陈骁
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 供职机构：广东药学院生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 游离脂肪酸混合物对肝细胞脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响被引量：9
- 2014年
- 目的:研究游离脂肪酸(FFA)混合物对肝细胞L-02的脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响。方法:正常肝细胞L-02分别用正常培养基和0.5、1、2 mmol/LFFA混合物(油酸和软脂酸的比例为2:1)培养24 h后,尼罗红染液室温避光染色,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪确定细胞内脂质堆积情况。组织细胞酶法测定试剂盒测定细胞内甘油三酯含量。MTT法分析细胞存活率,Annexin V-PI凋亡检测试剂盒分析肝细胞的凋亡情况,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒分别检测培养液中ALT和AST活性。实时定量PCR技术检测脂代谢相关的脂肪分化相关蛋白(ADRP)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)的mRNA表达情况。结果:各浓度FFAs混合物均可剂量依赖性增加肝细胞脂肪堆积和肝细胞甘油三酯含量,且1 mmol/LFFA混合物可增高肝细胞的甘油三酯含量2.6倍,与非酒精性脂肪肝病人的变化基本相同。2 mmol/LFFA混合物可降低肝细胞L-02细胞存活率并诱导细胞凋亡,而0.5 mmol/L和1 mmol/LFFA混合物对细胞无明显影响。与对照组相比,各浓度FFA混合物对细胞上清中ALT和AST活性无明显影响。1 mmol/LFFA混合物作用后可分别上调肝细胞的ADRP和SREBP-1 mRNA的表达2.660和2.758倍。结论:FFA混合物可诱导肝细胞L-02脂肪变性且2mmol/LFFA混合物可造成轻度细胞损伤。脂代谢相关基因ADRP和SREBP-1表达上调与FFA混合物诱导的脂肪变性相关。
- 王辉陈骁项夏霖彭鑫王苑芳刘填桂黄树林邵红伟
- 关键词：非酒精性脂肪肝病游离脂肪酸脂毒性脂肪分化相关蛋白
- 葛根芩连汤含药血清及其主要代谢物对人肝癌Huh7细胞株P38MAPK信号通路的影响被引量：6
- 2015年
- 目的研究葛根芩连汤含药血清及其主要代谢物对Huh7肝癌细胞株P38MAPK信号通路的影响和相互关系。方法 MTT法确定含药血清组及各代谢物组给药浓度;荧光定量PCR法检测Huh7细胞P38MAPK信号通路中各基因mRNA转录水平;Western blot法检测Huh7细胞P38MAPK信号通路中各蛋白的表达情况。结果葛根芩连汤含药血清组对P38、JNK的表达有上调作用,对ERK的表达有下调作用;葛根素组对P38、JNK的表达有上调作用,对ERK的表达无影响;大豆苷组对P38的表达有上调作用,对JNK、ERK的表达无影响;大豆苷苷元组对P38的表达无影响,对JNK的表达有上调作用,对ERK的表达有下调作用(P<0.05)。结论葛根芩连汤与葛根素、大豆苷、大豆苷苷元对Huh7P38MAPK信号通路的影响不同,选取葛根芩连汤及其主要代谢物平行研究,更有利于对葛根芩连汤进行深入开发。
- 陈骁贺华苏畅薄华本王辉黄树林
- 关键词：葛根芩连汤P38MAPK信号通路葛根素大豆苷
- 不同保存条件对病毒载体活性及对类癌细胞杀伤的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探索5型病毒载体的保存条件,使病毒载体在保存过程的活性损失最小,对类癌细胞的杀伤作用最大。方法采用正交设计法,考虑温度、甘油含量及MgCl2浓度3因素,对病毒载体采用了3因素3水平的试验,测出不同保存配方的病毒载体的滴度。同时检测病毒载体在体对类癌细胞杀伤的影响。结果在-80℃,含5%甘油和3 mmol/L MgCl2的保存条件下病毒载体的活性最高,对类癌细胞HEK-293杀伤作用最明显;温度对病毒载体的活性影响最显著,甘油含量及MgCl2浓度对病毒载体的活性影响并不显著。结论温度越低,病毒载体体内反应越低;滴度越大,对类癌细胞的杀伤效果越大。温度越低对病毒载体的保存越有利,同时也为其他病毒载体保存条件的研究提供借鉴。
- 邬君陈骁陈璇邵红伟黄树林
- 关键词：病毒载体正交设计法
