于海英
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学农业科学更多>>
- 抗对硫磷基因工程新型抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2010年
- 【目的】提高抗对硫磷抗体的亲和力以提高酶联免疫检测的灵敏度。【方法】本研究通过抗对硫磷单链抗体基因和核心链霉亲和素基因片段的拼接重组,获得了抗对硫磷单链抗体-核心链霉亲和素融合基因(scfv-sa),并将该融合基因(scfv-sa)插入到表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行原核表达,制备融合蛋白。SDS-PAGE和Western blot鉴定scfv-sa的表达,Ni+-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白,并用ELISA方法测定该融合抗体的亲和力。【结果】结果表明,在大肠杆菌BL21(DE3)中该融合基因能表达出分子量约为46kDa的融合蛋白,形成了四价结构域-四价聚合抗体。ELISA测定结果表明该抗体能与对硫磷特异结合,抗体效价在1:1×106以上,亲和常数为4.25×107L/mol。【结论】制备的抗对硫磷四价聚合抗体能与抗原特异结合,与单克隆抗体相比,抗原结合位点显著增加,ELISA检测灵敏度显著提高。
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- 关键词：对硫磷原核表达
- 苯酚羟化酶的功能与调控研究进展被引量：2
- 2010年
- 苯酚是一种广泛存在的芳香烃污染物,可以被一些环境微生物降解。苯酚好氧降解的第一步是苯酚被苯酚羟化酶催化为邻苯二酚。苯酚羟化酶的转录主要由XylR/DmpR调控蛋白激活,另外在一些多组分苯酚羟化酶操纵子中也发现了起抑制作用的调控蛋白。综述了苯酚降解菌中苯酚羟化酶的功能和调控机制等方面的研究进展。
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- 关键词：苯酚苯酚羟化酶调控蛋白
- 醋酸钙不动杆菌PHEA-2苯酚降解调控蛋白MphR化学信号域的研究被引量：2
- 2010年
- MphR是醋酸钙不动杆菌PHEA-2调控苯酚代谢的激活蛋白。通过分析苯酚羟化酶启动子的lacZ融合子(PmphK::lacZ)在21种苯酚及苯酚衍生物诱导时的β-半乳糖苷酶活性,确定了调控蛋白MphR化学信号域可以识别苯酚,邻甲酚,间甲酚,邻氯苯酚等酚类衍生物。大肠杆菌中逐段截短MphR化学信号域试验证实,当化学信号域截短后,MphR受苯酚诱导激活转录的功能丧失。结果表明,化学信号域对于苯酚激活转录功能极为重要。
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- 关键词：Β-半乳糖苷酶活性
- 苯甲酸对醋酸钙不动杆菌PHEA-2苯酚降解的碳代谢抑制
- 醋酸钙不动杆菌PHEA-2中苯酚和苯甲酸降解基因簇在染色体上相邻排列,并且苯酚降解基因簇位于苯甲酸基因簇的上游。两个芳香化合物在双加氧酶作用下转化为邻苯二酚后,均通过β-ketoadipate途径中的邻位裂解最终进入三羧...
- 战嵛华于海英陈明张维燕永亮林敏
- 关键词：醋酸钙不动杆菌碳代谢
- 文献传递
- 苯酚降解相关基因的功能分析
- 芳香族化合物是一类具有苯环结构的化合物,难溶于水,结构稳定,不易分解,而且大多数芳香族化合物是主要的环境污染物.本实验室从炼油废水中分离到一株苯酚降解菌,能够在以苯酚为单一碳源和能源的无机盐培养基上生长,经鉴定定名为醋酸...
- 于海英陈明王劲张维林敏
- 关键词：苯酚降解芳香族化合物环境污染物苯酚降解菌噬菌体基因文库
- 文献传递
- 一株苯胺降解菌的分离、鉴定及系统发育
- 从活性污泥中分离到14株能以苯胺为唯一碳源、氮源生长的苯胺降解菌株,其中D9菌降解效率最高,该菌株最高可以降解2200mg/L的苯胺,24小时降解效率可达到85.13﹪.降解苯胺的最适pH和温度分别为7.0和30℃,最适...
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- 关键词：苯胺降解系统发育分析
- 文献传递
