刘怀伟
- 作品数：9 被引量：23H指数：2
- 供职机构：山东大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程天文地球医药卫生更多>>
- 一种特异性检测多硫化物的蛋白荧光探针及其制备方法与应用
- 本发明涉及一种特异性检测多硫化物的蛋白荧光探针及其制备方法与应用。本发明中蛋白荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，是基于绿色荧光蛋白基因定点突变改造而成的，还提供了该蛋白荧光探针的制备方法。本发明中蛋白荧光...
- 刘怀伟荀鲁盈李焕杰胡欣
- 文献传递
- 腐皮镰孢菌壳聚糖酶的酶学性质研究及其在酿酒酵母工业菌株中的表达被引量：11
- 2009年
- 【目的】本研究旨在了解腐皮镰孢菌(Fusariumsolani)壳聚糖酶的基本酶学性质及其在壳寡糖生产中的应用,构建能高效分泌表达壳聚糖酶的酿酒酵母工业菌株。【方法】采用RT-PCR扩增腐皮镰孢菌壳聚糖酶的cDNA序列;通过组氨酸标签,纯化得到E.coli表达的重组壳聚糖酶,并进行基本酶学性质研究;以薄层层析、高效液相色谱等技术对该酶的酶解产物进行分析;通过马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)菊粉酶信号肽(INU1A)实现壳聚糖酶在酿酒酵母工业菌株N-27中的分泌表达,得到高效分泌壳聚糖酶的重组工业菌株N-27C。【结果】所得到的壳聚糖酶cDNA序列(GenBank,EU263917)含有一个长为903bp的开放读码框,编码300个氨基酸残基。E.coli重组壳聚糖酶的最适温度为50℃,最适pH值为5.6,Km值为0.063mg/mL;该酶的水解产物中不含单糖,10糖以下组分占75%以上。酶活测定结果表明壳聚糖酶基因能在酿酒酵母中分泌表达,体积酶活达到50.2mU/mL。【结论】腐皮镰胞菌壳聚糖酶是一种内切型壳聚糖酶,在功能性壳寡糖的生产中具有良好的应用前景,分泌型表达该酶的酿酒酵母工业菌株对于该酶的规模化生产具有潜在用途。
- 刘怀伟鲍晓明
- 关键词：壳聚糖酶壳寡糖腐皮镰孢菌酿酒酵母
- 一种特异性检测多硫化物的蛋白荧光探针及其制备方法与应用
- 本发明涉及一种特异性检测多硫化物的蛋白荧光探针及其制备方法与应用。本发明中蛋白荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，是基于绿色荧光蛋白基因定点突变改造而成的，还提供了该蛋白荧光探针的制备方法。本发明中蛋白荧光...
- 刘怀伟荀鲁盈李焕杰胡欣
- 文献传递
- 新型木糖转化途径在木糖酸、乙二醇、丁二醇及丁三醇生产上的应用
- 刘怀伟
- 异养细菌硫代谢及其在海洋硫循环中的作用被引量：11
- 2018年
- 自然界中的硫循环与碳循环、氮循环紧密相关,它们通过各种生物地球化学过程耦合链接.海洋微生物由于其丰度高分布广、代谢途径多样、适应性强,因此在硫循环和碳、氮循环的耦合及相关生物地球化学循环中发挥至关重要的作用.当前,许多沿海地区饱受低氧/缺氧等生态灾害的困扰,其特征之一是有毒硫化氢的产生和积累.近年来,一系列研究表明:异养细菌的异化型硫氧化作用,对保护海洋生态系统免受硫化氢的毒害具有积极作用.硫氧化细菌在长期的进化过程中,形成了极其多样的系统发育和代谢特征,在不同海洋生境中承担了重要的生态功能.文章在总结硫氧化微生物类群和代谢多样性研究的基础上,阐述了硫元素和碳元素通过微生物代谢相互关联,并影响海洋生态系统的过程和机制.硫氧化细菌代谢途径的研究,可洞悉微生物的硫代谢过程,亦有助于解析环境条件变化对海洋硫循环的影响,为研究海洋硫循环和碳循环的耦合关系提供理论支撑.
- 胡欣刘纪化刘怀伟庄光超荀鲁盈
- 关键词：硫循环异养细菌代谢途径
- 腐皮镰孢菌中壳聚糖酶CSN1对其菌致病性的影响研究
- 壳聚糖是由氨基葡萄糖以β-1,4糖苷键连接而成的聚合物,天然存在于真菌和植物的细胞壁中。壳聚糖酶(E.C.3.2.1.132)是一种特异性水解壳聚糖生成壳寡糖的糖苷水解酶。腐皮镰孢菌(Fusarium solani)是一...
- 刘怀伟张博鲍晓明李长松
- 关键词：壳聚糖酶镰孢菌
- 一株能够代谢木糖的酿酒酵母菌株
- 本发明公开了一株能够代谢木糖的酿酒酵母菌株，所述菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BSHH02B，该菌已于2012年02月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC...
- 沈煜鲍晓明霍文严刘怀伟
- 一株能够代谢木糖的酿酒酵母菌株
- 本发明公开了一株能够代谢木糖的酿酒酵母菌株，所述菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BSHH02B，该菌已于2012年02月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC...
- 沈煜鲍晓明霍文严刘怀伟
- 文献传递
- 腐皮镰孢菌壳聚糖酶CSN1的基因克隆、表达及其对致病性影响的研究
- 壳寡糖(Chitooligosaccharides)是由氨基葡萄糖以β-1,4-糖苷键缩合而成的低聚物,聚合度一般为2-20,具有较低的分子量,呈水溶性,易于被细胞吸收,具有多种生物学活性,广泛应用于医药、保健、日化、农...
- 刘怀伟
- 关键词：腐皮镰孢菌壳聚糖酶RNAI
- 文献传递
