黄彦 作品数:21 被引量:68 H指数:4 供职机构: 南京农业大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省杰出青年基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 生物学 环境科学与工程 化学工程 轻工技术与工程 更多>>
植物乳杆菌G63电转化方法的优化 被引量:6 2016年 为获得植物乳杆菌G63高效的电转化方法,本研究从细胞生长状态、细胞弱化剂质量浓度、洗涤液、质粒添加量和电击参数等方面对菌株G63的电转化效率进行优化。结果表明:取菌株G63对数生长中期的细胞制备感受态,以1 g/100 m L甘氨酸作为细胞弱化剂,分别用1 mmol/L Mg Cl2和30 g/100 m L聚乙二醇1000洗涤细胞,并用30 g/100 m L聚乙二醇1000作为电击液,加入20μg穿梭质粒,在1.5 k V和400Ω条件下进行电击,可以获得最高的电转化效率,转化效率达到1.18×103 CFU/μg DNA,满足后续遗传学实验要求。 范璟 席雪冬 黄彦 崔中利关键词:植物乳杆菌 电转化 Pseudomonas putida DLL-E4中非编码RNA ins1、ins2对菌株降解对硝基苯酚的调控作用的初步研究 硝基酚类化合物应用广泛,可作为原材料或中间体被应用于炸药、医药、杀虫剂、染料、木材防腐剂和橡胶等生产中。对硝基苯酚(PNP)是其中最重要的硝基酚类污染物,具有'三致'作用。PNP可通过多种方式进入到环境中,如化学工业中产... 涂辉 陈琼珍 叶现丰 黄彦 崔中利关键词:硝基苯酚 菌株降解 葡萄糖代谢 文献传递 硝磺草酮抗性菌株的筛选及抗性基因的克隆表达 被引量:3 2015年 【目的】从采集的土壤中筛选出硝磺草酮的抗性菌株,并从中克隆对羟苯基丙酮酸双加氧酶抗性基因。【方法】以酪氨酸为唯一碳源,采用富集培养法筛选分离硝磺草酮抗性菌株,利用16S r RNA基因序列分析对菌株进行初步鉴定。通过PCR扩增获得其HHPD基因序列,构建p ETH4表达载体并在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达。通过检测色素在440 nm处的吸收值分析菌株E.coli BL21(DE3)-p ETH4对硝磺草酮的抗性特性。【结果】在含10 mmol/L硝磺草酮和1 g/L酪氨酸的选择培养基上,分离得到7株硝磺草酮抗性细菌,1株为不动杆菌属,2株为无色杆菌属,4株为假单胞菌属。从抗性最佳的Pseudomonas sp.AM-H4中扩增得到HPPD的基因片段为1 056 bp,其序列与Acinetobacter baumannii基因组中HPPD的基因序列相似性达到99%,341位点由天冬氨酸突变为丙氨酸。HPPD基因在大肠杆菌中实现异源表达,蛋白分子量大小约40 k D。菌株E.coli BL21(DE3)-p ETH4在40μmol/L硝磺草酮酪氨酸LB培养基中的色素吸收值显著降低,能够耐受高于200μmol/L的硝磺草酮。【结论】克隆获得的HPPD具有良好的硝磺草酮抗性,将在新除草剂抗性作物选育中有一定的应用潜力。 黄彦 夏冰洁 崔中利关键词:抗性菌株 基因克隆与表达 非编码RNA对Pseudomonas putida DLL-E4菌降解对硝基苯酚的调控作用的初步研究 对硝基苯酚(PNP)是重要的硝基酚类污染物,具有"三致"作用.PNP可通过多种方式进入到环境中,如化学工业中产生的废水废气、有机磷农药使用过程中的水解、贮运生产过程中的意外事故而造成的泄漏等. 涂辉 陈琼珍 黄菲 黄彦 崔中利捕食性粘细菌抗植物真菌病害作用机制的研究 粘细菌是原核生物中基因组最为复杂的,具有复杂的发育和代谢过程。粘细菌的几个特点使得其在土传病原真菌控制中具有显著优势:(1)在固体表面运动,降低了微生物对土壤水分的要求,而土壤水分含量是生防微生物在土壤中运动的限制因素;... 崔中利 李周坤 叶现丰 黄彦关键词:粘细菌 抗真菌蛋白 糖苷水解酶 生防粘细菌 Corallococcus sp.strain EGB对大豆疫霉的拮抗机制研究 夏丞垚 李周坤 赵玉强 黄彦 崔中利麦芽六糖α-淀粉酶在淀粉抗老化领域的应用性研究 因为烘焙食品在烤制过程和储存的过程中质量会有所下降,淀粉老化一直被认为是烘焙行业所面临的紧迫问题之一。目前已经证明使用各种淀粉酶对淀粉进行处理改变淀粉的特性使其具有抗老化的特性,这对于实际应用是可行的。在该研究中,研究了... 张蕾 李周坤 乔燕 张亚娟 赵玉强 黄彦 崔中利黏细菌来源硫胺素酶Ⅰ的生理功能探究 2024年 为探究硫胺素酶Ⅰ在黏细菌中的生理功能,选取Corallococcus sp.EGB、Myxococcus xanthus DK1622和Cystobacter sp.1404三种不同种属的黏细菌,研究3种黏细菌基因组中硫胺素合成与菌株生长发育的关系。结果显示,3种黏细菌基因组中均具有完整的硫胺素合成途径,且具有硫胺素合成前体嘧啶(4-amino-5-hydroxymethyl-2-methylpyrimidine,HMP)回收相关基因,但未发现硫胺素或其前体噻唑回收相关基因;HMP合成酶基因thiC上游存在的焦磷酸硫胺素核糖开关(TPP-riboswitch)可根据环境中硫胺素浓度调控thiC基因的转录水平。菌株DK1622及其硫胺素酶Ⅰ敲除突变株CL1003中分别插入thiC基因,构建突变菌株CL1006和CL1007,发现CL1006在无硫胺素培养基中需要额外添加硫胺素或HMP才能恢复生长,但相比于硫胺素处理组,HMP处理组菌落直径显著增加了9.0%;CL1007只能在添加HMP平板中生长,单独添加完整的硫胺素并不能使其恢复生长,但当硫胺素酶CcThi1和硫胺素共同添加时,CL1007的生长得到恢复。结果表明,黏细菌不直接利用外源硫胺素,但可通过硫胺素酶Ⅰ将其分解成嘧啶前体被利用。 齐梦祎 夏丞垚 纪燕玲 黄彦 李周坤 叶现丰 崔中利关键词:黏细菌 硫胺素 粘细菌Corallococcus sp.strain EGB及其培养发酵液的安全性评估 被引量:4 2022年 【目的】研究粘细菌Corallococcus sp.strain EGB及其细胞培养发酵液的毒理安全性,为菌株EGB作为新型生防微生物菌剂的开发和环境施用安全性提供一定的科学基础。【方法】通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验测定粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液的遗传毒性;通过经口灌胃的方式测定粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液对ICR小鼠的急性毒性和28 d亚急性毒性。【结果】Ames试验、微核试验和精母细胞染色体畸变试验结果表明,与对照组相比,EGB菌体及其细胞培养发酵液无基因突变能力,对ICR小鼠无明显的遗传毒性。EGB菌体及其细胞培养发酵液对ICR小鼠的急性经口半致死剂量(LD50)>10 g/kg BW(body weight);连续灌胃28 d后,处理组ICR小鼠的体重变化、采食饮水、血液生化指标、血常规、主要脏器指数和主要器官病理切片与对照组相比无显著差异(P<0.05)。【结论】粘细菌EGB菌体及其细胞培养发酵液的毒理安全性属于无毒类别,粘细菌的生物安全性使其在工农业领域的植物病害控制和生物转化等方面具有潜在的应用价值。 乔燕 夏丞垚 李永凯 李周坤 叶现丰 罗雪 黄彦 曹慧 崔中利关键词:发酵液 安全评估 遗传毒理 施肥和季节演替对水稻根际土壤固氮微生物和根系内生固氮微生物多样性的影响 水稻是我国的重要粮食作物,对氮素营养需求量大,水田条件下由于各种环境条件导致氮素易流失。氮素的供给来源于两个方面,一是生物固氮,二是化学氮肥。研究表明一些固氮菌能定植在水稻植株体内,具有促进植物生长、提高作物产量、生物防... 罗雪 王文辉 黄彦 崔中利