郑敏
- 作品数：19 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自然科学总论更多>>
- 使ACC-α基因启动子PⅢ失活的物质及其应用
- 本发明公开了使ACC-α基因启动子PⅢ失活的物质在生产产低脂奶的奶牛中的应用。本发明首先保护一种蛋白组，由TALE蛋白甲-Ⅰ和TALE蛋白甲-Ⅱ组成；所述TALE蛋白甲-Ⅰ包括序列表的序列14自N末端第180-791位氨...
- 戴蕴平丁方荣王本利郑敏李松王海萍李京李玲王美丽
- 文献传递
- 一种定点整合外源基因的方法
- 本发明公开了一种定点整合外源基因的方法。本发明公开了一种定点整合外源基因到牛β‑酪蛋白基因的第二外显子的方法，包括如下步骤：使TALE蛋白‑Ⅰ和TALE蛋白‑Ⅱ在离体的牛细胞中表达，得到第二外显子靶序列发生突变的细胞；同...
- 戴蕴平王本利丁方荣李松王海萍郑敏李京李玲
- 文献传递
- 第一次减数分裂期小鼠卵母细胞的化学去核被引量：6
- 2004年
- 通过免疫荧光染色法确定了小鼠第一次减数分裂的进程 ,在此基础上分别用脱羧秋水仙碱和放线菌酮处理成熟培养的小鼠卵母细胞 ,抑制其纺锤体极间微管的延长和降低成熟促进因子的浓度 ,使其核物质随极体全部排出 .结果表明 :(1)卵母细胞从有腔卵泡中分离时处于生发泡期 ,可见核仁 ;成熟 2h内则全部发生生发泡破裂 ;培养 5h ,90 %到达第一次减数分裂的前中期 ;培养 8h ,则 33.3%处于中期 ;71.4 %的细胞在成熟 12h后发育为后期 ;第二次减数分裂的中期则于成熟培养 15h发生 .(2 )于成熟的不同时间取卵母细胞 卵丘细胞复合体进行去核处理后发现 ,体外成熟培养 5h(即卵母细胞处于第一次减数分裂前中期时进行处理 ) ,其去核率最高 ,达85 .6 % ;成熟 5h之前各组随成熟培养时间的延长而去核率升高 ,之后各组则降低 .(3)比较卵母细胞 卵丘细胞复合体与自然裸卵去核率 ,后者效率为 5 6 % ,显著低于前者 (p <0 .0 5 ) ,因此该方法在卵母细胞 卵丘细胞复合体的完全去核率与传统的物理去核方法相当 .
- 杜卫华李世杰李彦欣戴蕴平王莉莉王美丽郑敏李宁
- 关键词：卵丘细胞放线菌酮减数分裂有腔卵泡
- 应用奶牛乳腺生物反应器高效生产重组人乳铁蛋白和人乳清白蛋白
- 李宁戴蕴平汤波龚国春张磊连正兴王莉莉王海萍刘颖郑敏樊宝良赵志辉
- 动物乳腺生物反应器是一种利用体细胞克隆与转基因方法在动物乳腺中高效生产重组蛋白的技术，具有效率高，成本低，安全环保以及重组蛋白具有天然活性等优点，已成为生物制药的最新发展阶段，其商业前景十分巨大。据美国商业评估公司预测到...
- 关键词：
- 关键词：动物乳腺生物反应器生物制药体细胞克隆技术转基因动物技术
- 人α-乳清白蛋白转基因奶牛的生产和应用
- 李宁戴蕴平汤波张磊王建武王莉莉王海萍郑敏李荣龚国春丁方荣赵建敏连正兴李秋艳李京
- 2005年转基因鱼在美国上市和2006年世界第一例转基因动物生产的重组蛋白药物在欧洲获准销售，展现出转基因动物技术在培育动物新品种和生产重组蛋白上的巨大应用前景，据美国商业评估公司预测到2015年全球转基因动物产品每年销...
- 关键词：
- 关键词：人工授精
- 雷公藤制剂对雄性布氏田鼠的不育作用
- 本试验将雷公藤制剂应用于雄性布氏田鼠，以探讨其作为不育剂的应用前景。结果表明，雷公藤对更新率较快的组织和细胞表现出明显的毒性作用，因此对睾丸生精细胞、卵巢的卵泡细胞具有显著抑制其生成的作用；雷公藤制剂可以导致长爪沙鼠幼仔...
- 李季萌郑敏郭永旺海淑珍吴新平嵇莉莉
- 关键词：布氏田鼠化学防治雷公藤制剂雄性不育
- 低氧对牛体细胞体外增殖的影响被引量：1
- 2012年
- 本研究通过比较常氧(20%)和低氧(5%)环境下培养牛体细胞的生长效果,进而探讨低氧对牛体细胞体外增殖的影响。选用牛的3种常用核移植供体细胞(胎儿成纤维细胞、胎儿输卵管上皮细胞、卵丘颗粒细胞)分别在常氧和低氧2种培养环境下进行连续传代培养和细胞克隆培养,并对其倍增水平和细胞克隆形成效率作比较分析。结果显示,5%的低氧环境对这3种细胞的体外增殖均有促进效果,而且各细胞的增殖水平(50.61±2.47、16.35±0.43、43.38±0.84)均显著高于常氧组(27.42±0.23、12.14±0.83、32.76±1.53,P<0.01)。以500个·皿-1(直径100mm)的细胞浓度接种培养的情况下,低氧培养的胎儿输卵管上皮细胞的克隆形成效率((53.05±4.62)%)显著高于常氧组((36.68±5.68)%)(P<0.01),而低氧组胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞获得的细胞克隆数只是略多于常氧组,差异并不显著(P>0.05)。当以1个.孔-1的细胞浓度接种于96孔板培养时,低氧组各类细胞的单细胞克隆形成效率((21.60±2.37)%、(22.29±5.42)%、(27.92±3.69)%)显著高于常氧组((12.01±1.42)%、(7.92±2.86)%、(10.49±3.07)%)(P<0.01或P<0.05)。将体外培养条件的常氧含量(20%)调减至更接近体内生理状况的低氧含量(5%)可以延长牛体细胞增殖寿命和提高单细胞克隆形成效率,对细胞生长有很好的促进作用。
- 李松丁方荣王海萍王莉莉李京郑敏王美利王超戴蕴平朱士恩
- 关键词：低氧牛体细胞体外增殖
- 高效表达人乳铁蛋白等药用保健蛋白的奶牛乳腺生物反应器
- 李宁戴蕴平汤波龚国春张磊连正兴王莉莉王海萍刘颖孙秀柱樊宝良赵志辉郑敏李荣谢媛王美丽刘兆良赵春江于政权于舒洋许宏涛杨鹏华王建武赵永辉丁方荣李燕李京胡晓湘孟庆勇费菁朱化彬雷臣
- 动物乳腺生物反应器是一种利用动物转基因技术在乳腺细胞中特异高效表达多肽药物、疫苗、抗体和营养等蛋白的技术，具有效率高，成本低，表达的重组蛋白具有天然生物活性等特点，已经成为目前研究和应用最为广泛的一类生物反应器。人乳铁蛋...
- 关键词：
- 关键词：人乳铁蛋白
- “自我剪切”2A肽介导的Δ-12和ω-3脂肪酸脱氢酶以及过氧化氢酶在转基因小鼠肌肉表达研究
- 2012年
- 哺乳动物因为缺乏Δ-12和ω-3脂肪酸脱氢酶,不能自身合成必需的多不饱和脂肪酸.目前,通过转基因技术在哺乳动物体内表达ω-3脂肪酸脱氢酶,能将长链的n-6多不饱和脂肪酸转化成n-3多不饱和脂肪酸,造成体内长链的n-6多不饱和脂肪酸含量显著减低.本研究通过自我剪切2A肽介导Δ-12和ω-3脂肪酸脱氢酶(FAT-2和FAT-1)以及人过氧化氢酶(human catalase,hCAT)在小鼠的肌肉同时表达.结果表明,转基因小鼠肌肉中长链n-3多不饱和脂肪酸含量提高2.6倍,长链n-6多不饱和脂肪酸含量没有显著变化,而n-6/n-3比例显著降低(P<0.01).同时蛋白质印迹检测到人过氧化氢酶hCAT在小鼠的肌肉组织中表达,且过氧化氢酶活性比野生型小鼠显著提高(P<0.01).
- 方锐彭云乾郑敏孟庆勇
- 关键词：多不饱和脂肪酸过氧化氢酶
- 双标记选择载体转染牛胎儿成纤维细胞方法的建立被引量：1
- 2002年
- 以经SspI和BamHI对所构建的双标记选择载体质粒pCE-EGFP-IRES-Neo-dNdB双酶切后的线性目的DNA为外源基因,对电击介导的牛胎儿成纤维细胞基因转染方法的效率进行了优化.实验结果表明,当电场强度为1.2kV/cm、脉冲时间为1ms时可获得约50个阳性细胞克隆/10 5 个细胞的最佳转染效率.通过牛胎儿成纤维细胞对不同浓度G418抗性的敏感性实验确定800μg/mL G418为快速筛选浓度,以300μg/mL G418为维持筛选浓度.从两个牛胎儿成纤维细胞系中共分离了56个绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞克隆,从中选取2个冷冻保存.经PCR检测,证实2个冷冻克隆株均含有所转染的外源基因.
- 龚国春戴蕴平樊宝良赵春江王莉莉王海平郑敏李宁
- 关键词：牛胎儿成纤维细胞电击基因转染体细胞克隆转基因克隆
