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5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人鼻咽癌裸鼠移植瘤的抑制作用被引量：18: 2005年; 背景与目的:5-杂氮-2′-脱氧胞苷是DNA甲基转移酶抑制剂,能使因甲基化而失活的抑癌基因重新激活,进而抑制肿瘤的生长。本文观察了5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其抗肿瘤效应及可能的机理,寻找鼻咽癌治疗的新靶点。方法:用5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理人鼻咽癌细胞,观察其对细胞生长的抑制及死亡相关蛋白激酶基因(death-associated proteinkinase,DAPK)甲基化情况。建立人鼻咽癌移植瘤裸鼠模型,用5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理裸鼠,观察移植瘤的生长情况,并用RT-PCR和免疫组织化学技术检测DAPK基因mRNA及蛋白表达的变化。结果:未经5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理的CNE细胞中DAPKmRNA不表达。经5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理后,不同药物浓度组的细胞中均有DAPKmRNA表达,且表达随浓度增高而增强。5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长均有明显的抑制作用,且能使失活的DAPK基因重新激活。药物作用4周后,用药组裸鼠体重(22.35±2.02)g与对照组(21.68±2.14)g之间无显著性差异(t=0.011,P>0.05),用药组肿瘤的体积(195.32±27.57)mm3较对照组(343.67±23.08)mm3明显减小,两者之间有显著性差异(t=10.11,P﹤0.01)。在鼻咽癌移植瘤中,对照组DAPK均不表达,而用药组出现表达。结论:5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤的抑制作用可能是因为其使因甲基化而失活的抑癌基因DAPK再转录,诱导该基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的生长和增殖。; 张松孔维佳王彦君韩月臣张丹; 关键词：移植瘤裸鼠模型死亡相关蛋白激酶

18例头颈部非霍奇金淋巴瘤临床分析被引量：12: 2003年; 目的 :探讨头颈部非霍奇金淋巴瘤 (NHL)的临床表现、病理分型、临床分期、治疗及预后。方法 :18例头颈部NHL患者 ,7例行手术加放、化疗 ,11例行放、化疗。结果 :完全缓解 13例 ,部分缓解 5例。除 1例失访外 ,17例随访 3～ 5年 ,均生存。结论 :头颈部NHL早期诊断较难 ;治疗以放、化疗为主 ,早期放、化疗有利预后。; 张丹杨成章; 关键词：非霍奇金淋巴瘤头颈部肿瘤

超声极速成像评价颈动脉弹性的临床研究: 目的：脉搏波传播速度(Pulsed wave velocity,PWV)是临床反映动脉弹性的代表性指标,与动脉硬化病理进展及预后密切相关。作为反映早期全身动脉硬化的窗口血管,颈动脉局部僵硬度的准确评价有重要临床意义。本研...; 张丹王静项飞翔方凌云宋越; 关键词：颈动脉弹性 PWV

u-PA和TGF-β_1在喉癌中的表达及临床意义: 2004年; 目的探讨u-PA和TGF-β1在喉癌中的表达及其与喉癌生物学行为之间的关系。方法采用SABC免疫组化染色方法检测了84例喉癌与10例正常喉组织中的u-PA和TGF-β1的表达情况。结果在喉癌组织中u-PA的表达水平与临床分期和有无淋巴结转移的相关性有统计学意义(P<0.05),与组织学分型和发生部位的相关性无统计学意义(P>0.05)。在大部分喉癌组织中(89.29%)TGF-β1表达较高,与临床分期和有无淋巴结转移的相关性有统计学意义(P<0.05),但与组织学分型和发生部位的相关性无统计学意义(P>0.05)。此外,u-PA和TGF-β1在喉癌中的表达和在正常喉黏膜中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论u-PA和TGF-β1与喉癌生物学行为关系密切,它们的异常表达可能是喉癌发生、发展过程中的一个重要环节。; 张丹杨成章孔维佳; 关键词：U-PA TGF-Β1 喉癌生物学行为淋巴结转移

大鼠耳蜗感觉上皮细胞的原代培养及其意义: 2007年; 目的:建立大鼠耳蜗感觉上皮细胞(CSEC)的原代培养体系,为研究毛细胞再生的分子机制提供大量来源一致的细胞。方法:取出生1d(P1)的大鼠耳蜗感觉上皮(Corti器)作组织块培养,选择性消化抑制成纤维样细胞(FLC)生长;应用有限稀释法纯化CSEC,倒置显微镜下观察CSEC的形态、生长特征;应用细胞角蛋白18、波形蛋白、Brn3.a和Calretinin的免疫细胞化学及透射电镜等进行鉴定。BrdU标记CSEC核DNA观察CSEC有丝分裂活动。结果:培养第2天CSEC从组织块迁移出来,呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态,细胞之间连接紧密,形成单层时呈“铺路石样”外观;FLC呈梭形“鱼群样”包绕CSEC生长,增殖速度快于CSEC。由纯化的CSEC构成的上皮单层可见由成百个CSEC包绕液体形成的dome。CSEC表达毛细胞的特征性标志物,证实培养的CSEC具有毛细胞前体细胞的特征;并通过有丝分裂活动产生新的细胞即毛细胞样细胞。结论:体外培养的CSEC表达毛细胞特征性标志物,具有毛细胞前体细胞的特征。CSEC原代培养体系的建立,为进一步探讨毛细胞再生的分子机制提供了实验条件。; 刘俊孔维佳张丹张亚民刘贞荣; 关键词：耳蜗原代培养毛细胞

5-杂氮-2’-脱氧胞苷抑制人喉癌细胞生长机制的研究被引量：3: 2006年; 目的观察5-杂氮-2’-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌细胞系生长增殖的影响,探讨其抗肿瘤效应及可能的机制。方法用5- 杂氮-2’-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌细胞系处理后,甲基化特异性PCR(MSP),T-A克隆测序分析死亡相关蛋白激酶(death-associ- ated protein kinase,DAPK)基因甲基化状态,逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学、流式细胞仪检测用药前后DAPK mRNA和蛋白的表达情况及细胞凋亡和周期的变化。结果未经5-杂氮-2’-脱氧胞苷处理的Hep-2细胞中DAPK基因CpG岛甲基化,且 DAPK mRNA不表达。经5-杂氮-2’-脱氧胞苷处理后,甲基化的DAPK基因部分去甲基化,大于或等于10-7 mol·L-1组的细胞中有DAPK mRNA表达,且表达随浓度增高而增强。免疫细胞化学染色显示,经处理后的肿瘤细胞DAPK蛋白表达呈阳性,而对照组不表达。流式分析结果为处理后凋亡率明显增加,且G1期细胞增加,G2／M期减少。结论 5-杂氮-2’-脱氧胞苷能抑制喉癌细胞的生长和增殖,可能的机制是其能使因甲基化而失活的DAPK基因再转录,诱导该基因的重新表达。; 孔维佳张松韩月臣张丹王彦君; 关键词：HEP-2细胞系死亡相关蛋白激酶甲基化特异性PCR

喉癌中Ki67和VEGF的表达及其相关性的初步探讨被引量：6: 2004年; 目的 :探讨细胞增殖抗原标记物 (Ki6 7)和血管内皮生长因子 (VEGF)在喉鳞状细胞癌中的表达及其相互关系。方法 :用免疫组织化学方法研究Ki6 7和VEGF在 4 0例喉鳞状细胞癌组织 (喉癌组 )和 5例正常喉黏膜标本 (对照组 )中的表达。结果 :Ki6 7和VEGF在喉癌组中的表达高于对照组 (P <0 .0 1) ;在有淋巴结转移的喉鳞状细胞癌中的表达高于无淋巴结转移者 (分别为P<0 .0 5和P <0 .0 1) ;Ki6 7和VEGF在不同年龄、性别患者中的表达差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;Ki6 7和VEGF的表达与喉癌T分期有关 (P <0 .0 5 ) ,且Ki6 7和VEGF的表达之间存在正相关关系 (r =0 .82 3,P <0 .0 1)。结论 :Ki6 7和VEGF均可作为反映喉鳞状细胞癌生物学行为的客观参考指标 ,两者相结合可有助于喉癌的诊断、分期的判断和治疗方案的制定。; 孙大为王彦君孔维佳刘邦华陈雄张丹张甦林; 关键词：喉肿瘤内皮生长因子

应用嗜热菌蛋白酶快速分离活性纯椭圆囊感觉上皮细胞及其意义被引量：1: 2006年; 目的建立纯椭圆囊感觉上皮细胞(pure utricular sensory epithelial cell,PUSEC)的快速分离方法,为内耳细胞培养及毛细胞再生等机制研究提供大量的活性细胞。方法通过对出生5天大鼠PUSEC的形态、生长特征的观察,采用透射电镜,紧密联接蛋白(ZO-1)、细胞角蛋白、波形蛋白免疫荧光细胞化学、RT-PCR检测毛细胞的特征性标志物Calretinin、Brn3.a mRNA的表达等方法鉴定PUSEC来源。结果PUSEC呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态,细胞之间连接紧密,形成单层时呈“铺路石样”外观。可见由成百个PUSEC包绕液体而成的dome。PUSEC表达ZO-1和细胞角蛋白,不表达波形蛋白,表达毛细胞的特征性标志物Calretinin、Brn3.a的mRNA。结论PUSEC来源于椭圆囊感觉上皮;纯椭圆囊感觉上皮细胞成功分离为内耳细胞培养及毛细胞再生机制的研究提供大量的活性细胞;成功分离的关键成份是嗜热菌蛋白酶。; 刘俊孔维佳张亚民张丹; 关键词：嗜热菌蛋白酶椭圆囊感觉上皮细胞培养毛细胞支持细胞

Relation between the Expression of K-ras in Hep-2 Cells and Development of Laryngeal Carcinoma~*: 2006年; Objective： To investigate the expression of K-ras in human laryngeal squamous cell carcinoma cell lines （Hep-2） and its significance for establishing a solid foundation for further study of the relationship between human laryngeal squamous cell carcinoma and K-ras gene point mutations. Methods： The expression of K-ras in human laryngeal squamous cell carcinoma cell lines （Hep-2） and human pancreatic carcinoma cell lines （MIAPaCa-2） was detected by using RT-PCR. Results： The expression of K-ras mRNA in Hep-2 and MIAPaCa-2 was strong and positive. Conclusion： The expression of K-ras mRNA in human laryngeal squamous cell carcinoma cell lines （Hep-2） is positive. Development of laryngeal carcinoma might be related to the activation of K-ras gene point mutation.; 陈雄孔维佳张苏琳张丹; 关键词：K-RAS RT-PCR

超声极速成像评价颈动脉弹性的临床研究: 目的：脉搏波传播速度(Pulsed wave velocity,PWV)是临床反映动脉弹性的代表性指标,与动脉硬化病理进展及预后密切相关。作为反映早期全身动脉硬化的窗口血管,颈动脉局部僵硬度的准确评价有重要临床意义。本研...; 王静张丹周滨瑜项飞翔宋越; 关键词：颈动脉 PWV 超声

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张丹

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