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模拟mIL-18天然生成真核表达体系的构建及生物活性初探被引量：3: 2003年; 目的　构建模拟小鼠IL 18(mIL 18)天然生成真核表达体系 ,并探讨其与人IL 2 (hIL 2 )真核表达载体pVR10 12 hIL 2 (phIL 2 )体内外共转染对细胞免疫功能的影响。方法　分别构建小鼠IL 18前体 (mproIL 18)和小鼠IL 1β转换酶 (mICE)的真核表达载体pVR10 12 mproIL 18(pmproIL 18)和pEGFP N1 mICE(pmICE)。两者单独或共转染COS 7细胞 ,分别在mRNA和蛋白水平检测IL 18的表达 ;将pmproIL 18、pmICE和phIL 2 3种真核表达载体分别通过体内、外共转染 ,初步检测其生物学活性。结果　pmproIL 18及pmICE构建正确 ,分别转染COS 7细胞后能检测到相应mRNA表达。在pm proIL 18单独或pmproIL 18/pmICE共转染的COS 7细胞中能检测到前体和成熟 2种不同形式的mIL 18蛋白表达 ,并且mIL 18能分泌到上清 ;所分泌的mIL 18与hIL 2体外联合作用可增强小鼠脾细胞增殖能力。pmproIL 18、pmICE和phIL 2 3种真核表达载体联合肌肉注射的小鼠脾细胞体外杀伤同基因型肿瘤细胞的能力显著提高。结论　构建的模拟mIL 18天然生成的真核表达体系 (pmproIL 18/pmICE)与phIL 2共转染有可能用于肿瘤的基因治疗。; 李蕾王润田王兆源杨永杰葛锡锐王蕙芬; 关键词：IL-18 生物活性基因克隆

免疫磁珠纯化γδT淋巴细胞的方法被引量：3: 1999年; γδＴ淋巴细胞在人外周血单个核细胞中的含量不超过１０％，而研究γδＴ淋巴细胞的功能需要大量的γδＴ淋巴细胞。为此，采用磁珠（ｍａｇｎｅｔｉｃｍｉｃｒｏｂｅａｄｓ）阳性选择（ｐｏｓｉｔｉｖｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）法分离和纯化γδＴ淋巴细胞，纯化可达９９％左右；同时对富集的γδＴ淋巴细胞在体外的增殖和细胞毒效应进行观察，此法快速、有效、纯度高，对γδＴ淋巴细胞功能影响较小。为γδＴ淋巴细胞的研究和应用提供了便利。; 王兆源陈松华刘伟葛锡锐; 关键词：ΓΔT淋巴细胞磁珠细胞毒效应

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王兆源