3%)和混合感染样品15份(6.7%)。上述结果表明,本研究建立的五重PCR检测方法可用于临床肺组织样品中5种病原菌的检测。 梁娟 淦雨洁 丁红雷关键词:巴氏杆菌 猪链球菌 猪肺炎支原体 胸膜肺炎放线杆菌 肺组织 猪肺炎支原体Mhp367蛋白不同区段与恢复期血清反应能力的比较 2022年 【背景】课题组前期研究发现猪肺炎支原体Mhp367蛋白是体液免疫显性蛋白,但该蛋白不同区段与猪肺炎支原体恢复期血清的反应能力尚不明确。【目的】鉴定Mhp367蛋白不同区段与猪肺炎支原体恢复期血清的反应能力。【方法】利用不同的引物组合扩增mhp367基因片段,扩增的片段连接pGEX-6P-1、pGEX-4T-3或pGEX-5X-3载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。提取的质粒经Bam H I和Xho I双酶切及测序确定重组质粒是否构建成功。正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞构建重组菌。重组菌经IPTG诱导和超声破菌后,经与谷胱甘肽beads结合和SDS-PAGE电泳检测目的蛋白表达情况。表达目的蛋白的重组菌破菌后上清包被谷胱甘肽板,ELISA方法鉴定Mhp367蛋白不同区段与猪肺炎支原体恢复期血清的反应能力。【结果】构建了9个能以可溶形式表达目的蛋白的重组菌;9个Mhp367蛋白片段均为体液免疫显性,第394-524位氨基酸区段与猪肺炎支原体恢复期血清反应最强,是一个良好的疫苗候选抗原区段。【结论】本研究为猪肺炎支原体基因工程亚单位疫苗的研发提供了候选抗原靶标。 杨梅 董青霜 冯林 黄佐兴 吴彦 丁红雷关键词:猪肺炎支原体 ELISA 猪肺炎支原体Mhp107蛋白的分段原核表达与纯化 引言猪支原体肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS)是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)引起的常见疾病,在我国和发达国家广泛分布。目前主要由疫苗... 付启欢 游凤 丁红雷关键词:猪肺炎支原体 文献传递 肠出血性大肠杆菌O157:H7溶血素保护性片段(HlyAN436)克隆、表达、初步纯化与生物学活性研究 被引量:2 2007年 目的获取重组表达肠出血性大肠杆菌O157的溶血素(Ehx)保护性片段,并研究其基本的生物学及免疫学特性。方法PCR法从EHECO157-SMR2菌株克隆O157:H7的HlyA亚单位的N端片段(436个氨基酸),T-A克隆后构建表达载体pET-28a(+)-HlyAN436,测序鉴定后转化到E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,初步纯化后免疫动物。结果Hly-AN436成功地在大肠杆菌表达系统表达,动物实验证实其具有良好的免疫原性和反应性以及一定的免疫保护性。结论Hly-AN436蛋白有可能用于肠出血性大肠杆菌O157基因工程疫苗的研究。 程建平 邹全明 易勇 毛旭虎 马颖 王庆旭 丁红雷关键词:肠出血性大肠杆菌 溶血素 免疫保护 肉鸡非典型新城疫与大肠杆菌混合感染的诊治 被引量:1 2008年 新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一类禽类高致病性传染病,其传统疫苗对流行毒株有一定保护力。但近年来在生产中几乎所有的商品鸡均多次使用ND疫苗,非典型性新城疫仍不断发生;更重要的是.近几年来非典型新城疫与大肠杆菌的混合感染在养鸡场中广泛发生,使用抗菌药后,用药期临床症状虽有所减轻.但伴发零星死亡, 郑文贵 卢赛红 黄佐兴 丁红雷 罗文毅 刘英华关键词:鸡非典型新城疫 大肠杆菌 非典型性新城疫 诊治 ND疫苗 重庆市畜禽源沙门氏菌耐药性分析及PMQR基因检测 引言沙门氏菌(Salmonella)是一种重要的人畜共患病病原菌,目前已经报道了2600多种血清型[1],其非宿主适应性血清型能引起人和多种动物发病。畜禽因感染沙门氏菌给养殖业带来巨大的经济损失,同时还可以通过食物链将病... 王旭东 牟豪 周冰倩 杨梅 丁红雷产志贺毒素大肠杆菌stx2a和stx2b的血清和牛奶抗体检测 被引量:3 2008年 于新桥医院采集健康人群血清535份,两个屠宰场采集商品猪血清415份,5家奶牛场和1家奶站采集新鲜牛奶326份,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清(牛奶)中的stx2a和stx2b抗体.用P/N>2.1作为阳性判定标准,535份健康人群血清检测到stx2a抗体阳性和stx2b抗体阳性血清各21份(3.93%);415份商品猪血清检测到stx2a抗体阳性血清4份(0.96%),stx2b抗体阳性血清2份(0.48%);326份新鲜牛奶检测到stx2a抗体阳性血清25份(7.46%),stx2b抗体阳性血清21份(6.44%).牛奶中stx2抗体阳性率最高,健康人群血清次之,商品猪血清的阳性率最低.由此表明重庆市STEC菌株中携带stx2基因. 丁红雷 王豪举 毛旭虎 朱凤才 邹全明 石云 周维英关键词:产志贺毒素大肠杆菌 ELISA 猪肺炎支原体诊断技术研究进展 引言 猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害养猪业的慢性呼吸道疾病。目前该病在世界各地分布广泛,猪群中存在慢性或隐性感染,长期带菌,进而传染给易感猪群,一旦侵入猪群就很难彻底清除。猪肺炎支原体诊断技术对该病的防控... 徐作波 周瑶琴 丁红雷