付朋飞
- 作品数：33 被引量：65H指数：5
- 供职机构：河南农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪伪狂犬病毒YZ株gE全基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2015年
- 为了解猪伪狂犬病毒（PRV）gE基因的遗传变异特性,根据Gen Bank已发表的PRV gE全基因序列,设计并合成1对特异性引物,对PRV YZ株进行了gE全基因的扩增、克隆及测序,并与其他参考毒株gE基因进行比较序列分析。测序结果表明,YZ株gE全基因序列由1862bp组成,与GenBank已发表的13株PRV gE参考株序列同源性介于97.9%-99.9%。进化树分析表明,YZ株与目前国内流行的毒株在同一进化分支内,与国外分离株有一定差异。
- 朱前磊方先珍程果毕亚楠乔涵付朋飞王淑娟陈红英
- 关键词：伪狂犬病毒E基因
- 表达猪细小病毒VP2蛋白的重组猪伪狂犬病毒在小鼠体内的免疫反应被引量：10
- 2016年
- 为了研制出能够同时预防猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)和猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的二联活疫苗,本研究将PPV VP2基因克隆到伪狂犬病毒通用转移质粒pG中,构建重组伪狂犬转移质粒pGVP2。利用脂质体转染法将重组质粒pGVP2和PRV HB98弱毒株DNA共转染至猪睾丸(ST)细胞,使其在ST细胞内发生同源重组,经5次绿色荧光空斑纯化重组病毒rPRV-VP2。分别用重组病毒rPRV-VP2、亲本PRV HB98弱毒株、商品化PPV灭活苗和DMEM细胞培养液免疫6周龄雌性昆明小鼠,2周后进行二免。一免后第7周用PRV强毒NY株对小鼠进行攻毒。结果获得表达VP2基因的重组病毒rPRV-VP2,经ELISA试验、血清中和试验(SN)、血凝抑制试验(HI)和流式细胞检测发现,重组病毒rPRV-VP2株可有效刺激小鼠机体产生抗PPV和PRV抗体,同时具有增强小鼠机体细胞免疫反应的能力,且对PRV强毒攻击具有保护作用。结果表明,重组病毒rPRV-VP2可作为同时预防PPV和PRV感染的重组疫苗候选株。
- 付朋飞潘鑫龙乔涵杨兴武朱前磊郭晓庆张宇陈红英
- 关键词：猪细小病毒猪伪狂犬病毒VP2蛋白重组病毒免疫效力
- 表达猪细小病毒VP2蛋白的猪伪狂犬病病毒rPRV-VP2株的生物学特性被引量：8
- 2017年
- 探索重组PPV VP2基因的猪伪狂犬病病毒rPRV-VP2株作为弱毒疫苗候选株的潜在价值,对其在多种细胞上的增殖特性、病毒滴度、最适培养细胞中的遗传稳定性、一步生长曲线、转录和翻译水平等生物学特性进行研究,并初步探索对小鼠安全性。结果显示:重组病毒rPRV-VP2株在VERO、ST、PK-15和IPEC细胞上的TCID50分别为104.375/0.1mL、106.5/0.1mL、103.75/0.1mL、105.625/0.1mL。重组毒与亲本毒PRV HB-98株在ST细胞中的毒力(106.125 TCID50/0.1mL)和细胞病变相当,重组病毒保持了PRV病毒的通性。连续传毒20代后的绿色荧光观察、RTPCR、Western blot试验结果均表明重组病毒中的VP2基因得到了有效表达,且遗传稳定性良好。安全性试验结果显示:重组毒对小鼠安全。本试验为后期对PPV VP2基因重组猪伪狂犬病毒rPRV-VP2株的开发利用奠定了基础。
- 付朋飞乔涵张宇杨兴武徐朋丽陈红英
- 关键词：猪细小病毒VP2基因PRV生物学特性
- 猪α干扰素基因在干酪乳酸杆菌中的表达
- 从质粒pMD18-IFN-α扩增出猪α干扰素(IFN-α)基因成熟蛋白序列,克隆到含有信号肽的质粒pUCK-SP中,获得重组质粒pUCK-SP-IFN-α。再将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切获取的SP-IFN-α片段插入到同...
- 陈红英马世杰李坤付朋飞郭晓庆高晓云崔保安
- 关键词：猪Α干扰素基因表达抗病毒活性
- 文献传递
- 构建双标记重组PRV探究Gossypol抑制PRV增殖机制
- 伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV),属于疱疹病毒科,α疱疹病毒亚科,水痘病毒属成员,是一种有囊膜的双链线状DNA病毒,其基因组长度约150 kb。PRV对猪群危害严重,特别是2011年以来,我国一...
- 付朋飞
- 关键词：GOSSYPOLEGFP
- 表达猪圆环病毒2型CAP蛋白和猪IL-18的重组禽痘病毒的构建被引量：3
- 2015年
- 为了构建共表达猪圆环病毒2型(PCV2)CAP蛋白和猪IL-18的重组禽痘病毒,本研究将CAP基因和猪IL-18基因分别置于pSY538的痘病毒启动子LP2EP2下,然后插入到含有痘苗病毒启动子P11启动的LacZ基因的禽痘病毒转移载体pSY681/lacZ中,获得重组转移质粒pSY681/CAP/IL18。将重组质粒pSY681/CAP/IL18转染入鸡胚成纤维细胞内,使CAP基因、猪IL-18基因和LacZ基因同源重组到禽痘病毒S-FPV-017中,产生重组禽痘病毒,经多次蓝斑克隆筛选纯化后,最终得到共表达CAP蛋白和猪IL-18的重组禽痘病毒(rFPV-CAP/IL18)。以rFPVCAP/IL18感染CEF,通过RT-PCR检测,CEF细胞中含CAP基因和猪IL-18基因的mRNA,间接免疫荧光试验证实感染rFPV-CAP/IL18的CEF能表达CAP蛋白。重组禽痘病毒能表达具有生物学活性的CAP和猪IL-18,为进一步的免疫效力研究奠定了基础。
- 郭晓庆王子馨王淑娟朱前磊付朋飞崔保安陈红英
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP重组禽痘病毒
- 猪α干扰素基因在干酪乳酸杆菌中的表达
- 从质粒pMD18-IFN-α扩增出猪α干扰素(IFN-α)基因成熟蛋白序列,克隆到含有信号肽的质粒pUCK-SP中,获得重组质粒pUCK-SP-IFN-α。再将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切获取的SP-IFN-α片段插入到同...
- 陈红英马世杰李坤付朋飞郭晓庆高晓云崔保安
- 关键词：猪Α干扰素抗病毒活性
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型和猪博卡病毒双重PCR检测方法的建立
- 引言猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）为仔猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）的主要致病因子,属于圆环病毒科圆环病毒属[1,2]。2009年,Blomstr（o|¨）m等首次在...
- 付朋飞乔涵潘鑫龙顾阳郭晓庆杨兴武陈红英
- 关键词：猪圆环病毒PCR
- 脂多糖对猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导的抗病毒免疫反应的影响
- 引言猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起猪的一种高度接触性传染病,各日龄猪均可感染[1]。PRRSV主要攻击免疫细胞,如肺泡巨噬细胞、单核细胞,且在感染到其他器官之前在猪肺巨噬细胞中大量复制[2],其也可在扁...
- 王冬梅冯亚琼崔春晓李娜娜杜东颖秦运杰付朋飞夏平安
- 关键词：PAMPRRSV猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 猪博卡病毒3/4/5型PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2016年
- 通过分析GenBank上登录的猪博卡病毒3/4/5型(PBoV3/4/5型)基因序列,发现这些基因序列中存在一段高度同源性保守序列,针对该序列设计并合成1对引物,成功建立了可同时扩增出PBoV 3/4/5型的PCR检测方法。对2013年8月至2014年5月河南省50份临床腹泻仔猪小肠样品进行检测,结果 21份为PBoV阳性,阳性率为42%,表明PBoV在河南省猪群中存在一定流行。本试验建立的PCR方法对PBoV3/4/5的检测具有简便、快速、灵敏度高和特异性强的特点,为PBoV 3/4/5型的快速检测提供了有效的技术支持。
- 付朋飞杨兴武乔涵潘鑫龙郭晓庆张宇郭珍珍陈红英
- 关键词：PCR
