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小反刍兽疫研究概况被引量：4: 2011年; 小反刍兽疫是严重危害山羊和绵羊等家畜的A类动物传染病,目前该病已经给我国养羊业造成了巨大的威胁。近年来,国内外学者对该病开展了许多研究工作,本文从病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理变化、诊断、防控措施等几个方面对该病研究概况进行了综述,为该病的有效防控提供有益的参考。; 李林才学鹏孟庆玲乔军; 关键词：小反刍兽疫病毒

小反刍兽疫病毒重组抗原间接ELISA检测及初步应用被引量：2: 2010年; 为了建立一种快速、特异、敏感的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血清学检测方法,本研究将PPRV血凝蛋白(H)和核蛋白(N)克隆至pET28a(+)载体进行诱导表达,并将2种蛋白Ni柱纯化后包被ELISA反应板,建立起检测PPRV特异性抗体的间接ELISA法。结果表明在E.coli BL21(DE3)中表达出2种PPRV蛋白,将2种重组蛋白纯化后按照1:1比例混合,制备PPRV鸡尾酒抗原,成功建立了特异性强、敏感性高的PPRV间接ELISA法;最后用建立的方法对新疆伊犁、塔城、阿勒泰和喀什边境地区采集的325份山羊、789份绵羊和132份牛血清进行了抗体检测,检测结果显示均为阴性,提示在我国新疆边境地区反刍动物尚未发生PPRV感染,但需要及时进行免疫接种以建立预防PPRV从国外传入的免疫带。本研究建立的PPRV间接ELISA法为该病毒的检测提供基础,也为该病的科学防控提供参考。; 孟庆玲才学鹏倪伟任艳李贞刘佳旭乔军; 关键词：小反刍兽疫间接ELISA 竞争ELISA

荷斯坦奶牛IFN-γ基因的克隆、序列分析及表达研究: 2010年; 利用RT-PCR技术从荷斯坦奶牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增IFN-γ(ccIFN-γ)基因,克隆至pMD18-T载体进行测序。测序结果表明,ccIFN-γ基因全长501bp,编码166个氨基酸,其中前23个氨基酸残基构成信号肽序列,后面147氨基酸残基构成成熟肽,其中含有2个潜在的N-链糖基化位点。二级和三级结构预测发现,ccIFN-γ蛋白分子中存在7个的α-螺旋,中间由无规卷曲连接,折叠成由α-螺旋包绕的中空状结构。将ccIFN-γ成熟肽编码区序列进一步克隆至pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。经SDS-PAGE分析,表达出与预期大小(20.6KDa)相符的重组蛋白,占菌体蛋白18.6%。Western blot检测证实表达的融合蛋白为牛IFN-γ,这为进一步开展重组ccIFN-γ生物学活性的研究奠定了基础。; 李贞陈创夫乔军任艳张辉杨明峰刘佳旭倪伟; 关键词：荷斯坦奶牛 Γ-干扰素基因原核表达

奶牛乳房炎防治的新进展被引量：15: 2011年; 奶牛乳房炎是高产奶牛最常见的疾病,对奶业的发展危害严重。近年来,国内外学者对该病开展了大量的研究工作,作者对奶牛乳房炎的研究进展作一综述,为该病的科学防治提供有益的参考。; 李国华李贞乔军陈创夫; 关键词：奶牛乳房炎

小反刍兽疫病毒融合蛋白基因的克隆、序列分析及表达被引量：2: 2011年; 根据GenBank报道的小反刍兽疫病毒（PPRV）融合蛋白（F）基因序列,用特异性引物对PPRV疫苗株F蛋白基因进行了RT-PCR扩增,并将其克隆到pGEM-T载体中进行测序。结果表明：F基因ORF全长1641 bp,编码546个氨基酸;推导的氨基酸序列中第1~18位氨基酸构成信号肽序列,第488~510氨基酸为跨膜区。构建原核表达载体pETF1和pETF2,转化E.coliBL21（DE3）,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western-blotting的分析结果表明,F1和F2基因在大肠杆菌中均获得了表达,且均具有良好的反应原性。用Ni-NTA试剂盒纯化F1和F2重组蛋白,为研发检测PPRV特异性抗体的诊断试剂奠定了基础。; 倪伟才学鹏乔军孟庆玲陈创夫任艳; 关键词：小反刍兽疫病毒融合蛋白基因克隆原核表达

金黄色葡萄球菌FnBP重组牛痘病毒的构建与鉴定研究: 利用PCR技术从致奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌SHZ1株基因组中扩增出FnBP基因,构建重组转移质粒pSC11-FnBP,利用脂质体转染法将重组转移质粒转染已感染牛痘弱毒株病毒的BHK-21细胞中,蓝白斑筛选重组牛痘病毒。...; 李贞陈创夫乔军胡圣伟; 关键词：金黄色葡萄球菌; 文献传递

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家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金(KEYLAB200802)