方芳
- 作品数：12 被引量：22H指数：3
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 黄海海域鲐鱼感染异尖线虫三期幼虫初步调查被引量：7
- 2013年
- 目的了解异尖线虫三期幼虫在黄海海域鲐鱼体内的感染情况。方法 2010年5月—2011年1月抽取产自黄海海域的鲜活鲐鱼(Pneumatophorus japonicus)113尾(15～20尾/月),分别检查、记录每个个体的体腔,内脏器官,背部、腹部、尾部鱼肉等感染线虫的情况,将所获线虫经乳酸酚透明液透明后于光镜下进行常规的形态学鉴定,并随机取192条(30～35条/月)线虫全基因组进行聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析鉴定。结果有98尾鲐鱼感染异尖属线虫三期幼虫,感染率为86.7%;共检出4 770条异尖线虫,感染强度为5～194条/尾不等,平均感染强度为42.2条/尾;体腔和内脏器官感染虫数占鱼体总感染虫数的88.7%(4 229/4 770),腹部肌肉感染虫数占鱼全身肌肉总感染虫数的87.2%(470/539);感染强度随鱼体重增加而增大;所有检出的异尖线虫依据其形态鉴定均为异尖属线虫Ⅰ型幼虫;192条异尖属线虫分别为派氏异尖线虫191条、典型异尖线虫1条。结论黄海海域鲐鱼中异尖属线虫三期幼虫的感染情况比较严重,且感染程度与季节、鲐鱼体重、身体部位有一定关系,检出的异尖属线虫三期幼虫经RFLP分析以派氏异尖线虫为主,这对今后卫生检疫与渔业生产加工出口有一定的提示和指导意义。
- 李健郭佳妮周君波施维李雯雯方芳黄维义
- 关键词：鲐鱼寄生虫海鱼
- 利用微信在“兽医寄生虫学”教学中的应用探索被引量：3
- 2020年
- 微信是当下非常流行的手机交流工具,广泛融入大学生的生活与学习,从中应运而生的“微信辅助教学模式”也逐渐引起了国内教育界的普遍关注。“兽医寄生虫学”是一门具有很强的实践性和应用性的课程,微信辅助教学模式的引进,能够甄选利用优质寄生虫学教育资源,增强了理论与实践的紧密结合,加强了师生的互动性,实现学生全程参与教与学,极大地促进了教学质量的提高。
- 方芳张羽陈汉忠黄维义张为宇
- 关键词：辅助教学兽医寄生虫学
- 广西南宁市水牛肝脏内前后盘吸虫的鉴定被引量：3
- 2021年
- 为探明广西南宁地区水牛体内前后盘吸虫的种类,通过对其肝脏来源虫体进行鉴定,确定水牛感染的具体种属。本研究对南宁市某屠宰场水牛肝脏进行剖检、病理观察,并采集肝脏内寄生的前后盘吸虫进行虫卵孵育,对孵育所得的虫卵及虫体进行形态观察,对成虫虫体进行HE及苏木素染色,观察其内部的结构,并采用分子生物学方法对成虫进行鉴定。结果显示,虫体感染的肝脏表面有出血点,且呈现淤血、化脓灶、肝脏肿大、质地偏软等肉眼可见病变。虫卵呈椭圆形、淡灰色、有卵盖且内含圆形胚细胞,卵黄细胞不充满整个虫卵。对成虫染色观察可见虫体由体壁及内部生殖、消化等系统构成。体壁由皮层和肌层组成,虫体可见生殖系统、消化管和一些肌束与纤维组织,其中生殖系统包括卵巢、子宫和睾丸等生殖器官,消化管分布于整个体腔。虫体核糖体基因ITS-2扩增产物为441 bp,分析显示与GenBank中Explanatum explanatum(AB743577.1)相似性达99.3%。遗传进化分析显示此虫体与Explanatum explanatum具有很近的亲缘关系,同属一个分支。综合剖检病理变化,虫卵特性,虫体形态特性及分子生物学结果,确定该虫体为前后盘科的Explanatum explanatum。本研究结果为前后盘科吸虫分类鉴定提供一定的理论基础,并进一步丰富该科的虫体种类,此外初步了解广西南宁地区水牛前后盘吸虫病的流行情况,并为准确防治吸虫感染提供一定的理论依据。
- 吴正姣侯林静饶国顺靳纬坤方芳张为宇邸文达
- 关键词：HE染色形态学鉴定分子生物学鉴定前后盘吸虫
- 蛆症金蝇细胞色素b基因扩增及在我国流行趋势分析
- 蛆症金蝇(Chrysomya bezziana)幼虫是一种能专性寄生于人类及其他温血动物的蝇蛆，广泛分布于热带和亚热带地区，威胁着畜牧业与公共卫生安全。本研究从感染了皮肤蝇蛆的犬身上分离到35只蝇蛆，经形态学鉴定为蛆症金...
- 方芳常清华盛兆安张羽
- 关键词：细胞色素B单倍型
- 一例犬口鼻瘘的诊断及治疗被引量：1
- 2024年
- 对一例长期呼吸症状治疗未得到任何缓解的转诊犬口鼻瘘病例进行诊治,通过血常规、生化、凝血功能、血压、牙科影像学及鼻腔内窥镜检查,确诊该犬患口鼻瘘,经过手术治疗,该犬康复。1 病例介绍贵宾犬,雌性,8岁,4.8 kg。定期驱虫免疫,主要喂食人类吃的食物,偶尔喂食犬粮。主诉该犬流脓鼻涕3个月,打喷嚏有逆向喷嚏现象。在他院治疗多次,症状未得到缓解,仍见流脓鼻涕。食欲尚可,大便成型,未见呕吐。
- 银枝娟谢萧宇方芳
- 关键词：定期驱虫贵宾犬呼吸症状血常规喂食凝血功能
- 来宾市临床腹泻肉牛的病毒和寄生虫感染情况调查与分析
- 2024年
- 为了解广西来宾市肉牛腹泻的主要病原感染情况,2022年-2023年共采集126份肉牛新鲜腹泻粪便,通过RT-PCR法和形态学观察法对BEV、BCoV、BVDV、BKV、BRV、BAstV、牛球虫、牛弓首蛔虫及结肠小袋纤毛虫9种主要致牛腹泻病原进行检测。结果显示:样品总体阳性率为46.83%(59/126),其中BEV、BCoV、BVDV、BRV、BKV、BAstV、牛球虫、牛弓首蛔虫和小袋纤毛虫的检出率分别为14.28%(18/126)、4.76%(6/126)、11.90%(15/126)、2.38%(3/126)、0(0/126)、0(0/126)、23.81%(30/126)、9.52%(12/126)、5.56%(7/126)。调查分析表明,来宾市不同年龄、不同粪便性状的腹泻肉牛粪样中存在多种病毒、寄生虫病原,主要病原为BEV、BVDV、牛球虫和牛弓首蛔虫,多病原混合感染情况严重,具有丰富的混感型。
- 李珊冯世文吴翠兰禤雄标胡帅何彩美何彩美钟舒红彭昊贺会利李军方芳
- 关键词：肉牛腹泻病毒寄生虫
- 过继转移RNA干扰日本血吸虫的发育表型评价技术的建立
- 2018年
- 目的建立RNA干扰后的日本血吸虫转移至小鼠体内发育情况的评价技术,为后组学时代功能基因研究提供工具。方法设计引物扩增日本血吸虫组织蛋白酶B1(SjCB1)基因dsRNA、绿色荧光蛋白(GFP)dsRNA。用日本血吸虫尾蚴感染小鼠,收集14 d的日本血吸虫童虫。用6 mg/L SjCB1 dsRNA体外培养浸泡法对日本血吸虫童虫的SjCB1基因进行特异性敲低(SjCB1干扰组),对照组加6 mg/L GFP dsRNA(GFP干扰组)。采用外科手术将干扰后的童虫过继转移至小鼠肠系膜静脉(SjCB1干扰组、GFP干扰组各3只小鼠,40条/鼠),待虫体发育至性成熟时收集虫体。统计分析雌雄虫回收数量、合抱率、虫体回收率以及虫体长度,观察虫体生长发育情况。采用荧光定量PCR检测干扰后的14 d雌、雄童虫以及回收的雌、雄成虫SjCB1基因的表达情况。结果SjCB1干扰组、GFP干扰组回收的雌、雄虫数量,合抱率,虫体回收率分别为(9.0±1.4)、(9.0±2.1)条,(13.0±2.9)、(11.3±2.5)条,100%、100%和58.60%、54.67%。两组雌、雄虫数量,合抱率,虫体回收率差异均无统计学意义(P>0.05)。SjCB1干扰组过继转移前雌、雄童虫SjCB1基因的相对表达量为1.022±0.019、0.643±0.105,均低于GFP干扰组的2.880±0.297、2.753±0.164(t=0.000、0.000,P<0.01);SjCB1干扰组回收的雌、雄虫SjCB1基因相对表达量分别为1.286±0.211、1.182±0.287,均低于GFP干扰组的5.506±0.326、4.986±1.230(t=0.013、0.000,P<0.01)。SjCB1干扰组、GFP干扰组雌虫长分别为(7.059±1.255)、(8.433±0.749)cm,雄虫长分别为(6.993±2.734)、(10.561±1.375)cm,两组间雌、雄虫差异有统计学意义(t=0.003、0.001,P<0.01)。SjCB1干扰组、GFP干扰组虫体外观形态及内部的生殖系统、消化系统未见差异,两组雌虫在卵模与子宫中均有成形的虫卵。结论建立了干扰特异性基因后观察虫体体内发育表型的技术,体外培养浸泡干扰后日本血吸虫童虫、成虫SjCB1基因表达水平被�
- 柳建发李健任怡静张瑞祥方芳胡薇
- 关键词：日本血吸虫RNA干扰过继转移
- 口服新型杀虫剂afoxolaner治疗人工感染猪疥疮病的探索研究
- <正>疥螨感染引发的疥疮病是全球兽医与人医共同关注的重要体外寄生虫病。人和动物疥疮病最常见的治疗方案是外用杀螨剂和/或口服大环内酯类药物进行全身治疗。本研究利用猪做为人工感染疥螨的动物模型,对比一次口服给药afoxola...
- 方芳Charlotte BernigaudJacques Guillot黄维义
- 关键词：新型杀虫剂
- 文献传递
- 基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒快速检测方法的建立被引量：4
- 2024年
- [目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]分析不同基因型PRRSV全基因组序列,在3′-UTR端保守区设计重组酶介导等温核酸扩增技术(RAA)引物、crRNA及DNA报告底物分子,筛选RT-RAA最佳引物对。表达纯化AsCas12a蛋白,并以质粒为标准品,经RT-RAA扩增后,将产物加入CRISPR/Cas12a系统,建立PRRSV的CRISPR/Cas12a-RT-RAA检测方法,分别以PRRSV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸为模板验证建立方法的特异性,以不同浓度的pMD18T-PRRSV为模板验证建立方法的敏感性。以5.62×10^(6)、5.62×10^(3)、5.62拷贝数/μL的质粒为模板进行重复性试验,最后进行临床效果评价,将所建立的方法与实时荧光定量逆转录PCR方法进行比较。[结果]本研究成功表达并纯化获得具有良好剪切活性的AsCas12a蛋白,蛋白分子质量大小为196 ku;所建立的CRISPR/Cas12a-RT-RAA方法的检测下限可达5.62拷贝/μL;该方法具有良好的特异性,可特异性检测出PRRSV,不能检出其他猪病病毒PCV2、PEDV、CSFV和PRV,并具有良好的重复性。应用该方法对121份猪组织样品进行检测,与实时荧光定量逆转录PCR的阳性符合率为93.75%,阴性符合率为99.05%,总符合率为99.17%。[结论]本研究成功建立基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的PRRSV快速检测方法,该方法特异性强、灵敏性高、重复性好且不依赖复杂设备,可在现场和基层实验室使用。
- 于晶雪韦珊珊覃绍敏吴健敏杨丽华陈凤莲许力士秦树英华俊韦珏方芳刘金凤
- 广西部分地区猫隐孢子虫、十二指肠贾第虫、三毛滴虫分子流行病学调查被引量：1
- 2023年
- 为了解广西部分地区猫隐孢子虫、十二指肠贾第虫和三毛滴虫的感染情况和基因型,试验采集南宁市、桂林市、柳州市、梧州市和河池市各宠物医院、流浪动物中心及送检的新鲜猫粪便样本300份,基于隐孢子虫SSU rRNA和gp60基因,十二指肠贾第虫bg、tpi和gdh基因及三毛滴虫ITS基因采用PCR方法对粪便DNA进行PCR扩增,阳性样本进行测序分析,构建遗传进化树。结果表明:共检测出22份隐孢子虫、24份十二指肠贾第虫和41份三毛滴虫阳性样本,阳性率分别为7.3%、8.0%和13.7%。幼猫三种原虫阳性率均显著高于成年猫(P<0.05),腹泻猫的阳性率显著高于未腹泻猫(P<0.05),雄性猫三毛滴虫的阳性率要显著高于雌性(P<0.05)。检测出的隐孢子虫都为猫隐孢子虫(Cryptosporidium felis,C.felis),根据gp60基因进行亚型分型,鉴定出ⅩⅨa和ⅩⅨc两种亚型。十二指肠贾第虫共鉴定出集聚体F、B和F+B三种基因型,其中集聚体F为优势基因型。说明广西部分地区猫普遍存在隐孢子虫、十二指肠贾第虫和三毛滴虫的感染,且感染的虫种和部分基因型为人兽共患型,由于宠物猫与人类的亲密接触,需要警惕这些肠道原虫在人和猫之间的互相传播,并采取相应措施来进行预防。
- 顾海闻银枝娟封申瑞吴文德方芳
- 关键词：隐孢子虫
