黄枫豪
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DNA甲基转移酶1抑制对涎腺腺样囊性癌细胞生长、侵袭及转移的影响
- 2009年
- 目的研究DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferases 1，DNMT-1）表达抑制对涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma，SACC）细胞体内、体外的生物学影响，探讨DNMT-1在SACC发生、侵袭及转移中的作用。方法对前期实验建立的DNMT-1表达稳定抑制的ACC-M细胞（实验干扰组）、空载对照ACC—M细胞系（空载对照组）及ACC—M细胞系（空白对照组），在体外分别应用甲基噻唑基四唑（MTT）法生长曲线分析、流式细胞周期分析、平板克隆实验、体外侵袭能力分析等方法，体内对裸鼠皮下、尾静脉注射肿瘤细胞，综合分析评估DNMT-1表达抑制对ACC—M细胞体内增殖、侵袭及转移的影响。结果实验干扰组细胞倍增时间延长[（34．7±2．1）h]、细胞周期S期比例[（17．4±1．7）％]、克隆形成率[（43．0±1．3）％]降低，与空白对照组[分别为（26．2±3．1）h、（31．5±2．0）％、（71．0±4．7）％]及空载对照组[分别为（28．4±3．9）h、（39．0±2．0）％、（66．0±5．2）％]差异有统计学意义（P〈0．05）；各组体外侵袭能力的差异无统计学意义（P〉0．05）；体内DNMT-1表达稳定抑制的ACC—M细胞，其皮下成瘤率（6／10）、瘤体体积[（2．18±0．83）mm^3]、重量[（O．0156±0．0046）g]均显著低于空白对照组[分别为10／10，（155．44±1．67）mm^3、（0．0724±0．0157）g]及空载对照组[分别为10／10、（147．46±1．73）mm^3、（0．0729±0．0177）g]，差异均有统计学意义（P〈0．05）；各组的肺转移率差异无统计学意义（P〉0．05）；DNMT-1表达稳定抑制的ACC-M细胞，其肺转移瘤的个数[（2．0±0．5）个]、直径[（70．0±20．3）μm]均显著低于空白[（28．0±5．5）个、（195．0±25．4）μm]及空载（27．0±4．5）个、（190．0±19．9）μm]对照组，P〈0．05。结论抑制DNMT-1的表达能有效降低ACC细胞的生长、增殖及转移能�
- 黄枫豪田臻张春叶夏荣辉李江
- 关键词：肿瘤转移DNA甲基转移酶1
- 唾液腺腺样囊性癌细胞系中5个抑癌基因甲基化及其表达被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨唾液腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)细胞系中CDH13、RASSF2A、TFPI-2、hMLH-1、MyoD1基因的甲基化及其与mRNA表达之间的关系。方法:甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测ACC细胞系ACC-2、ACC-3、ACC-M中CDH13、RASSF2A、TFPI-2、hMLH-1、MyoD1基因的甲基化;RT-PCR及荧光实时定量PCR对存在甲基化的基因进行mRNA水平的检测。结果:3个细胞系中均存在CDH13、RASSF2A、TFPI-2基因的甲基化和未甲基化,只存在MyoD1基因的甲基化和hMLH-1基因的未甲基化;ACC-2中CDH13基因mRNA水平的表达显著高于ACC-M,ACC-3中RASSF2A的表达显著高于ACC-2、ACC-M,3个细胞系中均未检测到MyoD1基因的表达。结论:ACC细胞系中,CDH13、RASSF2A、TFPI-2、MyoD1基因的甲基化为常见事件,甲基化可能为MyoD1基因失活的主要机制,CDH13基因的表达可能与ACC的转移相关。
- 张春叶胡宇华周荣睿黄枫豪李江
- 关键词：唾液腺腺样囊性癌DNA甲基化TFPI-2
- 非编码核糖核酸与头颈部恶性肿瘤
- 2008年
- 非编码核糖核酸是一类具有重要生物学功能的核酸分子。目前,学术界仅对少数非编码核糖核酸的特性及其在细胞内的调控作用等有一定的认识,而对其他更多种类的非编码核糖核酸及其具体的生物学作用依然不甚明了。下面就非编码核糖核酸的主要分类、生物学意义和功能,以及非编码核糖核酸参与头颈部恶性肿瘤的发生及其在头颈部恶性肿瘤诊断、治疗中的应用作一简要综述。
- 黄枫豪李江
- 关键词：头颈部恶性肿瘤肿瘤发生
- 曲古抑菌素A对腺样囊性癌细胞ACC-2增殖及p16^(INK4a)启动子区甲基化、mRNA表达的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人唾液腺腺样囊性癌细胞ACC-2增殖的影响,并分析其对p16^(INK4a)基因启动子区甲基化及mRNA表达的影响。方法:50～800nmol/L范围内不同浓度的TSA作用于体外培养的ACC-2细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,观察细胞形态变化。应用甲基化特异性PCR(methylation- specific PCR,MSP)、反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和实时定量PCR(real-time PCR)分析不同时间(2、4、8、16、24h)100nmol/L TSA处理前、后ACC-2细胞中p16^(INK4a)基因启动子区甲基化及p16^(INK4a)mRNA表达的变化。采用SAS6.12软件包对数据进行t检验。结果:TSA在50nmol/L浓度即能有效抑制ACC-2细胞的增殖(P<0.05),并使细胞形态发生明显改变,抑制作用呈明显的浓度和时间依赖性。100nmol/L TSA处理ACC-2细胞2～16h后,p16^(INK4a)基因启动子区甲基化消失;处理2～24h后,p16^(INK4a)mRNA表达显著增高。结论:TSA可能通过改变组蛋白乙酰化的水平影响p16^(INK4a)基因启动子区甲基化的水平,使p16^(INK4a)基因表达升高,影响细胞周期,从而有效抑制ACC-2细胞的生长。
- 周荣睿田臻黄枫豪周晓健李江
- 关键词：唾液腺腺样囊性癌P16^INK4A
- DNMT1干扰对唾液腺腺样囊性癌细胞系ACC-M E-cadherin表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:建立DNA甲基转移酶1(DNMT1)表达稳定抑制的唾液腺腺样囊性癌细胞系ACC-M,探讨DNMT1表达抑制对ACC-M细胞E-cadherin表达的影响。方法:设计靶向干扰DNMT1的shRNA序列,构建携带该序列的慢病毒载体并转导ACC-M细胞,对筛选出的抗性克隆采用RT-PCR、荧光定量PCR、免疫印迹方法分别检测DNMT1mRNA、蛋白质水平,筛选获得DNMT1表达稳定抑制的ACC-M细胞,并通过甲基化特异性PCR检测E-cadherin基因启动子的甲基化状态,荧光定量PCR检测E-cadherin的表达情况。采用SPSS11.0软件包对数据进行t检验。结果:筛选获得DNMT1稳定表达抑制的ACC-M细胞,其mRNA、蛋白相对表达水平(0.156±0.008,0.163±0.013)显著低于空白对照组和空载对照组。进一步检测发现,E-cadherin基因启动子甲基化水平明显降低,E-cadherinmRNA表达水平显著增高,P<0.05。结论:shRNA慢病毒载体介导的RNA干扰能够有效、稳定地抑制ACC-M细胞DNMT1的表达,并降低ACC-M细胞E-cadherin基因启动子的甲基化水平,从而使E-cadherin基因表达增强。
- 黄枫豪田臻张春叶周荣睿胡宇华周晓健李江
- 关键词：唾液腺腺样囊性癌DNA甲基转移酶1E-CADHERIN基因
- DNMT1抑制对唾液腺腺样囊性癌细胞影响的研究
- 目的:研究DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferases 1，DNMT1）表达抑制对唾液腺腺样囊性癌（adenoid cystic carcinoma，ACC）细胞体内、体外生物学的影响，探讨DNMT1...
- 黄枫豪
- 关键词：唾液腺腺样囊性癌癌细胞DNA甲基转移酶1
- 文献传递
