根据Gen Bank中猪圆环病毒2型ORF2基因序列设计特异性引物,PCR扩增获得猪圆环病毒2型ORF2基因片段,并克隆到p MD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化,建立了猪圆环病毒2型的SYBR Green I荧光定量PCR诊断方法。扩增产物的溶解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对PRV、PPV、E.coli、CSFV、PRRSV均无阳性信号,可重复性好,测灵敏度可达4.0×101拷贝/μL。结果表明,建立的猪圆环病毒2型SYBR Green I实时荧光定量PCR具有特异、灵敏、快速、重复性好,适合于猪圆环病毒2型临床样品的检测。
猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是猪的主要疫病之一，可引发妊娠母猪晚期流产、早产和产死胎，以及仔猪与育肥猪的呼吸道疾病。1987年该病首先发现于美国，随后暴发和流行于北美和欧洲各养猪国家，并相继蔓延到亚洲及其他地区，给养猪业造成了巨大的经济损失。1996年郭宝清等首先报道我国暴发该病并分离到毒株CH—1a。刘飞等研究贵州省PRRS分离株的遗传变异，表明其可能出现了新的变异走向。为了解贵州省猪PRRS的隐性感染率和使用疫苗后血清抗体状况，我们对贵州省规模化养猪场和农村散养户共862头份猪血清样本分别进行了PRRS抗体水平检测，并系统分析在我省猪群中的感染及流行情况，为制定PRRS的综合防控措施提供科学依据。
