赵乐 作品数:39 被引量:100 H指数:6 供职机构: 西安交通大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省自然科学基金 陕西省科学技术研究发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 农业科学 电子电信 更多>>
人正常肾组织全长cDNA文库的构建及鉴定 被引量:2 2004年 目的 构建人正常肾组织的cDNA文库并鉴定文库质量。方法 运用mRNA 5′末端的模板转换方法以powerscript逆转录酶进行转录 ,在mRNA的 5′末端添加一段 5′ oligo做为延伸后的模板 ,从而富集全长cDNAs。扩增后的cDNAs经sfiⅠ酶切、柱层析洗脱 ,重组于λTripIEx2 载体并包装后 ,测定滴度、重组率 ,扩增文库。随机挑取 8个噬菌斑行PCR反应扩增插入片段。结果 构建的cDNA文库滴度为 2 .6× 10 6pfu·mL-1,重组率 >95 % ,扩增后滴度达 9× 10 11pfu·mL-1。 8个插入片段长度为 0 .7~ 2 .0kb。结论 构建的人正常肾组织cDNA文库为高效全长的cDNA文库 ,符合cDNA文库的要求 ,可以用探针、抗体等做免疫学筛选 ,进一步探寻与肾脏疾病相关的基因。 成瑜 李旭 陈葳 赵乐 杨玉琮关键词:肾组织 CDNA文库 全长 荧光定量PCR检测UCA1 mRNA方法学建立及临床评估 被引量:6 2012年 目的建立荧光定量体外检测 UCA1 mRNA 的实验方法。方法用已构建的 pcDNA3.1/UCA1 重组质粒作为标准品,建立实时荧光定量 PCR 检测尿液、血液标本 UCA1 mRNA 的方法,并进行方法学评价。应用此方法检测 24 例膀胱癌组、30 例泌尿系统非膀胱癌组(包括肾癌、前列腺癌)以及 20例健康对照组的尿液和血液中 UCA1 mRNA 的表达,并进行临床评估。结果膀胱癌患者血、尿标本的阳性符合率分别为 91.67% 和 87.50%,而泌尿系统非膀胱癌患者血、尿标本的阳性符合率为 63.33% 和66.67%,10 份消化系统肿瘤(肝癌、胃癌、食管癌、直肠癌)患者全血标本、10 份肺癌患者的全血标本、20 份健康人标本全血和尿液标本均为阴性。膀胱癌组阳性率高于其它系统肿瘤和健康对照组(P<0.01)。在膀胱癌组中,UCA1 mRNA 的表达与临床分期和病理分级有显著的相关性(P<0.05)。结论本研究成功建立了可用生物体液(如血液、尿液等)检测 UCA1 mRNA 的技术。 李芳 李旭 王帆 赵乐 陈葳关键词:MRNA 荧光定量 肝癌组织中LIV-1基因mRNA的表达及意义 被引量:1 2019年 目的探讨锌转运体LIV-1基因mRNA在肝癌组织中的表达及意义。方法对TCGA数据库中肝癌数据集的LIV-1基因的表达进行分析,采用逆转录PCR方法检测23例肝癌患者癌组织及其癌旁组织的LIV-1基因的mRNA表达水平进行验证。利用Kaplan Meier Plotter数据(http://kmplot.com/analysis/)中的肝癌数据集进行在线生存分析。通过生物信息学方法分析LIV-1基因启动子区的甲基化水平。结果TCGA数据库分析结果显示LIV-1 mRNA在肝癌组织中的表达显著高于正常肝脏组织(P<0.01),组织样本验证了生物信息学分析结果。相对于LIV-1低表达的肝癌患者,高表达LIV-1的肝癌患者的预后差(P<0.001)。相对于正常肝组织,LIV-1基因启动子区在肝癌组织中呈低甲基化(P<0.01)。结论异常高表达的LIV-1基因可能参与了肝癌的进展,是一种预后不良的因素。LIV-1基因启动子区低甲基化可能导致了其异常高表达。 吴文婧 韩少山 陈葳 李旭 赵乐关键词:肝细胞癌 预后 甲基化 miR-30a/c与DNMT1之间的负反馈环路直接靶向snail调控卵巢癌顺铂耐药 韩曦 赵乐 王莉洁 芦娇娇 陈葳 李旭肿瘤细胞上皮-间质转化的诱导及逆转因素 肿瘤细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与肿瘤侵袭、转移、复发及耐药性密切相关。转录因子、生长因子、微环境等因素能诱导肿瘤细胞EMT的发生,而某些miRNA、天... 刘婷 赵乐 陈葳 李旭关键词:上皮-间质转化 逆转 一种核酸类药物递送系统及其制备方法 本发明公开了一种核酸类药物递送系统及其制备方法。本发明通过筛选脂质成分、比例,制备了一种可以包裹或负载核酸类药物的pH敏感的阳离子脂质体。本发明制备的阳离子脂质体粒径均匀、药物包封率高、体系稳定,提高了核酸类药物的靶向递... 李旭 甄帅 王翔 曹鹏 赵乐 芦娇娇 拓晓倩 张燕文献传递 中国裕固族mtDNA遗传多态性 被引量:5 2003年 本文作者对中国裕固族群体的mtDNA的遗传特点进行研究,旨在为法医鉴定提供基础数据. 刘新社 刘雅诚 严江伟 严江伟 高俊薇 张庆霞 赵乐关键词:裕固族 MTDNA 遗传多态性 法医鉴定 宫颈癌细胞系中EMT相关基因的表达及其意义 被引量:6 2017年 目的上皮-间质转化(EMT)是上皮来源的恶性肿瘤侵袭转移的重要机制之一,其特征为上皮细胞标志物表达下调(E-cadherin等)而间质细胞标志物(vimentin等)表达上调。本研究旨在探讨人宫颈癌细胞系EMT相关标志物的表达情况,以确定宫颈癌细胞是否发生EMT,并为确定相关的细胞研究模型奠定基础。方法采用逆转录PCR方法检测4株人宫颈癌细胞系(SiHa、HeLa、RJC-1、CS1213)中E-cadherin、vimentin、Snail和Slug mRNA的表达;Western blotting检测E-cadherin和vimentin的蛋白表达;免疫细胞化学方法检测Snail和Slug的蛋白表达。结果vimentin和Snail mRNA在4种细胞中均有表达,E-cadherin和Slug mRNA在SiHa、HeLa和RJC-1细胞表达。E-cadherin蛋白在SiHa和RJC-1细胞表达,vimentin蛋白在HeLa和CS1213细胞表达。Snail蛋白在4个细胞株都有表达,Slug蛋白在SiHa、HeLa和RJC-1细胞表达。结论 HeLa和CS1213表现出间质细胞表型,SiHa和RJC-1则表现为上皮细胞表型。 李晓锋 陈葳 李旭 赵乐关键词:宫颈癌 VIMENTIN SNAIL SLUG 人参皂苷20(S)-Rg3通过调控KRT18P55抑制卵巢癌细胞增殖和迁移 被引量:2 2023年 目的探讨人参皂苷20(S)-Rg3抑制卵巢癌细胞增殖和迁移的机制。方法在西安交通大学第一附属医院收集卵巢癌组织19例,正常卵巢组织18例,采用real-time PCR检测lncRNA KRT18P55的表达。将卵巢癌细胞SKOV3和3AO分别分为2组:阴性对照组和20(S)-Rg3组,通过real-time PCR检测KRT18P55的表达水平,CCK-8和平板克隆实验检测SKOV3和3AO细胞增殖能力,Transwell小室法检测SKOV3和3AO细胞迁移能力。将KRT18P55 siRNA分别转染SKOV3和3AO细胞,通过real-time PCR检测KRT18P55的表达水平,CCK-8和平板克隆实验检测SKOV3和3AO细胞增殖能力,Transwell小室法检测SKOV3和3AO细胞迁移能力。癌症基因组学门户网站(cBioPortal for Cancer Genomics,cBioPortal)提取KRT18P55共表达基因数据;基因功能分析数据库(Gene Annotation and Analysis Resource,Metascape)对KRT18P55及其显著相关基因进行功能富集分析;基因表达谱交互式分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)、阿拉巴马大学癌症数据分析门户(University of Alabama at Birmingham Cancer Data Analysis Portal,UALCAN)在线数据库对筛选的KRT18P55显著相关基因进行表达分析。结果人卵巢癌组织中的KRT18P55表达水平显著高于正常卵巢组织,经20(S)-Rg3处理的卵巢癌细胞SKOV3和3AO的增殖和迁移能力均下降,KRT18P55的表达水平显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。敲低KRT18P55后,卵巢癌细胞的增殖和迁移能力下降(P<0.05)。基因本体(Gene Ontology,GO)功能富集分析显示,KRT18P55可能参与中间丝细胞骨架组成、外源性凋亡信号通路等。GEPIA及UALCAN数据库的表达分析显示,KRT18P55相关性最强的两个基因KRT18、KRT8的mRNA及蛋白水平在卵巢癌中均较正常对照显著增高(P<0.05)。结论人参皂苷20(S)-Rg3可能通过降低KRT18P55的表达水平抑制卵巢癌细胞的增殖与迁移,进而抑制卵巢癌的进展。 芦娇娇 周园园 赵乐 李旭关键词:卵巢癌 细胞增殖 细胞迁移 基于网络药理学鉴定人参皂苷Rg3抗卵巢癌的分子靶点研究 被引量:2 2022年 目的 通过网络药理学寻找人参皂苷Rg3抑制卵巢癌的可能靶点,探索人参皂苷Rg3抑制卵巢癌的药理机制。方法 利用比较毒理基因组学数据库(CTD)收集人参皂苷Rg3的作用靶点,利用药物靶标数据库(TTD)和基因卡(GeneCards)数据库收集卵巢癌异常表达分子,通过交集分析获得人参皂苷Rg3作用于卵巢癌的可能靶点;对所选靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建、基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,选取富集度最高的靶点进行实验,验证人参皂苷Rg3对该靶点表达水平的影响。结果 在CTD数据库中获得人参皂苷Rg3的潜在作用靶点65个,在GeneCards数据库和TTD数据库中搜索到卵巢癌的潜在疾病作用靶点8 412个,共获得4个人参皂苷Rg3与卵巢癌的交集靶点,包括表皮生长因子受体(EGFR)、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP1)、含杆状病毒IAP重复序列蛋白5(BIRC5)和凸素1(PROM1)。GO富集分析得到P<0.05的条目共计433个,包括生物过程(BP)条目357个、细胞组成(CC)条目33个、分子功能(MF)条目43个。KEGG信号通路富集分析得到P<0.05的通路共计23条,均与肿瘤发生发展密切相关。蛋白免疫印迹检测结果显示人参皂苷Rg3可显著降低卵巢癌细胞系(3AO、A2780和SKOV3)的EGFR蛋白水平。结论 人参皂苷Rg3可能通过EGFR相关信号通路来抑制卵巢癌的进展。 崔熙 张小玲 李旭 赵静 赵乐关键词:卵巢癌 人参皂苷RG3 网络药理学 表皮生长因子受体