龙毅
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 透明质酸促进人间充质干细胞复合磷酸三钙-胶原材料体外成软骨研究被引量：4
- 2014年
- 目的 观察透明质酸对入骨髓间充质干细胞（hBMSCs）复合磷酸三钙-胶原材料体外构建组织工程软骨的影响.方法 将提取扩增的第3代hBMSCs体外与组织工程支架磷酸三钙-胶原复合,分两组进行三维培养：对照组和实验组（对照组培养液基础上加入100 mg/L透明质酸）.培养2周后进行苏木素-伊红（HE）染色、阿尔新蓝染色、Ⅱ型胶原（COL2）免疫组织化学染色,实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和糖胺多糖（GAG）定量检测,比较体外成软骨效果.结果 HE染色结果显示骨髓间充质干细胞能够均匀分布于材料中,实验组细胞基质的分泌大于对照组.实验组阿尔新蓝染色,COL2免疫组织化学染色,COL2、软骨特异性基SOX9、聚集蛋白聚糖（Aggrecan）的基因表达分别为8.954±2.612/1.062±0.459、3.512 ±0.638/1.111 ±0.595、4.588±1.964/1.042±0.335,糖胺多糖（GAG）定量检测结果（21.741±2.633/16.717±0.595）也都显著高于对照组,表明100 mg/L透明质酸能够有效促进hBMSCs复合磷酸三钙-胶原体外成软骨.在COL10和COL1的基因表达上实验组也大于对照组（21.741 ±2.633/16.717 ±0.595）,说明透明质酸除了能体外诱导hBMSCs成软骨分化外,还能进一步诱导其成熟发展.结论 100 mg/L透明质酸能够在三维组织工程支架中促进hBMSCs体外成软骨分化,并且能够进一步诱导其成熟发展.
- 孟繁钢何爱珊张志奇张紫机康焱杨子波龙毅林子洪吴刚
- 关键词：透明质酸骨髓间充质干细胞组织工程软骨
- 不同浓度重组人BMP-7促进骨髓间充质干细胞复合组织工程支架材料TCP-COL体外构建组织工程软骨的研究被引量：3
- 2013年
- 目的观察比较不同浓度重组人BMP-7对骨髓间充质干细胞复合组织工程支架材料TCP-COL体外构建组织工程软骨的影响。方法用梯度离心法获取人骨髓间充质干细胞（hMSCs）,将扩增的第3代hMSCs以1×10~7/ml的细胞浓度接种在支架材料TCP-COL上,分为三组进行培养：对照组（成软骨诱导液培养）,BMP-7（50）组（成软骨诱导液基础上加入50ng/ml的BMP-7）,BMP-7（100）组（成软骨诱导液基础上加入100ng/ml的BMP-7）。培养2周后进行扫描电镜观察（SEM）,苏木素伊红染色（HE）,阿尔新蓝染色,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色（IHC）,荧光定量PCR（RT-PCR）,糖胺多糖定量（GAG quantification assay）研究。结果扫描电镜与苏木素伊红染色结果显示细胞在TCP-COL生物支架中分布均匀且紧密粘附在材料表面。阿尔新蓝染色,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,二型胶原（F=76.931,P〈0.05）,糖胺多糖（F=63.158,P〈0.05）荧光定量PCR,糖胺多糖定量（F=8.981,P〈0.05）结果显示BMP-7能有效促进人骨髓间充质干细胞复合支架材料TCP-COL体外成软骨,且100mg/ml的浓度应用效果大于50mg/ml。但在COL1基因的表达上,BMP-7（50）组和BMP-7（100）组都显著大于对照组（F=34.823,P〈0.05）。结论 BMP-7能有效促进人骨髓间充质干细胞复合支架材料TCP-COL体外成软骨,且100mg/ml的浓度应用效果大于50mg/ml,但应注意其促进骨质增生的作用。TCP-COL是一种有应用前景的生物支架材料。
- 孟繁钢何爱珊张志奇吴刚杨子波林子洪龙毅廖威明
- 关键词：骨形态发生蛋白质类软骨
- 撕裂半月板中软骨退变相关基因及miRNAs的表达被引量：1
- 2015年
- 目的研究半月板中软骨退变相关基因的表达,探讨半月板撕裂对软骨退变的潜在影响,并分析mi RNAs和软骨退变的关系。方法以2012年9月-2013年10月5例行关节镜下撕裂半月板部分切除患者自愿捐赠的半月板组织作为实验组,4例截肢患者自愿捐赠的正常半月板组织为对照组。取标本行HE染色,观察组织学改变;行实时荧光定量PCR,检测半月板中软骨退变相关基因[蛋白多糖(Aggrecan,ACAN)、Ⅹ型胶原(type X collagen,COL10A1)、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinases 13,MMP-13)、CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding proteinβ,CEBP-β)、蛋白聚糖酶5(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondinmotif 5,ADAMTS-5)]以及mi RNAs(mi R-193b、mi R-92a、mi R-455-3p)表达水平。结果组织学观察示,实验组撕裂半月板组织存在不同程度退行性改变。与对照组相比,实验组ACAN表达水平下调,COL10A1、CEBP-β、ADAMTS-5、MMP-13表达水平均上调;除ACAN、MMP-13外,其余各退变相关基因组间差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组mi R-193b、mi R-92a、mi R-455-3p表达水平均较对照组显著上调,比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论撕裂半月板有退变趋势,其促进软骨退变作用较正常半月板显著,mi R-193b、mi R-92a、mi R-455-3p可能是促进软骨退变的调控因子。
- 龙毅何爱珊张志奇孟繁钢侯昌禾张紫机黄广鑫廖威明
- 关键词：半月板撕裂骨关节炎MIRNAS
