李振兴
- 作品数：4 被引量：10H指数：1
- 供职机构：庆安县农业技术推广中心更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
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- 一种优化的大白菜线粒体DNA提取方法被引量：10
- 2011年
- 介绍了一种快速、大量提取大白菜线粒体DNA的方法。以大白菜黄化苗为试验材料,通过加入一定量的DNaseⅠ和RNase A酶,充分消除核基因组DNA和RNA的污染。通过加入蛋白酶K和SDS,并经2步变温处理,即先在50℃条件下温育1 h,接着在37℃条件下温育1 h,有效地提高了mtDNA产出率。经凝胶电泳和PCR等检测,结果表明:mtDNA电泳条带清晰,OD260与OD280比值为1.8左右,纯度较高;利用细胞核看家基因Actin设计引物,扩增mtDNA,没有获得扩增产物,表明mtDNA中没有核基因组污染;利用大白菜CMS96胞质不育系基因orf222设计引物,扩增不育系和保持系mtDNA,仅在不育系中扩增出670 bp的片段;利用5个随机引物进行RAPD分析,在保持系和不育系中可扩增出许多产物,且呈现出丰富的多态性,充分表明提取的mtDNA可以满足后续的分子生物学试验。该方法的创新之处在于,通过2步变温处理的方法充分裂解线粒体膜,释放大量mtDNA,有效地提高了mtDNA的产量。试验中获得的最高产出率为每克大白菜黄化苗获得18.83μg mtDNA。
- 李振兴张德双司龙亭于拴仓张凤兰余阳俊赵岫云汪维红
- 关键词：大白菜线粒体DNA变温处理细胞质雄性不育
- 大白菜CMS96细胞质不育系和保持系的RNA编辑研究
- 2013年
- RNA编辑具有重要的生物学意义,可导致基因功能缺陷或丧失,是造成不育的原因之一。以大白菜CMS96不育系和保持系为材料,研究了线粒体atp6和coxⅠ基因的RNA编辑现象。结果表明,在CMS96不育系中,atp6基因转录本保守区域内有14个位点发生了编辑,导致atp6基因的大多数氨基酸由疏水性变为亲水性,使线粒体atp6蛋白质的亲水性增强。不育系atp6基因中的第5位T→A和第11位G→U的编辑导致2个新的终止子密码子TAG和UGA的发生,产生了2个新的ORF;coxⅠ基因转录本保守区域内编辑位点有17个,导致coxⅠ基因的大多数氨基酸由亲水性变为疏水性,使线粒体coxⅠ蛋白质的疏水性增强。在CMS96不育系中,线粒体atp6和coxⅠ基因RNA编辑位点大多数发生于密码子的第1和第2位点,改变了氨基酸种类,少数发生于密码子的第3位点,没有改变氨基酸的种类,这与众多学者的结论一致。碱基的编辑方式除了C→U外,还出现了A→G、G→A、T→G、G→U、T→C、T→A和C→A这7种新的编辑方式。大白菜保持系的RNA编辑位点均比CMS96不育系的编辑位点少。
- 张德双李振兴于拴仓张凤兰余阳俊赵岫云汪维红
- 关键词：大白菜保持系RNA编辑
- 北方水稻种植技术探讨
- 2019年
- 食物是人类发展的基础,只有全面保证食物丰富,才能促进人类健康成长,人的生存以食物供给为基本保障。本文就北方水稻种植技术进行全面探讨,以此,提升种植技术能力,确保增产丰收。
- 李振兴
- 关键词：水稻技术能力
