转基因生物新品种培育专项(2008ZX08012-001)
- 作品数：20 被引量：160H指数：8
- 相关作者：张明李飞武李葱葱邢珍娟曲波更多>>
- 相关机构：中国检验检疫科学研究院中国农业大学吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家高技术研究发展计划黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数被引量：3
- 2011年
- [目的]采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源nos终止子基因的拷贝数。[方法]以大豆凝集素基因为内参照基因,以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的Ct值与拷贝数对数值的相关性标准曲线方程,并通过将得到的Ct值代入标准曲线方程求取了样品的拷贝数。[结果]内参照基因标准曲线方程为y=-3.422x+35.201,R2=0.998;外源基因标准曲线方程为y=-3.348x+34.890,R2=0.999。nos终止子基因及其下游边界序列在转基因杂交大豆中为单拷贝。[结论]为确定转基因大豆外源基因拷贝数提供了理论依据。
- 仇有文张明辉高学军曲波敖金霞袁肖寒刘营霍楠
- 关键词：REAL-TIMEPCR拷贝数LECTIN
- 16S rDNA克隆文库法探索转基因香石竹对土壤细菌群落的影响被引量：8
- 2012年
- 【目的】通过研究转基因香石竹对土壤细菌群落的影响,为转基因香石竹的环境安全性评价提供依据。【方法】通过构建16S rDNA克隆文库,分析种植转基因和非转基因香石竹的土壤中细菌的群落结构组成。【结果】转基因和非转基因香石竹土壤中,共有的菌群有变形菌门(Proteobacteria)、浮霉菌门(Planctomycetes)、酸杆菌门(Acidobacteria),其中α-变形菌门、β-变形菌门、浮霉菌门为优势菌群;而在放线菌门(Actinobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)及未培养菌(Uncultured bacterium clone)等菌群存在部分差异。【结论】通过16S rDNA克隆文库方法揭示了转基因香石竹的土壤中细菌多样性十分丰富,其栽培对土壤细菌群落结构影响有限。
- 白蓝赵明文贾军伟李鹏王金斌潘爱虎
- 关键词：土壤细菌群落
- 转基因生物检测技术研究进展被引量：3
- 2011年
- 转基因技术的发展,促进了转基因生物(genetically modified organisms,GMO)的数量、多样性不断增加,给GMO检测工作提出了新的挑战,同时也促进了GMO检测方法的发展。GMO检测新方法突破了传统方法中一次只能分析一个靶目标的限制,新方法一次可以检测多个靶目标,向高通量检测的方向发展。作者对最新报道的GMO检测方法作一概述,主要包括实时荧光PCR多靶分析方法,锁式探针-基因芯片方法、液相芯片方法,多重PCR-毛细管电泳方法,生物发光检测方法,以及为GMO检测提供方法决策的支持系统(DSS、GMO示踪)等。
- 李全芬李志辉王慧煜韩雪清
- 关键词：PCR高通量DSS
- 进口加拿大油菜籽真菌与转基因品系检测技术研究
- 油菜是世界上最主要的油料作物之一，在世界农产品贸易发展中占有重要地位。我国是世界油菜籽十大生产国和消费国之一，虽然我国油菜种植面积逐渐扩大，但是由于油菜籽生产规模小、产品质量不高、生产加工技术落后等因素，已远远满足不了人...
- 陈明爱章桂明周德群程颖慧王颖张雪
- 关键词：油菜籽病原真菌转基因多重PCR
- 转基因大豆MON89788检测质粒标准分子的构建与应用被引量：7
- 2010年
- [目的]构建适用于转基因大豆MON89788检测的质粒标准分子。[方法]利用定性PCR和连接、转化等分子克隆技术,将大豆内标准基因lectin、MON89788的3′端特异性序列和5′端特异性序列依次克隆到pMD18-T载体上,获得质粒标准分子pMD-LM3M5,并进行适用性验证。[结果]获得了3700bp的质粒标准分子,其中重组DNA片段1029bp。该质粒标准分子的定性PCR检测灵敏度达到10copy。[结论]该研究构建的质粒标准分子pMD-LM3M5能替代MON89788基体标准品,用于MON89788大豆及其产品的定性PCR检测。
- 李飞武邵改革邢珍娟李葱葱夏蔚张明
- 关键词：转基因生物
- 转人血清白蛋白基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立被引量：1
- 2010年
- 建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境监测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据转基因奶牛内源基因β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2 M),外源基因人血清白蛋白基因(Human α-lactalbumin,α-LA)及标记基因绿色荧光蛋白基因(EGFP)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。该方法敏感、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。
- 朱振营林祥梅刘建吴绍强仇松寅王建武薛振华
- 关键词：转基因奶牛多重PCR
- 转基因水稻“科丰6号”实时荧光PCR定性定量检测方法研究被引量：11
- 2010年
- 旨在建立转基因水稻"科丰6号"外源基因和边界序列的实时荧光PCR检测方法,为科丰6号定性定量检测提供技术支持。根据外源基因和边界序列信息,设计实时荧光PCR探针引物,优化体系,对不同转基因产品和不同转基因含量的"科丰6号"水稻进行检测。结果显示,所设计的引物探针具有很好的特异性,与其他转基因水稻品系、转基因玉米、转基因棉花、转基因番茄和非转基因水稻均无非特异性反应,对转基因水稻"科丰6号"的检测灵敏度达到0.01%。建立的科丰6号实时荧光PCR检测方法重复性好、灵敏度高,能够达到目前国际上转基因产品定量检测的标准,为该水稻品系的定性定量检测提供技术支持。
- 黄新张琰侯立华张祺陈洪俊朱水芳
- 关键词：实时荧光PCR
- 转人溶菌酶基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立被引量：5
- 2010年
- 建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)设计奶牛内源性基因引物,根据外源基因人溶菌酶基因(human lysozyme,hLY)及标记基因新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。结果表明,建立的方法灵敏、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。
- 朱振营林祥梅刘建吴绍强仇松寅王建武薛振华
- 关键词：转基因多重PCR
- 转人溶菌酶基因奶牛多重PCR检测方法研究
- 建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDN...
- 朱振营林祥梅刘建吴绍强仇松寅李宁王建武薛振华
- 关键词：转基因多重PCR
- 文献传递
- 转基因大豆、玉米、水稻深加工产品的五重巢式PCR技术检测被引量：27
- 2010年
- 本试验针对已商品化的转基因大豆、玉米和水稻的主要外源基因Cry1A(B)基因、BAR基因、CP4-EPSPS基因和PAT基因及共有的内标准基因RBCL基因设计了10对引物,对从超市购买的进口大豆、玉米和水稻的11种深加工制品(未标注是否含有转基因成分)进行了五重巢式PCR定性检测。第1轮普通五重PCR检测,11个待测样品均未出现任何转基因成分,其灵敏度为0.5%;第2轮将普通五重PCR扩增产物进行五重巢式PCR检测,结果在卵磷脂、大豆蛋白质粉、巧克力饮品和婴儿米粉中扩增出RBCL基因,玉米淀粉和玉米泥中扩增出RBCL基因、Cry1A(B)基因和PAT基因;玉米蛋白粉扩增出RBCL基因、Cry1A(B)基因和BAR基因,营养麦片扩增出内参RBCL基因和Cry1A(B)基因,在大豆精炼油、色拉油和玉米油中未检测出上述2种基因和另外3种外源基因CP4-EPSPS、BAR和PAT,其检测灵敏度为0.005%。结果提示,五重巢式PCR检测方法适用于转基因大豆、玉米和水稻深加工产品的定性检测。
- 敖金霞高学军于艳波曲波李庆章
- 关键词：转基因大豆玉米水稻深加工产品
