通威股份科研项目 作品数:27 被引量:184 H指数:10 相关作者: 汪开毓 王均 徐恒 黄锦炉 陈德芳 更多>> 相关机构: 通威(集团)有限公司 四川农业大学 四川大学 更多>> 发文基金: 长江学者和创新团队发展计划 四川省科技攻关计划 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)荚膜多糖合成基因研究进展 被引量:1 2013年 无乳链球菌是一种人畜鱼共患的重要病原菌,菌体表面的荚膜多糖是公认的毒力因子,其合成过程受荚膜多糖合成基因的调控。荚膜多糖合成基因存在于荚膜多糖操纵子中,参与无乳链球菌荚膜多糖的合成启动、寡糖和多糖的聚合以及外输并锚定于菌体表面,在新型诊断技术和减毒突变株的构建方面取得良好的应用。本文首次就cps基因的基本属性、转录调节、编码蛋白及其生物功能、对荚膜多糖合成的调控机理、在血清分型和突变株构建的应用这六个方面进行深入分析和讨论,以期为GBScps基因的新功能研究和创新应用提供理论参考。 汪开毓 黄锦炉 肖丹 王均 黄凌远关键词:无乳链球菌 普通变形杆菌TWN3株DNA疫苗的初步研究 2009年 普通变形杆菌TWN3分离自死亡大口鲇,菌的DNA文库已构建成功,通过免疫印迹法从文库中筛选到TWN3抗原片段PV4,将其克隆到真核表达载体pcDNA3上,构建DNA疫苗pcDNA3-PV4。肌肉注射免疫小鼠进行真核表达检测。免疫组织化学分析DNA疫苗在接种局部肌肉中抗原的表达,ELISA检测小鼠血清中的IgG及IFN-γ含量。免疫pcDNA3-PV4疫苗的小鼠肌肉细胞中检测到PV4相关抗原蛋白的表达,外周血中的IgG及IFN-γ显著高于免疫pcDNA3组。对小鼠进行免疫保护试验,免疫DNA疫苗的小鼠对TWN3菌有免疫力。初步显示构建的DNA疫苗有一定效果。试验结果为鱼类水体试验提供了参考依据,同时随着TWN3株菌DNA疫苗研究的深入,将对该疫苗最终大规模用于鱼类提供理论基础。 王娟 辜文博 冯军 顾继锐 吴江 徐恒关键词:DNA文库 DNA疫苗 丁香酚对鲫鱼麻醉效果的研究 被引量:26 2010年 采用丁香酚对鲫鱼(130±10g)进行了麻醉效果的研究。结果显示:水温28℃下,丁香酚浓度在37~80mg/L时,鲫鱼都能被理想麻醉,且随着浓度的增加,麻醉时间缩短,但复苏时间延长;丁香酚浓度为40mg/L,水温在20.6~35℃时,鲫鱼都能被理想麻醉;水温28℃,丁香酚浓度在40mg/L时,麻醉时间为7min,复苏率为100%,空气暴露时间15min,复苏率为100%。丁香酚可以被用作鲫鱼的一种安全有效的麻醉剂。 陈德芳 汪开毓 肖丹 王均 阳涛 谢述琼 华天关键词:丁香酚 麻醉剂 生产虾青素的雨生红球藻藻株及其培养基筛选 被引量:1 2016年 为筛选获得适合大规模生产虾青素的藻株及适宜其生长和虾青素积累的培养基,研究比较了3个不同品系的雨生红球藻H2、H3、H4在4种不同培养基BBM、BBM+1g/LNaAC、SM、BGl1中的生长和虾青素积累情况。结果表明:SM有利于雨生红球藻的生长和生物量的积累:而在相同培养基中,生长速度为H3〉H2〉H4。在所有试验组中,藻株H3在培养基SM中营养生长和生物量积累最快,在培养基BBM+1g/LNaAC中虾青素含量(2.17%)和虾青素产量(30.1mg/L)最高,分别为其他试验组的1.16~4.72倍(P〈0.05)和1.18~6.28倍(P〈0.01)。因此,藻株H3比较适宜作为大规模培养的藻株,其最适生长繁殖和虾青素积累的培养基分别为SM和BBM+1g/LNaACn, 吴晓娟 唐小平 苏艳秋 罗国强关键词:雨生红球藻 培养基 干重 虾青素 蛭弧菌研究进展 被引量:10 2007年 蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)是一类专性捕食革兰氏阴性菌的寄生细菌,在自然界分布广泛。蛭弧菌研究集中在蛭弧菌分类和基因组分析上,并以此指导蛭弧菌噬菌机制的研究,同时在生态学研究方面也有进展。蛭弧菌的噬菌性质可能作为一种行使杀菌功能的"活抗生素"成为目前研究热点。但在应用方面还存在一些需进一步研究和解决的问题。 朱文漓 李永文 屈刚 吴江 徐恒关键词:蛭弧菌 转生长激素基因中华倒刺鲃的构建及其检测 被引量:8 2006年 用从斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)cDNA文库克隆到的生长激素基因,与鲤β肌蛋白启动子、大麻哈鱼生长激素基因的poly(A)终止信号序列等调控元件共同构建了表达重组质粒pFV2 cfGH。提取重组质粒,用精子载体法导入中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)的受精卵中,经孵化培养成转基因成鱼。抽提423尾转基因实验鱼血总DNA,经PCR检测表明:斑点叉尾鮰生长激素基因已导入中华倒刺鲃基因组中,导入率为17.26%。同时通过RT-PCR技术检测阳性中华倒刺鲃中生长激素基因的表达情况。 丁洁 顾继锐 伍翠芳 李永文 张涛 吴江 谢显连 徐恒关键词:生长激素基因 转基因鱼 反转录PCR 南方鲇溃疡综合症病原菌的分离与鉴定 被引量:22 2008年 从南方鲇(Silurus meriordinalis Chen)病鱼体表溃疡部及内脏分离出细菌12株,经人工感染证实其中6株治病,生化鉴定6株为同一种菌即为引起该鱼溃疡综合症的病原菌,命名为DKN-1。该菌为革兰氏染色阴性,兼性厌氧发酵型短杆菌,极生单鞭毛,对除葡萄糖、麦芽糖、甘露糖、海藻糖、甘露醇、水杨苷、七叶苷以外多种糖不利用,氧化酶、过氧化氢酶、DNA酶、脂酶、蛋白酶、精氨酸双水解酶阳性,MR、VP阳性。在以该菌16S rDNA序列和GenBank及RDP数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列构建的系统发育树中,DKN-1与豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)同源性达到99.6%,综合该菌在形态、生理生化的结果,鉴定其为豚鼠气单胞菌。该病病原对美满霉素、大观霉素、妥布霉素高度敏感。 吉莉莉 汪开毓 肖丹 阳涛关键词:RDNA 罗非鱼无乳链球菌α蛋白基因的克隆、鉴定及分子特性分析 被引量:1 2014年 本研究克隆了罗非鱼源无乳链球菌HN0101分离株的α蛋白基因,通过生物信息学对其序列分析结果显示:α蛋白基因的ORF由1341个碱基组成,编码一个长度为446个氨基酸的多肽,N-端具有一个保守的YSIRK信号肽序列和一个AlphaC_N超家族结构域,C-末端含有1个保守Gram_pos_anchor超家族结构域,而在中间具有2个重复的Rib结构域;比较不同来源分离株的α蛋白结构,发现主要区别在于Rib结构域重复数目的不同;同源性及系统进化树分析,发现本株菌的α蛋白与已报道的人源A909和鱼源GD201008-001α蛋白聚为一簇,同源性达100%;罗非鱼源无乳链球菌α蛋白为亲水性蛋白,存在一个跨膜区,有37个潜在的磷酸化位点和1个潜在的N-糖基化位点;二级结构分析发现存在较多的无规则卷曲,推测有12个氨基酸区域可能是B细胞抗原表位;当选择大肠杆菌为表达宿主时,该重组蛋白的溶解度高达100%,亚细胞定位显示该蛋白位于细胞壁上。 邓永强 汪开毓 王均 邓绿洲 樊威 王二龙 黄小丽 陈德芳关键词:罗非鱼 无乳链球菌 克隆 分子特性 裂殖壶藻发酵过程中脂肪酸合成代谢规律及其影响因素探讨 被引量:2 2019年 探究裂殖壶藻(Schizochytrium sp.)A3-9在不同发酵条件下生物量和脂肪酸含量的变化规律。结果显示,初始葡萄糖含量90 g/L,碳氮比8时最有利于裂殖壶藻生物量积累,此时生物量可达38.12 g/L,较对照组提高了104.59%;装液量220 m L/500 m L,柠檬酸添加量1.6 g/L,碳氮比23时总脂肪酸的积累可达47.16 g/100 g藻粉,较对照组提高了40.25%。不同发酵条件下裂殖壶藻胞内脂肪酸的代谢流量分布分析显示,初始葡萄糖含量90 g/L,碳氮比8,装液量60 m L/500 m L,柠檬酸和苹果酸添加量1.6 g/L时最有利于乙酰辅酶A(CoA)流入聚酮合酶(PKS)途径合成不饱和脂肪酸,此时不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸含量之比可达1.15,相比对照组提高了21.28%;而当碳氮比14.75,装液量220 m L/500 m L时二十二碳六烯酸(DHA)与二十二碳五烯酸(DPA)含量之比可达6.82,较对照组提高了3.02%。 杨丽 曾娟 吴正云 苏艳秋 张文学关键词:发酵优化 生物量 脂肪酸 二十二碳六烯酸 罗非鱼源无乳链球菌双重PCR快速检测方法的建立 被引量:24 2011年 根据GenBank中罗非鱼源无乳链球菌荚膜多糖的cpsF基因和CAMP因子的cfb基因序列,设计2对特异性引物,通过对反应体系和反应条件优化,并进行特异性试验、敏感性试验及人工感染罗非鱼组织样品检测,建立了快速检测无乳链球菌的双重PCR方法。结果显示,仅无乳链球菌能扩增出cpsF和cfb两条特异性条带,而海豚链球菌、金黄色葡萄球菌、鮰爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌、豚鼠气单胞菌、嗜麦芽寡养单胞菌无条带检出;经敏感性试验,最小模板检出量为7.632×10-2ng/μL;同时对30尾人工感染无乳链球菌的罗非鱼肝和肾组织中细菌DNA进行双重PCR检测和细菌分离鉴定,检出的阳性结果一致。证实,所建立的方法具有快速、特异、灵敏的优点,适用于对罗非鱼等无乳链球菌的感染病例进行流行病学监测。 王均 汪开毓 肖丹 黄锦炉 付希 王浩丞 陈德芳 耿毅 阳涛关键词:无乳链球菌 罗非鱼