国家质检总局科技计划项目(2011IK150)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：燕清丽杨鹏飞张丽萍李军鹰姚海波更多>>
- 相关机构：淮安市疾病预防控制中心中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 汉坦病毒通用型实时荧光定量RT-PCR方法的建立及应用被引量：5
- 2016年
- 目的建立一种适应汉坦病毒不同基因型别的通用实时荧光定量RT-PCR检测方法。方法利用Beacon Designer7.5软件设计引物和探针,以人工合成汉坦病毒5种具有代表性基因型别的L片段作为模板,进行实时荧光定量RT-PCR方法的建立,确定所建立方法的检测限及灵敏度并对采集的112份鼠肺进行快速检测。结果 5种模板RNA的Ct值与其稀释浓度的对数存在良好的线性关系,以HTNV为例建立的标准曲线为:y=-3.40x+46.8,R2=0.99,其最低检出限为5.32 copies/μl,对于不同基因型别的汉坦病毒,其检测最低限:HTNV为12.40 copies/μl、SEOV为5.32 copies/μl、PUUV为15.02 copies/μl、DOBV为22.14 copies/μl及SNV为24.26 copies/μl。对112份鼠肺样本的病毒检出率为17.86%,较巢式RT-PCR的检出率(8.04%)高。结论建立的通用型实时荧光定量RT-PCR方法灵敏度高,检测的广谱性好,适合啮齿类动物中携带的汉坦病毒的快速检测。
- 杨鹏飞燕清丽张丽萍马雪征刘纯成时玉军李军鹰姚海波何南江
- 关键词：汉坦病毒基因型
- 普马拉病毒实时荧光定量RT-PCR方法的建立被引量：1
- 2013年
- 目的建立一种适应国境口岸地区特定鼠种中普马拉病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法。方法利用Beacon Designer7.0软件设计引物和探针,以人工合成普马拉病毒S基因的片段作为模板,进行实时荧光定量RT-PCR检测,并验证该方法的灵敏度及特异性。结果模板的Ct值与模板稀释浓度的对数存在良好的线性关系,标准曲线y=-3.122x+38.605,R2=0.995,PCR扩增效率为109.1%,其最低检出限为31.6copies/μl。结论建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,适合于普马拉病毒的快速检测。
- 杨鹏飞燕清丽张丽萍徐焕洲王玉春甄维胡孔新
- 关键词：普马拉病毒实时荧光RT-PCR
