本研究以裸花紫珠(Callicarpae Nudiflorae Folium,CNF)的水提取物(CNF water extract,WCNF)和醇提取物(CNF ethanol extract,ECNF)作用于HepG2.2.15细胞,体外评价CNF提取物对HBV的抑制作用,同时结合网络药理学探究CNF抗HBV的潜在作用机制。体外实验采用CCK-8法测定CNF提取物对细胞的毒性;酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)和乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)分泌量,实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR)法测定HBV DNA及关键靶点基因表达量。通过文献调研、TCMSP数据库检索CNF化学成分、Gene Cards数据库检索HBV相关靶点开展网络药理学研究;运用String数据库构建蛋白互作网络,DAVID数据库进行GO功能及KEGG通路富集分析,Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络可视化并进行拓扑学分析,AutoDock Vina软件进行CNF抗HBV关键成分与核心靶点的分子对接分析,并通过RT-PCR实验对关键靶点进行实验验证。体外实验结果表明CNF水醇提取物均可抑制HbeAg和HBsAg的分泌量,抑制HBV DNA的复制水平,并且水提物的抑制作用明显地强于醇提物。网络药理学结果显示,熊果酸、槲皮素、木犀草素、咖啡酸等化合物为CNF抗HBV的关键活性成分,肿瘤蛋白53(tumor protein 53,TP53)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、热休克蛋白90Alpha家族A类成员1(heat shock protein 90 alpha family class A member 1,HSP90AA1)为核心靶点,涉及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)、丝裂原蛋白活化激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)等信号通路。此外,实验结果显示CNF提取物可抑制HBV关键基因IL-6、TNF及HSP90AA1表达并提高TP53基因的mRNA表达水平。以上研究揭示了CNF通过多成分、多靶点、多途径发挥抗HBV的作用。后续将�
目的通过文献计量学对中医药肝损伤领域的相关研究文献进行分析,探讨当前中医药在肝损伤领域的研究热点及趋势。方法检索2004—2024年CNKI和Web of Science(WoS)核心数据库中有关中医药在肝损伤领域的文献,使用CiteSpace、VOSviewer和Excel软件对该领域的中、英文文献整体产出、研究主体及合作网络、关键词等进行分析。结果经筛选最终纳入中文文献1304篇、英文文献1393篇。中医药在肝损伤领域的相关文献发文量大体呈现逐年增加的趋势,中国为发文量最多的国家。位居中英文文献发文量榜首的机构分别为南京中医药大学、Shanghai University of Traditional Chinese Medicine(上海中医药大学)。中、英文文献发文量最多的作者均为肖小河。中、英文关键词共现、聚类显示研究热点及趋势侧重于分析肝损伤中药的活性成分、探究其药理作用机制等方面。结论目前该领域的研究主体仍为中国,但在全世界范围内受到越来越多医学工作者的持续关注,未来需增进科研单位之间的交流与合作,加强肝损伤中药的临床研究,以期为中医药在肝损伤领域的进一步发展提供借鉴和参考。
